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尾叶桉再生体系的建立及TSRF1基因遗传转化的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-13页
第一章 前言第13-26页
 1 桉树组织培养研究进展第13-15页
   ·桉树组织培养的意义第13-14页
   ·桉树组织培养研究进展第14-15页
 2 林木抗病基因工程研究进展第15-17页
   ·林木基因工程第15-16页
   ·林木抗病基因工程研究进展第16-17页
 3 桉树基因工程研究进展第17页
 4 转录因子在植物防卫反应中的作用第17-18页
 5 ERF转录因子研究进展第18-22页
   ·ERF转录因子的主要结构特征及分类第18-19页
   ·ERF转录因子在植物防卫反应中的作用第19-22页
     ·ERF转录因子在植物防卫反应信号传递途径中的作用第19-21页
     ·ERF转录因子在提高植物抗病能力中的作用第21-22页
 6 TSRF1转录因子研究进展第22-24页
   ·TSRF1转录因子的特性介绍第22-23页
   ·TSRF1转录因子的功能介绍第23-24页
 7 本研究的目的意义及主要内容第24-26页
   ·尾叶桉U6再生体系的建立第24-25页
   ·农杆菌介导桉树转化体系的优化第25-26页
第二章 尾叶桉的组织培养与快速繁殖第26-50页
 1 材料第26页
 3 实验方法第26-29页
   ·主要植物生长调节剂及培养基基本成分的配制第26页
     ·主要植物生长调节剂的配制第26页
     ·培养基基本成分的配制方法第26页
   ·实验材料的获得第26页
   ·愈伤组织的诱导第26-28页
     ·苗龄第27-28页
     ·暗处理时间第28页
     ·不同浓度的Vc、Ac(活性炭)及PVP第28页
   ·不定芽的诱导及分化第28-29页
     ·诱导不定芽的产生第28页
     ·不定芽的伸长第28-29页
   ·诱导丛生芽的增殖第29页
     ·不同激素的选择第29页
     ·基本培养基第29页
   ·再生苗的生根与移栽第29页
     ·基本培养基及不同激素组合第29页
     ·蔗糖第29页
     ·移栽第29页
 4 结果与分析第29-42页
   ·不同消毒剂及消毒时间对无菌材料的获得的影响第29-30页
   ·愈伤组织的诱导第30-33页
     ·苗龄对愈伤组织诱导的影响第31-32页
     ·暗处理时间对愈伤组织防褐化的影响第32-33页
     ·不同添加剂对愈伤组织抗褐化的影响第33页
   ·不定芽的诱导及分化第33-38页
     ·诱导不定芽的产生第33-37页
     ·不定芽的伸长第37-38页
   ·诱导丛生芽的增殖第38-40页
     ·不同激素种类及配比对芽增殖的影响第38-39页
     ·基本培养基对丛生芽增殖的影响第39-40页
   ·再生苗的生根及移栽第40-42页
     ·不同浓度的IBA对生根的影响第40-41页
     ·不同浓度的NAA与IAA组合对生根的影响第41页
     ·蔗糖浓度对生根的影响第41-42页
 5 讨论第42-46页
   ·光照对无菌苗继代增殖的影响第42页
   ·褐化问题的探讨第42-43页
     ·影响褐化的因素第42-43页
     ·控制褐化的措施第43页
     ·本研究对褐化控制的探讨第43页
   ·玻璃化的探讨第43-44页
     ·影响玻璃化的因素第44页
     ·控制玻璃化的措施第44页
     ·本研究对玻璃化控制的探讨第44页
   ·关于LC运用的探讨第44-45页
   ·多胺对尾叶桉下胚轴不定芽分化与伸长的影响第45-46页
   ·生根第46页
   ·炼苗第46页
 6 小结第46-47页
 7 附图第47-50页
第三章 TSRF1基因导入桉树的研究第50-68页
 1 材料第50-51页
   ·植物材料第50页
   ·菌种与质粒第50页
   ·试验用基本培养基第50-51页
     ·农杆菌培养基第50页
     ·遗传转化基本培养基第50-51页
   ·主要试剂及其配制第51页
 2 方法第51-56页
   ·尾叶桉抗生素敏感性实验第52页
     ·卡那霉素(Kan)抑制桉树下胚轴不定芽分化实验第52页
     ·卡那霉素(Kan)抑制桉树生根实验第52页
     ·头孢霉素(Cef)耐性实验第52页
     ·头孢霉素(Cef)抑制农杆菌实验第52页
   ·农杆菌中目的基因的检测第52-53页
     ·农杆菌质粒提取第52-53页
     ·PCR检测目的基因第53页
   ·农杆菌介导的尾叶桉遗传转化体系的建立第53-55页
     ·工程菌液的制备第53-54页
     ·遗传转化参数的优化第54页
     ·转化方法第54-55页
   ·转化植株的分子检测第55-56页
     ·CTAB法小量提取辣椒基因组总DNA第55-56页
     ·PCR检测目的基因第56页
 3 实验结果第56-62页
   ·尾叶桉抗生素敏感性实验第56-58页
     ·卡那霉素选择压的确定第56-57页
     ·头孢霉素对桉树下胚轴不定芽诱导的影响第57-58页
     ·头孢霉素对农杆菌的抑制作用第58页
   ·PCR检测质粒中的目的基因第58-62页
     ·预培养时间对转化的影响第59页
     ·农杆菌菌液浓度对转化的影响第59-60页
     ·侵染时间对转化的影响第60-61页
     ·共培养时间对转化的影响第61页
     ·农杆菌介导尾叶桉遗传转化体系的建立第61页
     ·转基因植株的PCR检测第61-62页
 4 讨论第62-68页
   ·影响桉树转化的因素第62-64页
   ·影响桉树抗生素敏感性试验的因素第64页
   ·预培养时间对转化的影响第64-65页
   ·侵染时间对转化的影响第65页
   ·共培养时间对转化的影响第65页
   ·延迟筛选对转化的影响第65-66页
   ·关于检测方法的比较第66页
   ·关于假转化体和基因沉默第66-68页
本研究的主要创新点及下一步工作设想第68-69页
参考文献第69-78页
缩略表第78-79页
致谢第79-80页
作者简介第80页

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