| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-22页 |
| 1 植物通讯的研究进展 | 第11-12页 |
| ·植物之间通讯的主要内容 | 第11-12页 |
| ·植物通讯信号的传递 | 第12页 |
| 2 植食性昆虫诱导的挥发性有机成份在植物个体间通讯中的作用 | 第12-16页 |
| ·植食性昆虫诱导的挥发性有机成份与植物防御植物防御 | 第13-14页 |
| ·水杨酸诱导的植物防御 | 第14页 |
| ·茉莉酸诱导的植物防御 | 第14-15页 |
| ·昆虫分泌物诱导的植物防御 | 第15-16页 |
| 3 萜类化合物的研究进展 | 第16-20页 |
| ·萜类化合物与植物通讯 | 第16页 |
| ·萜类化合物的结构 | 第16页 |
| ·萜类化合物的功能 | 第16-17页 |
| ·萜类化合物的合成 | 第17页 |
| ·MVA途径 | 第17-18页 |
| ·DOXP/MEP途径 | 第18-20页 |
| ·萜类合成酶 | 第20页 |
| 4 β—罗勒烯与植物通讯 | 第20-21页 |
| 5 本研究的创新点和意义 | 第21-22页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第22-35页 |
| 1.实验材料 | 第22页 |
| ·菌种 | 第22页 |
| ·质粒载体 | 第22页 |
| ·植物材料 | 第22页 |
| 2.仪器设备 | 第22页 |
| 3.常用试剂药品的配制 | 第22-23页 |
| ·培养基的配制 | 第22页 |
| ·常用溶液的配制 | 第22-23页 |
| ·各种酶及试剂 | 第23页 |
| ·GUS染色液的配制 | 第23页 |
| 4.实验方法 | 第23-34页 |
| ·双元表达载体的构建 | 第24-34页 |
| ·PCR反应引物的设计 | 第24页 |
| ·拟南芥总RNA提取与拟南芥cDNA的制备 | 第24-25页 |
| ·拟南芥总RNA的提取 | 第24-25页 |
| ·反转录反应 | 第25页 |
| ·CTAB法提取DNA | 第25-26页 |
| ·PCR反应 | 第26页 |
| ·试剂盒回收纯化琼脂糖中的DNA片段 | 第26-27页 |
| ·PCR产物的测序和比对 | 第27-29页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
| ·DNA片段连接到T载体 | 第28页 |
| ·试剂盒抽提纯化小量质粒 | 第28-29页 |
| ·对转入DNA片段的T-载体进行酶切验证 | 第29页 |
| ·对PCR产物进行测序、比对 | 第29页 |
| ·表达载体转化大肠杆菌 | 第29-30页 |
| ·PCR产物与质粒的连接 | 第29-30页 |
| ·连接产物热激法转化大肠杆菌 | 第30页 |
| ·表达载体转化进农杆菌 | 第30-31页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第30页 |
| ·冻熔法转化根癌农杆菌 | 第30-31页 |
| ·拟南芥的培养(栽培) | 第31页 |
| ·拟南芥的转化 | 第31-32页 |
| ·农杆菌的扩大培养 | 第31-32页 |
| ·浸花法转化拟南芥 | 第32页 |
| ·转化子的筛选 | 第32-33页 |
| ·筛选培养基浓度梯度筛选 | 第32页 |
| ·转化子筛选培养基的配置 | 第32页 |
| ·种子灭菌及转化子的筛选 | 第32-33页 |
| ·GUS活性的组织化学检测 | 第33-34页 |
| 5 技术路线 | 第34-35页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第35-46页 |
| 1 拟南芥cDNA的制备 | 第35-36页 |
| 2 目的序列克隆与结果检测 | 第36-41页 |
| ·菌落PCR与质粒酶切检测结果 | 第36-37页 |
| ·序列分析 | 第37页 |
| ·蛋白质序列比对 | 第37-38页 |
| ·保守结构域分析 | 第38-39页 |
| ·AtTPS03基因的蛋白质二级结构预测图 | 第39-40页 |
| ·信号肽分析: | 第40页 |
| ·蛋白的跨膜结构域分析 | 第40-41页 |
| ·等电点和分子量的分析 | 第41页 |
| 3 表达载体转化进大肠杆菌 | 第41-42页 |
| ·表达载体转化进大肠杆菌后的质粒酶切结果 | 第42页 |
| 4 表达载体转化进农杆菌 | 第42-43页 |
| 5 GUS染色检测 | 第43-44页 |
| 6 拟南芥转化与抗性筛选结果 | 第44-46页 |
| ·拟南芥潮霉素内源抗性的筛选 | 第44-45页 |
| ·拟南芥浸花法转化 | 第45-46页 |
| 第四章 讨论 | 第46-48页 |
| 1.拟南芥RNA的提取 | 第46页 |
| 2.拟南芥的处理 | 第46页 |
| 3.组成型表达载体的构建 | 第46页 |
| 4.浸花法转化拟南芥的可能机制 | 第46-47页 |
| 5.转基因抗性苗的筛选 | 第47页 |
| 6.结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 缩略语表 | 第52-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 作者简介 | 第55页 |