摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
目录 | 第7-10页 |
图表目录 | 第10-12页 |
符号与缩略语说明 | 第12-13页 |
1 绪论 | 第13-30页 |
·胶原蛋白概述 | 第13-21页 |
·胶原蛋白定义 | 第13-14页 |
·胶原蛋白种类 | 第14-17页 |
·胶原蛋白结构和性质 | 第17-19页 |
·胶原蛋白的生物合成和分解 | 第19-20页 |
·胶原蛋白功能及应用 | 第20页 |
·胶原蛋白的生产 | 第20-21页 |
·重组(类)人胶原蛋白国内外研究现状 | 第21-28页 |
·类人胶原蛋白研究及其特点 | 第21-22页 |
·类人胶原蛋白表达系统构建的研究现状 | 第22-25页 |
·毕赤酵母诱导表达条件优化的研究现状 | 第25-27页 |
·类人胶原蛋白分析方法的国内外研究情况 | 第27-28页 |
·类人胶原蛋白分离纯化的国内外研究情况 | 第28页 |
·本论文研究内容 | 第28-30页 |
2 材料与试剂 | 第30-33页 |
·菌株 | 第30页 |
·药品及试剂 | 第30-32页 |
·主要药品 | 第30页 |
·常用溶液配方 | 第30-31页 |
·培养基配方 | 第31-32页 |
·仪器设备 | 第32-33页 |
3 实验方法 | 第33-37页 |
·菌体生长培养方法 | 第33页 |
·发酵上清液的前处理方法 | 第33页 |
·三氯乙酸(TCA)沉淀蛋白 | 第33页 |
·硫酸铵沉淀蛋白 | 第33页 |
·旋转真空干燥浓缩蛋白 | 第33页 |
·SDS-PAGE电泳法测定类人胶原蛋白含量 | 第33-35页 |
·电泳的前准备 | 第33-35页 |
·上样 | 第35页 |
·电泳 | 第35页 |
·电泳的后处理 | 第35页 |
·羟脯氨酸法测定类人胶原蛋白含量 | 第35-37页 |
·羟脯氨酸法基本操作步骤 | 第35-36页 |
·羟脯氨酸标准曲线的测定 | 第36页 |
·样品羟脯氨酸含量测定 | 第36页 |
·样品中类人胶原蛋白含量的计算 | 第36-37页 |
4 类人胶原蛋白发酵诱导条件的优化 | 第37-66页 |
·单因素摇瓶发酵实验 | 第37-55页 |
·温度对毕赤酵母表达类人胶原蛋白的影响 | 第37-39页 |
·诱导初始pH对毕赤酵母表达类人胶原蛋白的影响 | 第39-42页 |
·甲醇添加量对毕赤酵母表达类人胶原蛋白的影响 | 第42-45页 |
·最佳初始诱导生长期的选择 | 第45-48页 |
·摇瓶转速对毕赤酵母表达类人胶原蛋白的影响 | 第48-51页 |
·诱导取样时间点的选择 | 第51-53页 |
·诱导初始菌浓对毕赤酵母表达类人胶原蛋白的影响 | 第53-55页 |
·多因素摇瓶发酵正交实验 | 第55-61页 |
·羟脯氨酸法推测类人胶原蛋白含量的初探及与SDS-PAGE法的比较 | 第61-65页 |
·正交试验最优条件的验证 | 第65-66页 |
5 结果与讨论 | 第66-67页 |
6 展望 | 第67-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-78页 |
附录 硫酸铵盐析表 | 第78-79页 |