猪肺炎支原体膜蛋白免疫亲和层析及ELISA检测方法的建立
| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1.前言 | 第8-18页 |
| ·猪肺炎支原体及其危害性概述 | 第8-9页 |
| ·猪肺炎支原体的致病机理 | 第9-11页 |
| ·猪肺炎支原体荚膜致病性的研究 | 第9-10页 |
| ·猪肺炎支原体细胞膜致病性的研究 | 第10-11页 |
| ·猪肺炎支原体抗原蛋白的研究 | 第11-13页 |
| ·猪肺炎支原体诊断方法的研究进展 | 第13-17页 |
| ·临床与病理组织学诊断 | 第13-14页 |
| ·病原学诊断检测 | 第14页 |
| ·血清学检测 | 第14-16页 |
| ·分子生物学诊断检测 | 第16-17页 |
| ·本研究的目的意义 | 第17-18页 |
| 2.试验材料 | 第18-22页 |
| ·试验菌株、动物及血清 | 第18页 |
| ·SDS-PAGE相关溶液 | 第18页 |
| ·ELISA相关溶液 | 第18-19页 |
| ·亲和层析相关溶液 | 第19页 |
| ·猪肺炎支原体培养基的制备 | 第19-20页 |
| ·主要仪器设备 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20-22页 |
| 3.试验方法 | 第22-27页 |
| ·菌株培养及膜蛋白提取 | 第22页 |
| ·猪肺炎支原体的培养 | 第22页 |
| ·猪肺炎支原体膜蛋白的粗提取 | 第22页 |
| ·猪肺炎支原体免疫血清的制备 | 第22页 |
| ·猪肺炎支原体免疫血清的纯化 | 第22-23页 |
| ·免疫血清IgG的辛酸-硫酸铵盐析粗提 | 第22-23页 |
| ·应用High-Q阴离子交换层析对免疫血清的纯化 | 第23页 |
| ·膜蛋白的免疫亲和纯化 | 第23-24页 |
| ·免疫亲和柱的制备 | 第23页 |
| ·免疫亲和纯化膜蛋白 | 第23-24页 |
| ·猪肺炎支原体抗体检测ELISA方法的研究 | 第24-27页 |
| ·用纯化蛋白作为包被抗原的ELISA方法 | 第24页 |
| ·ELISA试验条件的确定 | 第24-25页 |
| ·ELISA阴阳界限的确定 | 第25页 |
| ·ELISA的交叉反应试验 | 第25页 |
| ·纯化抗原与粗提抗原ELISA检测的比较 | 第25页 |
| ·ELISA方法敏感性和特异性的检测 | 第25-26页 |
| ·ELISA方法的重复性试验 | 第26页 |
| ·ELISA方法的临床检测 | 第26-27页 |
| 4.试验结果 | 第27-35页 |
| ·免疫血清的纯化及鉴定 | 第27页 |
| ·膜蛋白的免疫亲和纯化 | 第27-28页 |
| ·亲和层析柱的制备 | 第27页 |
| ·膜蛋白的纯化 | 第27-28页 |
| ·ELISA检测方法的研究 | 第28-35页 |
| ·抗原蛋白最佳包被浓度和血清稀释倍数的确定 | 第28-30页 |
| ·封闭液和封闭时间的确定 | 第30-31页 |
| ·抗体作用时间的确定 | 第31页 |
| ·酶标SPA作用时间的确定 | 第31-32页 |
| ·ELISA阴阳界限的确定 | 第32页 |
| ·ELISA的交叉反应试验 | 第32页 |
| ·纯化抗原与粗提抗原ELISA检测的比较 | 第32-33页 |
| ·间接ELISA方法与IHA的比较 | 第33页 |
| ·间接ELISA的重复性试验 | 第33-34页 |
| ·间接ELISA的临床检测 | 第34-35页 |
| 5.分析讨论 | 第35-40页 |
| ·免疫血清IgG的纯化 | 第35-36页 |
| ·猪肺炎支原体膜蛋白的提取 | 第36页 |
| ·膜蛋白的免疫亲和层析 | 第36-38页 |
| ·间接ELISA试验方法研究 | 第38-39页 |
| ·临床检测 | 第39-40页 |
| 6.结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-46页 |
| 致谢 | 第46页 |
