| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 第一章 绪论(Introduction) | 第8-31页 |
| ·蛋白磷酸酶 | 第8-12页 |
| ·蛋白磷酸酶概况 | 第8-9页 |
| ·蛋白磷酸酶的分类 | 第9-10页 |
| ·蛋白酪氨酸磷酸酶概况 | 第10-11页 |
| ·丝氨酸/苏氨酸磷酸酶概况 | 第11-12页 |
| ·细胞周期检验点 | 第12-27页 |
| ·细胞周期检验点概述 | 第12-20页 |
| ·几个重要的细胞周期检验点 | 第20-27页 |
| ·PPM1G/PP2Cγ概况 | 第27-31页 |
| 第二章 材料、仪器与方法 | 第31-47页 |
| ·材料 | 第31-33页 |
| ·实验材料 | 第31页 |
| ·相关试剂、耗材 | 第31-33页 |
| ·主要仪器 | 第33-34页 |
| ·常用溶液的配置 | 第34-37页 |
| ·细胞培养用培养基的配置 | 第34页 |
| ·一般溶液的配置 | 第34-36页 |
| ·IP实验试剂的配置 | 第36页 |
| ·IF实验试剂的配置 | 第36-37页 |
| ·实验方法 | 第37-47页 |
| ·贴壁细胞培养方法 | 第37页 |
| ·贴壁细胞总蛋白质的提取 | 第37-38页 |
| ·免疫沉淀(IP)或免疫共沉淀实验(Co-IP) | 第38页 |
| ·蛋白质印迹实验 | 第38-39页 |
| ·体外磷酸酶实验 | 第39-40页 |
| ·RNA干扰抑制蛋白表达实验 | 第40-41页 |
| ·细胞流式分析前的收集与固定 | 第41页 |
| ·流式分析细胞处于有丝分裂期比例的样品制备 | 第41-43页 |
| ·免疫荧光(IF)实验 | 第43-44页 |
| ·质粒转染实验 | 第44-45页 |
| ·细胞总RNA的提取方法 | 第45页 |
| ·反转录PCR | 第45-46页 |
| ·Real-timePCR | 第46-47页 |
| 第三章 结果与分析 | 第47-65页 |
| ·PPM1G在DNA损伤检验点中的作用 | 第47-55页 |
| ·针对PPM1G抗体的纯化及检测 | 第47-48页 |
| ·PPM1G在HeLa细胞中的定位 | 第48页 |
| ·RNAi方法在HeLa细胞中抑制PPM1G基因的表达 | 第48-50页 |
| ·PPM1G对γH2AX水平的调节 | 第50-52页 |
| ·抑制PPM1G导致DNA损伤检验点的缺陷 | 第52-54页 |
| ·DNA损伤后PPM1G、γH2AX在细胞中的定位 | 第54-55页 |
| ·PPM1G在纺锤体组装检验点中的作用 | 第55-65页 |
| ·免疫荧光检测PPM1G表达的抑制对细胞纺锤体的影响 | 第55-56页 |
| ·流式方法检测PPM1G表达的抑制对纺锤体检验点激活的影响 | 第56-61页 |
| ·PPM1G通过转录水平调节纺锤体检验点关键基因X的表达 | 第61-65页 |
| 第四章 讨论 | 第65-67页 |
| 第五章 结论 | 第67-68页 |
| 附录 | 第68-76页 |
