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酵母Pub1-RRM2和RPA14的克隆、表达、纯化及初步晶体学分析

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
第一篇 PUB1-RRM2 的克隆、表达、纯化及初步晶体学分析第12-58页
 第一章 绪论第12-28页
   ·mRAN 的稳定性第12-14页
   ·RRM 结构与功能的研究进展第14-21页
   ·Pub1 的研究进展第21-25页
   ·Pub1 的第二个 RRM 的功能第25-28页
 第二章 实验材料与方法第28-37页
   ·基因克隆和载体的构建第28-31页
     ·引物设计第28-29页
     ·PCR 扩增第29页
     ·PCR 产物及载体的酶切、回收和连接第29-30页
     ·连接产物的转化第30页
     ·质粒抽提和连接产物的鉴定第30-31页
   ·RRM2 蛋白的表达与纯化第31-34页
     ·实验仪器第31页
     ·实验试剂第31-33页
     ·实验方法第33-34页
   ·蛋白质序列测定第34-35页
   ·RRM2 的晶体生长和优化第35-36页
     ·实验仪器和晶体生长条件第35-36页
     ·实验方法第36页
   ·RRM2 晶体衍射数据的收集、处理和初步晶体学分析第36-37页
 第三章 实验结果与讨论第37-45页
   ·RRM2 基因克隆和载体的构建第37-38页
   ·RRM2 蛋白的表达与纯化第38-41页
     ·蛋白质的预表达第38-39页
     ·蛋白质的纯化第39-41页
   ·蛋白序列测定第41页
   ·RRM2 的晶体生长和优化第41-43页
   ·RRM2 晶体衍射数据的收集、处理及结构解析第43-45页
     ·RRM2 晶体X-Ray 衍射实验第43-44页
     ·RRM2 衍射数据的处理和分析第44页
     ·RRM2 的结构解析第44-45页
 小结第45-46页
 参考文献第46-58页
第二篇 酵母 RPA14 蛋白的克隆、表达、纯化及结构探索第58-77页
 第一章 综述第58-64页
   ·RNA聚合酶第58-60页
   ·RPA14 蛋白第60-64页
 第二章 实验材料与方法第64-68页
   ·基因克隆和载体的构建第64-65页
     ·引物设计第64页
     ·PCR 扩增第64页
     ·PCR 产物及载体的酶切、回收、连接和转化第64页
     ·质粒抽提及连接产物的鉴定第64-65页
   ·RPA14 蛋白的表达与纯化第65-67页
     ·实验仪器第65页
     ·实验试剂第65-66页
     ·实验方法第66-67页
   ·晶体生长第67-68页
 第三章 实验结果与讨论第68-73页
   ·RPA14 基因克隆和载体的构建第68-69页
   ·RPA14 蛋白的表达与纯化第69-71页
     ·蛋白质的预表达第69页
     ·蛋白质的纯化第69-71页
   ·RPA14 晶体生长第71-73页
 小结第73-74页
 参考文献第74-77页
其它工作第77-84页
 一、背景介绍第77-79页
 二、实验进展第79-83页
 三、参考文献第83-84页
附录第84-87页
攻读学位期间发表的学术论文与取得的其他研究成果第87-88页
致谢第88页

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