摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-12页 |
第一篇 PUB1-RRM2 的克隆、表达、纯化及初步晶体学分析 | 第12-58页 |
第一章 绪论 | 第12-28页 |
·mRAN 的稳定性 | 第12-14页 |
·RRM 结构与功能的研究进展 | 第14-21页 |
·Pub1 的研究进展 | 第21-25页 |
·Pub1 的第二个 RRM 的功能 | 第25-28页 |
第二章 实验材料与方法 | 第28-37页 |
·基因克隆和载体的构建 | 第28-31页 |
·引物设计 | 第28-29页 |
·PCR 扩增 | 第29页 |
·PCR 产物及载体的酶切、回收和连接 | 第29-30页 |
·连接产物的转化 | 第30页 |
·质粒抽提和连接产物的鉴定 | 第30-31页 |
·RRM2 蛋白的表达与纯化 | 第31-34页 |
·实验仪器 | 第31页 |
·实验试剂 | 第31-33页 |
·实验方法 | 第33-34页 |
·蛋白质序列测定 | 第34-35页 |
·RRM2 的晶体生长和优化 | 第35-36页 |
·实验仪器和晶体生长条件 | 第35-36页 |
·实验方法 | 第36页 |
·RRM2 晶体衍射数据的收集、处理和初步晶体学分析 | 第36-37页 |
第三章 实验结果与讨论 | 第37-45页 |
·RRM2 基因克隆和载体的构建 | 第37-38页 |
·RRM2 蛋白的表达与纯化 | 第38-41页 |
·蛋白质的预表达 | 第38-39页 |
·蛋白质的纯化 | 第39-41页 |
·蛋白序列测定 | 第41页 |
·RRM2 的晶体生长和优化 | 第41-43页 |
·RRM2 晶体衍射数据的收集、处理及结构解析 | 第43-45页 |
·RRM2 晶体X-Ray 衍射实验 | 第43-44页 |
·RRM2 衍射数据的处理和分析 | 第44页 |
·RRM2 的结构解析 | 第44-45页 |
小结 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-58页 |
第二篇 酵母 RPA14 蛋白的克隆、表达、纯化及结构探索 | 第58-77页 |
第一章 综述 | 第58-64页 |
·RNA聚合酶 | 第58-60页 |
·RPA14 蛋白 | 第60-64页 |
第二章 实验材料与方法 | 第64-68页 |
·基因克隆和载体的构建 | 第64-65页 |
·引物设计 | 第64页 |
·PCR 扩增 | 第64页 |
·PCR 产物及载体的酶切、回收、连接和转化 | 第64页 |
·质粒抽提及连接产物的鉴定 | 第64-65页 |
·RPA14 蛋白的表达与纯化 | 第65-67页 |
·实验仪器 | 第65页 |
·实验试剂 | 第65-66页 |
·实验方法 | 第66-67页 |
·晶体生长 | 第67-68页 |
第三章 实验结果与讨论 | 第68-73页 |
·RPA14 基因克隆和载体的构建 | 第68-69页 |
·RPA14 蛋白的表达与纯化 | 第69-71页 |
·蛋白质的预表达 | 第69页 |
·蛋白质的纯化 | 第69-71页 |
·RPA14 晶体生长 | 第71-73页 |
小结 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-77页 |
其它工作 | 第77-84页 |
一、背景介绍 | 第77-79页 |
二、实验进展 | 第79-83页 |
三、参考文献 | 第83-84页 |
附录 | 第84-87页 |
攻读学位期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第87-88页 |
致谢 | 第88页 |