摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-22页 |
1 烟草青枯病研究进展 | 第13-17页 |
·青枯病是茄科作物生产上的毁灭性病害 | 第13页 |
·烟草青枯病的防治是生产上的重点与难点 | 第13-14页 |
·烟草青枯病的症状与致病机理 | 第14-15页 |
·青枯病生物防治的研究进展 | 第15-17页 |
2 抗菌肽的研究进展 | 第17-21页 |
·抗菌肽的来源 | 第17-18页 |
·抗菌肽的结构特征与分类 | 第18-19页 |
·抗菌肽的作用机理 | 第19-20页 |
·抗菌肽在农业上的应用 | 第20-21页 |
3 本课题的研究意义与研究内容 | 第21-22页 |
·课题来源 | 第21页 |
·研究目的与意义 | 第21页 |
·研究内容 | 第21-22页 |
第二章 青枯菌拮抗菌2-Q-9分类地位的分子鉴定 | 第22-31页 |
1 前言 | 第22页 |
2 材料与方法 | 第22-26页 |
·材料 | 第22-23页 |
·菌株和载体 | 第22页 |
·培养基和试剂 | 第22-23页 |
·方法 | 第23-26页 |
·发酵培养 | 第23页 |
·基因组DNA的提取 | 第23-24页 |
·PCR扩增16S rDNA片段 | 第24页 |
·回收PCR产物 | 第24-25页 |
·连接至T载体 | 第25页 |
·大肠杆菌DH5α电转感受态细胞的制备 | 第25页 |
·电击转化与检测 | 第25-26页 |
·序列的测定 | 第26页 |
·系统发育树的构建 | 第26页 |
3 结果与分析 | 第26-30页 |
·拮抗菌2-Q-9的基因组DNA | 第26-27页 |
·16S rDNA的PCR扩增 | 第27页 |
·筛选阳性转化子 | 第27-28页 |
·16S rDNA序列 | 第28-29页 |
·基于16S rDNA序列的系统发育树 | 第29-30页 |
4 讨论 | 第30页 |
5 结论 | 第30-31页 |
第三章 青枯菌拮抗菌2-Q-9外泌抑菌物质性质的研究 | 第31-39页 |
1 前言 | 第31页 |
2 材料和方法 | 第31-33页 |
·材料 | 第31-32页 |
·方法 | 第32-33页 |
·获得无菌悬浮液 | 第32页 |
·2-Q-9抑菌物质产生时期及其抑菌谱的测定 | 第32页 |
·抑菌物质对高温的耐受性 | 第32页 |
·抑菌物质在不同酸碱条件下的稳定性 | 第32页 |
·比较两种不同沉淀方法提取抑菌物质的效果 | 第32-33页 |
·抑菌物质对蛋白酶的敏感性 | 第33页 |
3 结果与分析 | 第33-37页 |
·无菌发酵液的获得 | 第33-34页 |
·拮抗菌2-Q-9抑菌物质合成及分泌至胞外时期 | 第34页 |
·2-Q-9菌株外泌抑菌物质的抑菌谱 | 第34页 |
·抑菌物质对高温的耐受性 | 第34-35页 |
·抑菌物质在不同酸碱条件下的稳定性 | 第35-36页 |
·不同沉淀方法提取抑菌物质的效果 | 第36-37页 |
·抑菌物质对胰蛋白酶、蛋白酶K和胃蛋白酶的敏感性 | 第37页 |
4 讨论 | 第37-38页 |
5 结论 | 第38-39页 |
第四章 青枯菌拮抗菌2-Q-9外泌抑菌物质的纯化与初步鉴定 | 第39-47页 |
1 前言 | 第39页 |
2 材料和方法 | 第39-42页 |
·材料 | 第39-40页 |
·菌株和培养基 | 第39-40页 |
·主要试剂 | 第40页 |
·缓冲液 | 第40页 |
·方法 | 第40-42页 |
·抑菌物质粗提液的制备 | 第40页 |
·阴离子交换层析 | 第40页 |
·阳离子交换层析 | 第40-41页 |
·蛋白质浓度测定 | 第41页 |
·Tricine-SDS-PAGE电泳与常规SDS-PAGE电泳检测抑菌物质 | 第41-42页 |
·质谱测序 | 第42页 |
3 结果与分析 | 第42-46页 |
·抑菌物质的分离纯化 | 第42-44页 |
·抑菌物质蛋白浓度 | 第44页 |
·电泳分离抗性蛋白结果 | 第44-45页 |
·质谱测序结果 | 第45-46页 |
4 讨论 | 第46-47页 |
第五章 青枯菌拮抗菌2-Q-9抑菌相关基因的克隆 | 第47-57页 |
1 前言 | 第47-48页 |
2 材料和方法 | 第48-52页 |
·材料 | 第48页 |
·方法 | 第48-52页 |
·基因组DNA完整性及纯度鉴定 | 第49页 |
·构建染色体步移扩增文库 | 第49-50页 |
·克隆抑菌相关基因 | 第50-52页 |
3 结果与分析 | 第52-55页 |
·检验染色体步移扩增文库 | 第52-53页 |
·染色体步移结果 | 第53-54页 |
·拼接抑菌相关基因全长序列 | 第54-55页 |
4 讨论 | 第55-56页 |
5 结论 | 第56-57页 |
第六章 全文结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-64页 |
附录 | 第64-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
个人简介 | 第67页 |