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烟草青枯病拮抗菌2-Q-9外泌抑菌物质的研究及其编码基因的克隆

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-13页
第一章 文献综述第13-22页
 1 烟草青枯病研究进展第13-17页
   ·青枯病是茄科作物生产上的毁灭性病害第13页
   ·烟草青枯病的防治是生产上的重点与难点第13-14页
   ·烟草青枯病的症状与致病机理第14-15页
   ·青枯病生物防治的研究进展第15-17页
 2 抗菌肽的研究进展第17-21页
   ·抗菌肽的来源第17-18页
   ·抗菌肽的结构特征与分类第18-19页
   ·抗菌肽的作用机理第19-20页
   ·抗菌肽在农业上的应用第20-21页
 3 本课题的研究意义与研究内容第21-22页
   ·课题来源第21页
   ·研究目的与意义第21页
   ·研究内容第21-22页
第二章 青枯菌拮抗菌2-Q-9分类地位的分子鉴定第22-31页
 1 前言第22页
 2 材料与方法第22-26页
   ·材料第22-23页
     ·菌株和载体第22页
     ·培养基和试剂第22-23页
   ·方法第23-26页
     ·发酵培养第23页
     ·基因组DNA的提取第23-24页
     ·PCR扩增16S rDNA片段第24页
     ·回收PCR产物第24-25页
     ·连接至T载体第25页
     ·大肠杆菌DH5α电转感受态细胞的制备第25页
     ·电击转化与检测第25-26页
     ·序列的测定第26页
     ·系统发育树的构建第26页
 3 结果与分析第26-30页
   ·拮抗菌2-Q-9的基因组DNA第26-27页
   ·16S rDNA的PCR扩增第27页
   ·筛选阳性转化子第27-28页
   ·16S rDNA序列第28-29页
   ·基于16S rDNA序列的系统发育树第29-30页
 4 讨论第30页
 5 结论第30-31页
第三章 青枯菌拮抗菌2-Q-9外泌抑菌物质性质的研究第31-39页
 1 前言第31页
 2 材料和方法第31-33页
   ·材料第31-32页
   ·方法第32-33页
     ·获得无菌悬浮液第32页
     ·2-Q-9抑菌物质产生时期及其抑菌谱的测定第32页
     ·抑菌物质对高温的耐受性第32页
     ·抑菌物质在不同酸碱条件下的稳定性第32页
     ·比较两种不同沉淀方法提取抑菌物质的效果第32-33页
     ·抑菌物质对蛋白酶的敏感性第33页
 3 结果与分析第33-37页
   ·无菌发酵液的获得第33-34页
   ·拮抗菌2-Q-9抑菌物质合成及分泌至胞外时期第34页
   ·2-Q-9菌株外泌抑菌物质的抑菌谱第34页
   ·抑菌物质对高温的耐受性第34-35页
   ·抑菌物质在不同酸碱条件下的稳定性第35-36页
   ·不同沉淀方法提取抑菌物质的效果第36-37页
   ·抑菌物质对胰蛋白酶、蛋白酶K和胃蛋白酶的敏感性第37页
 4 讨论第37-38页
 5 结论第38-39页
第四章 青枯菌拮抗菌2-Q-9外泌抑菌物质的纯化与初步鉴定第39-47页
 1 前言第39页
 2 材料和方法第39-42页
   ·材料第39-40页
     ·菌株和培养基第39-40页
     ·主要试剂第40页
     ·缓冲液第40页
   ·方法第40-42页
     ·抑菌物质粗提液的制备第40页
     ·阴离子交换层析第40页
     ·阳离子交换层析第40-41页
     ·蛋白质浓度测定第41页
     ·Tricine-SDS-PAGE电泳与常规SDS-PAGE电泳检测抑菌物质第41-42页
     ·质谱测序第42页
 3 结果与分析第42-46页
   ·抑菌物质的分离纯化第42-44页
   ·抑菌物质蛋白浓度第44页
   ·电泳分离抗性蛋白结果第44-45页
   ·质谱测序结果第45-46页
 4 讨论第46-47页
第五章 青枯菌拮抗菌2-Q-9抑菌相关基因的克隆第47-57页
 1 前言第47-48页
 2 材料和方法第48-52页
   ·材料第48页
   ·方法第48-52页
     ·基因组DNA完整性及纯度鉴定第49页
     ·构建染色体步移扩增文库第49-50页
     ·克隆抑菌相关基因第50-52页
 3 结果与分析第52-55页
   ·检验染色体步移扩增文库第52-53页
   ·染色体步移结果第53-54页
   ·拼接抑菌相关基因全长序列第54-55页
 4 讨论第55-56页
 5 结论第56-57页
第六章 全文结论第57-58页
参考文献第58-64页
附录第64-66页
致谢第66-67页
个人简介第67页

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