| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 一、文献综述 | 第11-27页 |
| 1.垫状卷柏简介 | 第11页 |
| 2.干旱与抗旱 | 第11-13页 |
| ·干旱对植物的影响 | 第11页 |
| ·植物抗旱的生理、生化机制 | 第11-13页 |
| 3.海藻糖研究概况 | 第13-20页 |
| ·海藻糖的理化性质 | 第13页 |
| ·海藻糖对生物的保护作用 | 第13-15页 |
| ·海藻糖的抗逆分子机理 | 第15-16页 |
| ·海藻糖的生物合成途径 | 第16-18页 |
| ·海藻糖分子生物学研究进展 | 第18-20页 |
| 4.获取基因全长cDNA的方法及其进展 | 第20-26页 |
| ·cDNA文库筛选法 | 第20-21页 |
| ·cDNA末端快速扩增法 | 第21-22页 |
| ·电子克隆 | 第22-23页 |
| ·获取全长cDNA的其他方法 | 第23-26页 |
| 5.本研究的方法和目的 | 第26-27页 |
| 二、材料与方法 | 第27-45页 |
| 1.垫状卷柏海藻糖-6-磷酸合成酶基因(SpTPS1)的克隆 | 第27-38页 |
| ·垫状卷柏总RNA提取 | 第27-28页 |
| ·SpTPS1基因中间片段克隆 | 第28-32页 |
| ·SpTPS1基因3'端克隆 | 第32-33页 |
| ·SpTPS1基因5'端克隆 | 第33-37页 |
| ·SpTPS1基因开放阅读框ORF克隆 | 第37-38页 |
| 2.垫状卷柏海藻糖-6-磷酸合成酶基因(SpTPS1)生物信息学分析 | 第38页 |
| 3.垫状卷柏海藻糖-6-磷酸合成酶基因(SpTPS1)的功能分析 | 第38-45页 |
| ·亚克隆载体OpUC119的构建 | 第38-39页 |
| ·真核表达载体OpRS6的构建 | 第39-41页 |
| ·酵母功能互补试验 | 第41-45页 |
| 三、结果与分析 | 第45-67页 |
| 1.垫状卷柏海藻糖-6-磷酸合成酶基因(SpTPS1)的克隆 | 第45-49页 |
| ·垫状卷柏RNA纯度与完整性检测 | 第45页 |
| ·SpTPS1基因中间片段克隆和分析 | 第45-46页 |
| ·SpTPS1基因3'端克隆和分析 | 第46-47页 |
| ·SpTPS1基因5'端克隆和分析 | 第47-48页 |
| ·SpTPS1基因开放阅读框ORF克隆和分析 | 第48-49页 |
| 2.垫状卷柏海藻糖-6-磷酸合成酶基因(SpTPS1)生物信息学分析 | 第49-62页 |
| ·SpTPS1基因推测的氨基酸序列及其分析 | 第49-54页 |
| ·垫状卷柏海藻糖-6-磷酸合成酶蛋白质的性质预测 | 第54-58页 |
| ·垫状卷柏海藻糖-6-磷酸合成酶结构预测 | 第58-61页 |
| ·垫状卷柏海藻糖-6-磷酸合成酶的进化关系 | 第61-62页 |
| 3.垫状卷柏海藻糖-6-磷酸合成酶基因(SpTPS1)的功能分析 | 第62-67页 |
| ·亚克隆载体OpUC119 | 第62页 |
| ·真核表达载体OpRS6 | 第62-63页 |
| ·酵母功能互补试验结果和分析 | 第63-67页 |
| 四、讨论 | 第67-70页 |
| 1.SpTPS1基因推导的氨基酸序列保守性与功能的关系 | 第67页 |
| 2.酵母互补试验对SpTPS1基因功能的验证 | 第67-68页 |
| 3.TPS/TPP融合蛋白 | 第68页 |
| 4.本试验后续试验的研究方向 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 附录 | 第76-78页 |
