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重组人CYP2C9,CYP2C19及其相关SNP酵母表达体系的构建和其在药物抑制筛选中的初步研究

中文摘要第1-5页
Abstract第5-11页
前言第11-14页
第一章 文献综述第14-34页
   ·细胞色素P450及其与药物代谢关系的研究进展第14-23页
     ·CYP的命名与分布第14页
     ·CYP酶的氧化活性单体第14-15页
     ·CYP酶系反应机制第15-17页
     ·CYP酶的多样性第17-19页
     ·CYP酶在药物代谢中的作用第19页
     ·CYP酶与药物相互作用的关系第19-21页
     ·与CYP有关的药物代谢研究方法进展第21-22页
     ·研究药物对CYP作用关系的意义第22-23页
   ·2C9基因多态性研究进展第23-28页
     ·CYP2C9基因多态性的分子机制第23-26页
     ·CYP2C9基因多态性检测第26-27页
     ·影响CYP2C9活性的因素第27页
     ·CYP2C9基因多态性与药物代谢的关系第27-28页
     ·展望第28页
     ·C19基因多态性研究进展第28-33页
     ·CYP2C19基因多态性的分子机制第28-30页
     ·CYP2C19基因多态性检测第30-31页
     ·影响CYP2C19活性的因素第31-32页
     ·CYP2C19基因多态性与药物代谢的关系第32页
     ·展望第32-33页
     ·论文研究目的与立题意义第33-34页
第二章 CYP2C9,CYP2C19及其相关SNP在酿酒酵母中的表达、鉴定第34-49页
   ·材料第34-37页
     ·菌株和质粒第34-35页
     ·试剂第35页
     ·主要溶液和培养基第35-36页
     ·主要仪器第36-37页
   ·方法第37-42页
     ·pYES2/CT-CYP2C9,CYP2C19重组表达载体的构建第37-39页
     ·重组酵母菌株的构建第39页
     ·目的蛋白的表达和鉴定第39-41页
     ·酵母微粒体的制备和检测第41-42页
   ·结果第42-46页
     ·pYES2/CT-CYP2C9,CYP2C19重组表达载体的构建第42-44页
     ·目的蛋白的Western Blot分析第44页
     ·CYP2C9,CYP2C19微粒体的检测第44-46页
   ·讨论第46-49页
       ·表达体系的选择第46-48页
       ·表达量的分析第48-49页
第三章 体系进一步验证及酶的活性分析第49-54页
     ·材料第49页
     ·酵母微粒体第49页
     ·主要试剂第49页
     ·主要溶液第49页
     ·主要仪器第49页
   ·方法第49-50页
     ·HPLC法体系验证第49-50页
     ·酶活性分析第50页
     ·酶稳定性分析第50页
   ·结果第50-52页
     ·HPLC法体系验证第50-51页
     ·酶活性分析第51页
     ·酶稳定性分析第51-52页
   ·讨论第52-54页
第四章 重组CYP2C9,CYP2C19相关SNP酶的酶学分析和药物高通量筛选第54-69页
   ·材料第54-55页
     ·酵母微粒体第54页
     ·主要试剂第54页
     ·主要溶液第54-55页
     ·主要仪器第55页
   ·方法第55-58页
     ·酵母微粒体酶活性检测第55页
     ·酶动力学分析第55-56页
     ·特异性抑制剂对野生株微粒体的抑制反应第56页
     ·药物高通量筛选第56-58页
   ·结果第58-63页
     ·酵母微粒体酶活性检测第58-60页
     ·酶动力学分析第60-61页
     ·特异性抑制剂对野生株微粒体的抑制反应第61-62页
     ·药物高通量筛选第62-63页
   ·讨论第63-69页
     ·酵母微粒体酶活性检测第63-65页
     ·酶动力学分析第65-66页
     ·药物高通量筛选第66-69页
全文小结第69-71页
参考文献第71-76页
攻读硕士学位期间取得的科研成果第76-77页
致谢第77页

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