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吸水链霉菌10-22中硫肽类抗生素cyclothiazomycin生物合成机制的研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-11页
符号说明第11-14页
第一章 前言第14-42页
   ·Micrococcins第15-16页
   ·Thiocillins第16-22页
   ·Thiostrepton (硫连丝菌素,TSR)第22-31页
   ·Cyclothiazomycin(CLT,环噻唑霉素)第31-33页
   ·其他类型的多肽类抗生素合成基因簇研究进展第33-40页
   ·吸水链霉菌应城变种(S. hygroscopicus var. Yingchengensis)10-22研究历史第40-42页
第二章 实验材料和方法第42-58页
   ·实验材料第42-47页
     ·菌株第42-43页
     ·质粒第43-45页
     ·培养基和化学试剂第45-47页
   ·实验方法第47-58页
     ·链霉菌培养及菌种保藏第47-48页
     ·大肠杆菌质粒质粒 DNA 的提取(84)第48页
     ·大肠杆菌和链霉菌质粒 DNA 的少量快速提取及检测(快检)第48页
     ·链霉菌质粒 DNA 的大量提取(84)第48-49页
     ·链霉菌总 DNA 的少量快速提取第49页
     ·DNA 片段的回收(维特洁试剂盒)第49-50页
     ·小量 PCR 产物的纯化(维特洁试剂盒)第50页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第50页
     ·质粒 DNA 对大肠杆菌感受态细胞的转化第50页
     ·高压电穿孔法转化大肠杆菌第50-51页
     ·链霉菌文库的构建(以pHZ1358 为载体)第51-53页
     ·两亲本介导的质粒 DNA 的跨属接合转移及初步验证(适用于吸水链霉菌和其他链霉菌)第53-54页
     ·环噻唑霉素的生物学活性测定(抑菌实验)第54页
     ·环噻唑霉素的快速提取第54页
     ·利用 HPLC-MS 对环噻唑霉素进行检测分析第54-55页
     ·利用 LC-EI-Q-TOF 对环噻唑霉素进行高精度质谱检测分析第55页
     ·生物信息学分析第55-58页
第三章 结果和讨论第58-87页
   ·吸水链霉菌10-22 中环噻唑霉素生物合成基因簇的克隆第58-60页
   ·吸水链霉菌10-22 能产生两种不同构象的CLT第60-66页
   ·14E6 中插入片段的测序以及 ORF 分析第66-69页
   ·用于异源表达的双功能质粒pJTU4891-4894 的构建第69-71页
   ·一个完整环噻唑霉素基因簇的界定第71-73页
   ·CLT 来自于前体肽pro-CLT 的翻译后修饰第73-75页
   ·噻唑啉和噻唑环的形成――选择性脱氢过程第75-79页
   ·CLT 分子中脱水氨基酸的合成过程第79-80页
   ·前导肽LP 的切除和三位取代吡啶的合成可能同时发生第80-81页
   ·叔碳(α位)硫醚键的生物合成成就了 CLT 的桥状大环结构第81-83页
   ·基因簇中其他编码功能蛋白的基因第83-84页
   ·CLT 生物合成途径总结第84-87页
第四章 总结和展望第87-90页
   ·环噻唑霉素生物合成研究的工作总结和创新点第87-88页
   ·进一步研究工作的展望第88-90页
第五章 其他课题研究工作总结第90-100页
   ·多烯类抗生素合成酶结构域的进化差异分析第90-97页
   ·基于结构域同源性比较的新产素链霉菌的筛选第97-99页
   ·电压依赖型离子通道基因的克隆和转录分析第99-100页
参考文献第100-107页
攻读博士学位期间发表及投稿中的研究论文目录第107-108页
致谢第108-111页

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