摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-11页 |
符号说明 | 第11-14页 |
第一章 前言 | 第14-42页 |
·Micrococcins | 第15-16页 |
·Thiocillins | 第16-22页 |
·Thiostrepton (硫连丝菌素,TSR) | 第22-31页 |
·Cyclothiazomycin(CLT,环噻唑霉素) | 第31-33页 |
·其他类型的多肽类抗生素合成基因簇研究进展 | 第33-40页 |
·吸水链霉菌应城变种(S. hygroscopicus var. Yingchengensis)10-22研究历史 | 第40-42页 |
第二章 实验材料和方法 | 第42-58页 |
·实验材料 | 第42-47页 |
·菌株 | 第42-43页 |
·质粒 | 第43-45页 |
·培养基和化学试剂 | 第45-47页 |
·实验方法 | 第47-58页 |
·链霉菌培养及菌种保藏 | 第47-48页 |
·大肠杆菌质粒质粒 DNA 的提取(84) | 第48页 |
·大肠杆菌和链霉菌质粒 DNA 的少量快速提取及检测(快检) | 第48页 |
·链霉菌质粒 DNA 的大量提取(84) | 第48-49页 |
·链霉菌总 DNA 的少量快速提取 | 第49页 |
·DNA 片段的回收(维特洁试剂盒) | 第49-50页 |
·小量 PCR 产物的纯化(维特洁试剂盒) | 第50页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第50页 |
·质粒 DNA 对大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第50页 |
·高压电穿孔法转化大肠杆菌 | 第50-51页 |
·链霉菌文库的构建(以pHZ1358 为载体) | 第51-53页 |
·两亲本介导的质粒 DNA 的跨属接合转移及初步验证(适用于吸水链霉菌和其他链霉菌) | 第53-54页 |
·环噻唑霉素的生物学活性测定(抑菌实验) | 第54页 |
·环噻唑霉素的快速提取 | 第54页 |
·利用 HPLC-MS 对环噻唑霉素进行检测分析 | 第54-55页 |
·利用 LC-EI-Q-TOF 对环噻唑霉素进行高精度质谱检测分析 | 第55页 |
·生物信息学分析 | 第55-58页 |
第三章 结果和讨论 | 第58-87页 |
·吸水链霉菌10-22 中环噻唑霉素生物合成基因簇的克隆 | 第58-60页 |
·吸水链霉菌10-22 能产生两种不同构象的CLT | 第60-66页 |
·14E6 中插入片段的测序以及 ORF 分析 | 第66-69页 |
·用于异源表达的双功能质粒pJTU4891-4894 的构建 | 第69-71页 |
·一个完整环噻唑霉素基因簇的界定 | 第71-73页 |
·CLT 来自于前体肽pro-CLT 的翻译后修饰 | 第73-75页 |
·噻唑啉和噻唑环的形成――选择性脱氢过程 | 第75-79页 |
·CLT 分子中脱水氨基酸的合成过程 | 第79-80页 |
·前导肽LP 的切除和三位取代吡啶的合成可能同时发生 | 第80-81页 |
·叔碳(α位)硫醚键的生物合成成就了 CLT 的桥状大环结构 | 第81-83页 |
·基因簇中其他编码功能蛋白的基因 | 第83-84页 |
·CLT 生物合成途径总结 | 第84-87页 |
第四章 总结和展望 | 第87-90页 |
·环噻唑霉素生物合成研究的工作总结和创新点 | 第87-88页 |
·进一步研究工作的展望 | 第88-90页 |
第五章 其他课题研究工作总结 | 第90-100页 |
·多烯类抗生素合成酶结构域的进化差异分析 | 第90-97页 |
·基于结构域同源性比较的新产素链霉菌的筛选 | 第97-99页 |
·电压依赖型离子通道基因的克隆和转录分析 | 第99-100页 |
参考文献 | 第100-107页 |
攻读博士学位期间发表及投稿中的研究论文目录 | 第107-108页 |
致谢 | 第108-111页 |