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配体介导的非病毒基因载体的研究

国家基金资助项目第1-6页
摘要第6-8页
Abstract第8-11页
中英文对照表第11-12页
目录第12-17页
第一章 绪论第17-43页
   ·引言第17-18页
   ·阳离子聚合物载体的种类及特性第18-21页
     ·聚赖氨酸类第18页
     ·聚乙烯亚胺第18-20页
     ·聚酰胺-胺型树枝状高分子第20-21页
     ·其它阳离子聚合物载体材料第21页
   ·生物相容性载体材料第21-24页
     ·壳聚糖及其衍生物类第21-22页
     ·天然植物多糖第22-23页
     ·环糊精及其衍生物第23-24页
   ·基因转运机制及影响因素第24-28页
     ·非病毒基因载体介导基因转运的一般过程第24-25页
     ·细胞外环境第25-26页
     ·细胞内吞第26页
     ·溶酶体逃逸机制第26-27页
     ·入核转运第27-28页
   ·阳离子聚合物作为基因载体改进方法第28-35页
     ·电荷屏蔽基团第28-29页
     ·靶向基团第29-31页
     ·细胞穿膜肽第31-32页
     ·溶酶体逃逸第32-34页
     ·核定位信号肽第34-35页
   ·结论第35页
   ·课题的提出第35-36页
 参考文献第36-43页
第二章 薏苡仁多糖偶联低分子量的聚乙烯亚胺作为非病毒基因载体的研究第43-71页
   ·引言第43-44页
     ·材料和仪器第44-47页
     ·材料和试剂第44-46页
     ·细胞与动物第46页
     ·实验仪器第46-47页
   ·实验方法与步骤第47-52页
     ·薏苡仁多糖(CP)的提取和纯化第47-48页
     ·薏苡仁多糖-聚乙烯亚胺聚合物(CP-PEI)的合成第48页
     ·薏苡仁多糖-聚乙烯亚胺聚合物-叶酸(CP-PEI-FA)的合成第48页
     ·核磁共振氢谱检测(~1H NMR)第48页
     ·紫外分光光度计检测(UV)第48-49页
     ·x-射线光电子能谱检测(XPS)第49页
     ·凝胶渗透色谱法(GPC)测定分子量第49页
     ·聚合物降解性实验第49页
     ·琼脂糖凝胶电泳第49页
     ·粒径和表面电荷的测定第49-50页
     ·细胞毒性实验(MTT)第50页
     ·体外细胞转染实验第50-51页
     ·瘤内转染和体内分布实验第51页
     ·数据的统计学处理第51-52页
   ·实验结果与讨论第52-68页
     ·薏苡仁多糖(CP)的提取和纯化第52页
     ·聚合物的合成第52-54页
     ·核磁共振氢谱检测(~1H NMR)第54-55页
     ·紫外吸收光谱检测(UV)第55-56页
     ·x-射线光电子能谱检测(XPS)第56-57页
     ·高效凝胶渗透色谱法(GPC)测聚合物分子量第57-58页
     ·聚合物的降解第58页
     ·琼脂糖凝胶电泳第58-59页
     ·粒径和表面电荷的测定第59-61页
     ·细胞毒性实验(MTT)第61-63页
     ·体外细胞转染第63-66页
     ·瘤内转染和体内分布实验第66-68页
   ·小结第68-69页
 参考文献第69-71页
第三章 靶向配体和细胞穿膜肽介导的双配体阳离子聚合物载体第71-105页
   ·引言第71-73页
   ·材料和仪器第73-76页
     ·材料与试剂第73-75页
     ·细胞与动物第75页
     ·实验仪器第75-76页
   ·实验方法与步骤第76-82页
     ·阳离子聚合物(PC、FA-PC和R8-PC)的合成第76-77页
     ·核磁共振氢谱检测(~1H NMR)第77页
     ·紫外分光光度计检测(UV)第77页
     ·x-射线光电子能谱检测(XPS)第77-78页
     ·复合物的制备第78页
     ·胞毒性实验(MTT)第78页
     ·复合物粒径和表面电荷的测定第78-79页
     ·体外转染实验第79-80页
     ·流式细胞仪检测绿色荧光蛋白表达第80页
     ·细胞内吞实验第80页
     ·内吞抑制实验第80-81页
     ·瘤内转染和体内分布实验第81页
     ·数据的统计学处理第81-82页
   ·结果与讨论第82-101页
     ·聚合物材料的合成第82-85页
     ·核磁共振氢谱检测(~1H NMR)第85-86页
     ·紫外分光光度计检测(UV)第86-87页
     ·x-射线光电子能谱检测(XPS)第87-88页
     ·粒径和表面电荷的测定第88-90页
     ·细胞毒性实验(MTT)第90-91页
     ·体外转染实验第91-97页
     ·细胞内吞实验第97-98页
     ·内吞抑制实验第98-99页
     ·瘤内转染和体内分布实验第99-101页
   ·小结第101-103页
 参考文献第103-105页
第四章 双功能短肽修饰的聚阳离子载体及携带micRNA-34a对肿瘤细胞的抑制作用第105-139页
   ·前言第105-107页
   ·材料与仪器第107-110页
     ·材料和试剂第107-109页
     ·细胞与动物第109页
     ·实验仪器第109-110页
   ·实验方法与步骤第110-117页
     ·阳离子聚合物PC-CC9的合成第110-111页
     ·核磁共振氢谱检测(H~1 NMR)第111页
     ·复合物的制备第111页
     ·琼脂糖凝胶电泳阻滞实验第111页
     ·粒径与表面电荷的测定第111-112页
     ·透射电子显微镜观察实验(TEM)第112页
     ·细胞毒性实验(MTT)第112页
     ·细胞内吞实验第112-113页
     ·体外细胞转染实验第113-114页
     ·PI/RNA染色法检测细胞周期第114页
     ·Annexin-V/FITC检测细胞凋亡第114页
     ·细胞划痕实验第114-115页
     ·荧光定量PCR测定miRNA的表达水平第115页
     ·Western blot检测细胞蛋白表达水平第115-116页
     ·体内分布及抑瘤实验第116页
     ·数据的统计学处理第116-117页
   ·结果与讨论第117-136页
     ·阳离子聚合物PC-CC9的合成第117-118页
     ·核磁共振氢谱检测(~1H NMR)第118-119页
     ·琼脂糖凝胶电泳阻滞实验第119-120页
     ·粒径和表面电荷的测定第120-122页
     ·细胞毒性实验(MTT)第122-123页
     ·细胞内吞实验第123-124页
     ·体外细胞转染实验第124-126页
     ·细胞凋亡和周期的测定第126-130页
     ·细胞划痕实验第130-131页
     ·荧光定量PCR检测miRNA的表达第131-133页
     ·Westen Blot检测蛋白表达水平第133-134页
     ·体内分布和抑瘤实验第134-136页
   ·小结第136-137页
 参考文献第137-139页
全文结论、创新点及未来研究方向第139-141页
攻读博士学位期间主要研究成果及参编书籍第141-142页
致谢第142页

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