国家基金资助项目 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
中英文对照表 | 第11-12页 |
目录 | 第12-17页 |
第一章 绪论 | 第17-43页 |
·引言 | 第17-18页 |
·阳离子聚合物载体的种类及特性 | 第18-21页 |
·聚赖氨酸类 | 第18页 |
·聚乙烯亚胺 | 第18-20页 |
·聚酰胺-胺型树枝状高分子 | 第20-21页 |
·其它阳离子聚合物载体材料 | 第21页 |
·生物相容性载体材料 | 第21-24页 |
·壳聚糖及其衍生物类 | 第21-22页 |
·天然植物多糖 | 第22-23页 |
·环糊精及其衍生物 | 第23-24页 |
·基因转运机制及影响因素 | 第24-28页 |
·非病毒基因载体介导基因转运的一般过程 | 第24-25页 |
·细胞外环境 | 第25-26页 |
·细胞内吞 | 第26页 |
·溶酶体逃逸机制 | 第26-27页 |
·入核转运 | 第27-28页 |
·阳离子聚合物作为基因载体改进方法 | 第28-35页 |
·电荷屏蔽基团 | 第28-29页 |
·靶向基团 | 第29-31页 |
·细胞穿膜肽 | 第31-32页 |
·溶酶体逃逸 | 第32-34页 |
·核定位信号肽 | 第34-35页 |
·结论 | 第35页 |
·课题的提出 | 第35-36页 |
参考文献 | 第36-43页 |
第二章 薏苡仁多糖偶联低分子量的聚乙烯亚胺作为非病毒基因载体的研究 | 第43-71页 |
·引言 | 第43-44页 |
·材料和仪器 | 第44-47页 |
·材料和试剂 | 第44-46页 |
·细胞与动物 | 第46页 |
·实验仪器 | 第46-47页 |
·实验方法与步骤 | 第47-52页 |
·薏苡仁多糖(CP)的提取和纯化 | 第47-48页 |
·薏苡仁多糖-聚乙烯亚胺聚合物(CP-PEI)的合成 | 第48页 |
·薏苡仁多糖-聚乙烯亚胺聚合物-叶酸(CP-PEI-FA)的合成 | 第48页 |
·核磁共振氢谱检测(~1H NMR) | 第48页 |
·紫外分光光度计检测(UV) | 第48-49页 |
·x-射线光电子能谱检测(XPS) | 第49页 |
·凝胶渗透色谱法(GPC)测定分子量 | 第49页 |
·聚合物降解性实验 | 第49页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第49页 |
·粒径和表面电荷的测定 | 第49-50页 |
·细胞毒性实验(MTT) | 第50页 |
·体外细胞转染实验 | 第50-51页 |
·瘤内转染和体内分布实验 | 第51页 |
·数据的统计学处理 | 第51-52页 |
·实验结果与讨论 | 第52-68页 |
·薏苡仁多糖(CP)的提取和纯化 | 第52页 |
·聚合物的合成 | 第52-54页 |
·核磁共振氢谱检测(~1H NMR) | 第54-55页 |
·紫外吸收光谱检测(UV) | 第55-56页 |
·x-射线光电子能谱检测(XPS) | 第56-57页 |
·高效凝胶渗透色谱法(GPC)测聚合物分子量 | 第57-58页 |
·聚合物的降解 | 第58页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第58-59页 |
·粒径和表面电荷的测定 | 第59-61页 |
·细胞毒性实验(MTT) | 第61-63页 |
·体外细胞转染 | 第63-66页 |
·瘤内转染和体内分布实验 | 第66-68页 |
·小结 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-71页 |
第三章 靶向配体和细胞穿膜肽介导的双配体阳离子聚合物载体 | 第71-105页 |
·引言 | 第71-73页 |
·材料和仪器 | 第73-76页 |
·材料与试剂 | 第73-75页 |
·细胞与动物 | 第75页 |
·实验仪器 | 第75-76页 |
·实验方法与步骤 | 第76-82页 |
·阳离子聚合物(PC、FA-PC和R8-PC)的合成 | 第76-77页 |
·核磁共振氢谱检测(~1H NMR) | 第77页 |
·紫外分光光度计检测(UV) | 第77页 |
·x-射线光电子能谱检测(XPS) | 第77-78页 |
·复合物的制备 | 第78页 |
·胞毒性实验(MTT) | 第78页 |
·复合物粒径和表面电荷的测定 | 第78-79页 |
·体外转染实验 | 第79-80页 |
·流式细胞仪检测绿色荧光蛋白表达 | 第80页 |
·细胞内吞实验 | 第80页 |
·内吞抑制实验 | 第80-81页 |
·瘤内转染和体内分布实验 | 第81页 |
·数据的统计学处理 | 第81-82页 |
·结果与讨论 | 第82-101页 |
·聚合物材料的合成 | 第82-85页 |
·核磁共振氢谱检测(~1H NMR) | 第85-86页 |
·紫外分光光度计检测(UV) | 第86-87页 |
·x-射线光电子能谱检测(XPS) | 第87-88页 |
·粒径和表面电荷的测定 | 第88-90页 |
·细胞毒性实验(MTT) | 第90-91页 |
·体外转染实验 | 第91-97页 |
·细胞内吞实验 | 第97-98页 |
·内吞抑制实验 | 第98-99页 |
·瘤内转染和体内分布实验 | 第99-101页 |
·小结 | 第101-103页 |
参考文献 | 第103-105页 |
第四章 双功能短肽修饰的聚阳离子载体及携带micRNA-34a对肿瘤细胞的抑制作用 | 第105-139页 |
·前言 | 第105-107页 |
·材料与仪器 | 第107-110页 |
·材料和试剂 | 第107-109页 |
·细胞与动物 | 第109页 |
·实验仪器 | 第109-110页 |
·实验方法与步骤 | 第110-117页 |
·阳离子聚合物PC-CC9的合成 | 第110-111页 |
·核磁共振氢谱检测(H~1 NMR) | 第111页 |
·复合物的制备 | 第111页 |
·琼脂糖凝胶电泳阻滞实验 | 第111页 |
·粒径与表面电荷的测定 | 第111-112页 |
·透射电子显微镜观察实验(TEM) | 第112页 |
·细胞毒性实验(MTT) | 第112页 |
·细胞内吞实验 | 第112-113页 |
·体外细胞转染实验 | 第113-114页 |
·PI/RNA染色法检测细胞周期 | 第114页 |
·Annexin-V/FITC检测细胞凋亡 | 第114页 |
·细胞划痕实验 | 第114-115页 |
·荧光定量PCR测定miRNA的表达水平 | 第115页 |
·Western blot检测细胞蛋白表达水平 | 第115-116页 |
·体内分布及抑瘤实验 | 第116页 |
·数据的统计学处理 | 第116-117页 |
·结果与讨论 | 第117-136页 |
·阳离子聚合物PC-CC9的合成 | 第117-118页 |
·核磁共振氢谱检测(~1H NMR) | 第118-119页 |
·琼脂糖凝胶电泳阻滞实验 | 第119-120页 |
·粒径和表面电荷的测定 | 第120-122页 |
·细胞毒性实验(MTT) | 第122-123页 |
·细胞内吞实验 | 第123-124页 |
·体外细胞转染实验 | 第124-126页 |
·细胞凋亡和周期的测定 | 第126-130页 |
·细胞划痕实验 | 第130-131页 |
·荧光定量PCR检测miRNA的表达 | 第131-133页 |
·Westen Blot检测蛋白表达水平 | 第133-134页 |
·体内分布和抑瘤实验 | 第134-136页 |
·小结 | 第136-137页 |
参考文献 | 第137-139页 |
全文结论、创新点及未来研究方向 | 第139-141页 |
攻读博士学位期间主要研究成果及参编书籍 | 第141-142页 |
致谢 | 第142页 |