摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-21页 |
·杆状病毒及其对宿主的感染 | 第11-13页 |
·杆状病毒的分类及生活周期 | 第11-12页 |
·杆状病毒的分子生物学研究 | 第12-13页 |
·RNAI技术概述 | 第13页 |
·RNAi的作用机制 | 第13页 |
·RNAi技术的作用特点 | 第13页 |
·利用RNAI进行家蚕抗病育种研究进展 | 第13-15页 |
·RNAi在家蚕研究中的应用 | 第13-14页 |
·RNAi在抗杆状病毒中的研究 | 第14页 |
·RNAi技术在家蚕中抑制BmNPV增殖的研究进展 | 第14-15页 |
·RNAI载体 | 第15-21页 |
·hpRNA载体 | 第15-16页 |
·发夹结构 | 第16页 |
·转录终止子 | 第16-17页 |
·启动子的结构及功能 | 第17-21页 |
第二章 引言 | 第21-23页 |
·研究背景 | 第21页 |
·研究目的和意义 | 第21页 |
·主要内容和技术路线 | 第21-23页 |
·主要内容 | 第21-22页 |
·技术路线 | 第22-23页 |
第三章 材料与方法 | 第23-37页 |
·主要材料和试剂 | 第23-26页 |
·生物材料 | 第23页 |
·主要仪器 | 第23-24页 |
·主要试剂 | 第24页 |
·主要试剂的配制 | 第24-26页 |
·方法 | 第26-37页 |
·启动子克隆 | 第26-31页 |
·启动子活性检测 | 第31-32页 |
·转基因RNAi载体的构建及抗病毒检测 | 第32-37页 |
第四章 结果与分析 | 第37-61页 |
·启动子的选择及克隆 | 第37-43页 |
·启动子的选择 | 第37-38页 |
·引物设计 | 第38-39页 |
·目的片段扩增 | 第39页 |
·启动子的TA克隆 | 第39-40页 |
·酶切鉴定 | 第40页 |
·测序 | 第40-41页 |
·BmNPV的39k及lef3启动子序列分析 | 第41-43页 |
·启动子活性检测 | 第43-52页 |
·重组pGL3荧光素酶检测载体构建 | 第43-45页 |
·启动子活性的检测检测 | 第45-52页 |
·转基因RNAI载体的构建 | 第52-56页 |
·hpRNA载体组成的设计 | 第52-53页 |
·引物设计 | 第53页 |
·载体所需片段的扩增 | 第53-54页 |
·重组质粒的检测 | 第54页 |
·构建RNAi载体 | 第54-55页 |
·RNAi载体的测序及序列分析 | 第55-56页 |
·细胞水平上转基因载体的抗病毒检测 | 第56-61页 |
·转基因载体转染家蚕细胞及建立稳定转化的转基因细胞系 | 第56页 |
·稳定转化转基因细胞系的抗病性初步检测 | 第56-61页 |
第五章 讨论 | 第61-63页 |
第六章 小结 | 第63-65页 |
·诱导型启动子的克隆 | 第63页 |
·诱导型启动子的活性 | 第63页 |
·RNAI载体的构建及细胞水平的抗病毒检测 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-69页 |
致谢 | 第69页 |