中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-8页 |
第一部分 前言 | 第8-24页 |
·CK1α基因的研究进展 | 第8-17页 |
·RNA干扰的概述 | 第17-23页 |
·本课题的立论依据、目的及意义 | 第23-24页 |
第二部分 实验材料和仪器设备 | 第24-28页 |
·主要材料与试剂 | 第24-26页 |
·主要仪器设备 | 第26-28页 |
第三部分 实验方法 | 第28-34页 |
·CK1α基因转录产物种类及其大小的确定 | 第28页 |
·CK1α mRNA在不同细胞中表达分析 | 第28-29页 |
·干扰位点及发夹结构的设计 | 第29页 |
·pGenesil-shRNA重组质粒的构建 | 第29-31页 |
·重组质粒转染A549细胞 | 第31页 |
·G418筛选建立稳定转染细胞系 | 第31页 |
·RT-PCR检测干扰效率 | 第31页 |
·Western blotting检测干扰效率 | 第31-32页 |
·A549、A549-NK及A549-S1三者生长曲线的比较 | 第32页 |
·CCK-8细胞增殖实验 | 第32页 |
·细胞流式检测细胞周期 | 第32页 |
·统计学处理 | 第32-34页 |
第四部分 实验结果 | 第34-44页 |
·CK1α基因转录产物种类及其大小的确定结果 | 第34页 |
·CK1α mRNA在不同细胞中表达分析结果 | 第34-35页 |
·pGenesil-1质粒的酶切鉴定结果 | 第35-36页 |
·重组pGenesil-shRNA质粒的酶切鉴定结果 | 第36页 |
·重组pGenesil-shRNA质粒测序结果 | 第36-37页 |
·倒置荧光显微镜观察细胞转染的结果 | 第37-38页 |
·RT-PCR检测结果 | 第38-39页 |
·Western blotting检测结果 | 第39-40页 |
·A549、A549-NK及A549-S1三者生长曲线的比较结果 | 第40页 |
·CCK-8细胞增殖实验结果 | 第40-41页 |
·细胞周期分布检测结果 | 第41-44页 |
第五部分 讨论 | 第44-50页 |
·靶基因的选取 | 第44-45页 |
·靶基因的转录分析及细胞株的选取 | 第45页 |
·RNA干扰方法的选取及结果分析 | 第45-46页 |
·RNA干扰效果检测方法的选取 | 第46页 |
·细胞增殖实验的方法选取及结果分析 | 第46-47页 |
·结论及展望 | 第47-50页 |
第六部分 参考文献 | 第50-60页 |
附录Ⅰ 英文缩略词索引 | 第60-62页 |
附录Ⅱ CSNK1A1(CK1αLS)基因序列 | 第62-64页 |
附录Ⅲ 本研究中所用试剂配方 | 第64-68页 |
在校期间发表论文 | 第68-70页 |
致谢 | 第70页 |