| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略语表(abbreviations) | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-24页 |
| ·化学农药的使用污染严重,生物防治受到青睐 | 第11页 |
| ·芽胞杆菌分布广泛、无毒无害、抑菌谱广 | 第11-12页 |
| ·脂肽种类繁多,功能多样,应用前景广泛 | 第12-15页 |
| ·脂肽种类繁多 | 第12-13页 |
| ·脂肽类抗生素功能多样,应用前景广泛 | 第13-14页 |
| ·脂肽抑菌机制 | 第14-15页 |
| ·细胞凋亡 | 第15-17页 |
| ·细胞凋亡与特征 | 第15-16页 |
| ·细胞凋亡途径与凋亡机制 | 第16-17页 |
| ·死亡受体介导的细胞凋亡通路 | 第16页 |
| ·线粒体/细胞色素C介导的凋亡通路 | 第16-17页 |
| ·真菌细胞凋亡 | 第17-22页 |
| ·真菌细胞凋亡的特征与检测 | 第18-20页 |
| ·细胞的形态学检测 | 第18页 |
| ·ROS积累的检测 | 第18-19页 |
| ·磷脂酰丝氨酸外翻检测 | 第19页 |
| ·DNA断裂的检测 | 第19-20页 |
| ·线粒体膜电位的检测 | 第20页 |
| ·caspase的检测 | 第20页 |
| ·真菌细胞凋亡的信号通路 | 第20-21页 |
| ·Ras通路 | 第21页 |
| ·性激素应答通路 | 第21页 |
| ·ROS是真菌细胞凋亡的一个主要调节剂 | 第21-22页 |
| ·抗真菌物质导致的真菌细胞凋亡 | 第22页 |
| ·研究意义 | 第22-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-38页 |
| ·材料 | 第24-25页 |
| ·菌种 | 第24页 |
| ·主要培养基 | 第24页 |
| ·实验试剂和仪器 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-38页 |
| ·抗植物病原真菌的水稻内生菌的分离鉴定与抑菌谱的构建 | 第25-27页 |
| ·抗植物病原真菌的水稻内生菌的分离纯化 | 第25页 |
| ·分离内生菌的分子与形态鉴定 | 第25-26页 |
| ·WH1无菌发酵液的获取 | 第26页 |
| ·WH1对水稻纹枯病菌的抗菌活性测定 | 第26页 |
| ·WH1发酵液抑菌谱的测定 | 第26-27页 |
| ·WH1发酵液抑制油菜核盘菌的离体叶片实验 | 第27页 |
| ·抗真菌活性物质的鉴定 | 第27-29页 |
| ·WH1发酵液中抗真菌物质的纯化 | 第27页 |
| ·抗真菌活性物质的薄层层析分析 | 第27-28页 |
| ·抗真菌活性物质的红外分析 | 第28页 |
| ·WH1fungin的Tricine-SDS-PAGE检测 | 第28页 |
| ·WH1fungin的液相色谱/电喷雾质谱(LC/ESI-MS)分析 | 第28-29页 |
| ·WH1fungin酸水解产物的薄层层析 | 第29页 |
| ·WH1fungin浓度的测定 | 第29页 |
| ·WH1fungin处理细胞的葡聚糖合酶活性检测 | 第29-30页 |
| ·依文思蓝染色分析 | 第30页 |
| ·真菌细胞的凋亡检测 | 第30-34页 |
| ·双苯甲亚胺(Hoechst 33258)染色分析 | 第30-31页 |
| ·Annexin Ⅴ-FITC标记分析 | 第31页 |
| ·ROS积累的检测 | 第31-32页 |
| ·TdT介导的dUTP缺口末端标记分析(TUNEL分析) | 第32页 |
| ·caspase的活性测定 | 第32-33页 |
| ·WH1fungin诱导真菌凋亡的剂量分析 | 第33页 |
| ·ROS清除剂对真菌细胞凋亡的影响 | 第33页 |
| ·添加寡霉素对WH1fungin诱导凋亡的影响 | 第33-34页 |
| ·WH1fungin诱导假丝酵母凋亡后细胞色素C释放情况检测 | 第34-35页 |
| ·假丝酵母细胞色素C的纯化 | 第34页 |
| ·假丝酵母细胞色素C多克隆抗体的制备与效价测定 | 第34页 |
| ·假丝酵母线粒体的纯化 | 第34-35页 |
| ·ELISA测定细胞色素C的释放 | 第35页 |
| ·WH1fungin相互作用蛋白的分离纯化及鉴定 | 第35-36页 |
| ·亲和层析柱的制备 | 第35-36页 |
| ·酵母总蛋白的提取 | 第36页 |
| ·与WH1fungin相互作用蛋白的亲和层析纯化与鉴定 | 第36页 |
| ·ATPase活性的测定 | 第36-38页 |
| ·细胞的处理和总蛋白的提取 | 第36-37页 |
| ·ATPase活性的测定 | 第37-38页 |
| 3. 结果与分析 | 第38-58页 |
| ·水稻内生菌的分离及对病原菌抑菌活性分析 | 第38-41页 |
| ·水稻内生菌的分离鉴定 | 第38-40页 |
| ·WH1平板抑菌活性分析 | 第40页 |
| ·WH1对接种核盘菌的油菜离体叶片的抗菌保护分析 | 第40-41页 |
| ·抑菌活性物质的分离纯化与鉴定 | 第41-44页 |
| ·抑菌活性物质的葡聚糖层析柱分离与活性测定 | 第41页 |
| ·抑菌活性物质的薄层层析分离与抑菌活性检测 | 第41-42页 |
| ·抑菌活性物质的红外图谱分析 | 第42-43页 |
| ·WH1fungin的Tricine-SDS-PAGE检测 | 第43页 |
| ·WH1fungin酸水解产物的薄层层析 | 第43页 |
| ·WH1fungin的LC/ESI-MS分析 | 第43-44页 |
| ·WH1fungin抑制真菌细胞的葡聚糖合酶 | 第44-46页 |
| ·高浓度的WH1fungin可导致真菌细胞坏死 | 第46-47页 |
| ·WH1fungin可诱导真菌细胞凋亡 | 第47-52页 |
| ·双苯甲亚胺(Hoechst 33258)染色分析 | 第47-48页 |
| ·Annexin Ⅴ-FITC标记分析 | 第48-49页 |
| ·ROS积累的检测 | 第49-50页 |
| ·TUNEL分析 | 第50-51页 |
| ·caspase活性的检测 | 第51-52页 |
| ·WH1fungin诱导真菌凋亡的剂量分析 | 第52页 |
| ·WH1fungin诱导凋亡影响因素分析 | 第52-54页 |
| ·清除ROS对WH1fungin诱导凋亡的作用 | 第52页 |
| ·添加寡霉素对WH1fungin诱导凋亡的影响 | 第52-54页 |
| ·凋亡假丝酵母中细胞色素C的释放 | 第54-55页 |
| ·假丝酵母中与WH1fungin相互作用蛋白的分离纯化与验证 | 第55-58页 |
| ·假丝酵母中与WH1fungin相互作用蛋白的分离纯化与鉴定 | 第55-57页 |
| ·真菌的ATP酶活性测定 | 第57-58页 |
| 讨论 | 第58-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 附录 | 第69页 |
