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镉和3,3,4,4-四氯联苯联合红系前体细胞毒性效应研究

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
第1章 绪论第10-18页
    1.1 重金属污染现状第10-12页
        1.1.1 重金属镉的环境污染现状第11页
        1.1.2 镉污染与人体健康第11-12页
    1.2 多氯联苯的污染现状第12-13页
        1.2.1 多氯联苯(PCBs)的人体暴露风险第13页
    1.3 多氯联苯和重金属共同暴露的研究现状第13-14页
    1.4 PCBs和镉对血液系统的毒性效应及机理研究第14页
    1.5 PCBs和镉对肝脏的毒性效应及机理研究第14-15页
    1.6 研究内容及方法第15-18页
第2章 Cd和PCB77对HEL细胞及亚细胞的毒性效应第18-30页
    2.1 实验材料第18-19页
    2.2 实验仪器第19页
    2.3 实验方法第19-22页
        2.3.1 人红白血病细胞(HEL)的培养方法第19-20页
        2.3.2 AlamarBlue(AB)法检测细胞活性第20页
        2.3.3 观察细胞形态第20页
        2.3.4 LDH法检测细胞膜损伤第20-21页
        2.3.5 MTT法检测细胞线粒体琥珀酸脱氢酶活性第21页
        2.3.6 JC-1检测细胞线粒体膜电位第21-22页
        2.3.7 相互作用类型的识别第22页
    2.4 实验结果与讨论第22-28页
        2.4.1 Cd和PCB77对HEL细胞活性的影响第22-24页
        2.4.2 Cd和PCB77对HEL细胞形态的影响第24-25页
        2.4.3 Cd和PCB77对HEL细胞膜通透性的影响第25页
        2.4.4 Cd和PCB77对HEL细胞线粒体琥珀酸脱氢酶的影响第25-26页
        2.4.5 Cd和PCB77对HEL细胞线粒体膜电位的影响第26-27页
        2.4.6 Cd和PCB77对HEL细胞的联合作用类型第27-28页
    2.5 本章小结第28-30页
第3章 Cd和PCB77诱导HEL细胞凋亡并激活elF2α-Atf4信号通路第30-40页
    3.1 实验材料第30页
    3.2 实验仪器第30页
    3.3 实验方法第30-33页
        3.3.1 流式细胞凋亡检测第30页
        3.3.2 细胞ROS水平检测第30-31页
        3.3.3 elF2α-Atf4信号通路mRNA表达定量检测第31-33页
    3.4 实验结果与讨论第33-39页
        3.4.1 Cd和PCB77共同暴露诱导HEL细胞凋亡第33-34页
        3.4.2 Cd和PCB77共同暴露促进HEL细胞ROS升高第34-35页
        3.4.3 Cd和PCB77共同暴露激活HEL细胞内elF2α-Atf4信号通路第35-39页
    3.5 本章小结第39-40页
第4章 Cd和PCB77对HEL细胞铁代谢的影响第40-46页
    4.1 实验材料第40页
    4.2 实验仪器第40页
    4.3 实验方法第40-42页
        4.3.1 细胞内自由铁LIP水平检测第40-41页
        4.3.2 Westernblot免疫印迹检测铁代谢相关蛋白表达第41-42页
    4.4 实验结果与讨论第42-45页
        4.4.1 Cd和PCB77共同暴露对细胞LIP的影响第42-43页
        4.4.2 Cd和PCB77共同暴露对细胞铁代谢蛋白表达的影响第43-45页
    4.5 本章小结第45-46页
第5章 Cd和PCB77对肝细胞毒性效应与作用类型第46-52页
    5.1 实验材料第46页
    5.2 实验仪器第46页
    5.3 实验方法第46-47页
        5.3.1 人肝癌细胞(SMMC-7721)的培养方法第46-47页
        5.3.2 AlamarBlue(AB)法检测细胞活性第47页
        5.3.3 LDH法检测细胞膜损伤第47页
        5.3.4 MTT法检测细胞线粒体损伤第47页
        5.3.5 JC-1检测细胞线粒体膜电位第47页
        5.3.6 相互作用类型的识别第47页
    5.4 实验结果与讨论第47-51页
        5.4.1 Cd和PCB77对肝细胞活性的影响第47-48页
        5.4.2 Cd和PCB77对肝细胞膜通透性的影响第48-49页
        5.4.3 Cd和PCB77对肝细胞线粒体的损伤第49-50页
        5.4.4 Cd和PCB77对肝细胞的联合作用类型第50-51页
    5.5 本章小结第51-52页
第6章 Cd和PCB77对肝细胞能量代谢的影响第52-62页
    6.1 实验材料第52页
    6.2 实验仪器第52页
    6.3 实验方法第52-56页
        6.3.1 细胞暴露第52页
        6.3.2 细胞内ATP含量检测第52-53页
        6.3.3 细胞内总ATP酶含量检测第53-54页
        6.3.4 细胞内乳酸(LD)含量检测第54-55页
        6.3.5 细胞内丙酮酸含量检测第55页
        6.3.6 细胞内甘油三酯(TG)含量检测第55页
        6.3.7 细胞内胆固醇含量检测第55-56页
        6.3.8 细胞内果糖-1,6-二磷酸酶(FBP)含量检测第56页
    6.4 实验结果与讨论第56-61页
        6.4.1 Cd和PCB77对肝细胞能量代谢的影响第56-58页
        6.4.2 Cd和PCB77对肝细胞内糖代谢的影响第58-59页
        6.4.3 Cd和PCB77对肝细胞内脂质代谢的影响第59-61页
    6.5 本章小结第61-62页
结论第62-64页
参考文献第64-72页
攻读硕士学位期间所发表的论文第72-74页
致谢第74页

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