摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第1章 绪论 | 第10-18页 |
1.1 重金属污染现状 | 第10-12页 |
1.1.1 重金属镉的环境污染现状 | 第11页 |
1.1.2 镉污染与人体健康 | 第11-12页 |
1.2 多氯联苯的污染现状 | 第12-13页 |
1.2.1 多氯联苯(PCBs)的人体暴露风险 | 第13页 |
1.3 多氯联苯和重金属共同暴露的研究现状 | 第13-14页 |
1.4 PCBs和镉对血液系统的毒性效应及机理研究 | 第14页 |
1.5 PCBs和镉对肝脏的毒性效应及机理研究 | 第14-15页 |
1.6 研究内容及方法 | 第15-18页 |
第2章 Cd和PCB77对HEL细胞及亚细胞的毒性效应 | 第18-30页 |
2.1 实验材料 | 第18-19页 |
2.2 实验仪器 | 第19页 |
2.3 实验方法 | 第19-22页 |
2.3.1 人红白血病细胞(HEL)的培养方法 | 第19-20页 |
2.3.2 AlamarBlue(AB)法检测细胞活性 | 第20页 |
2.3.3 观察细胞形态 | 第20页 |
2.3.4 LDH法检测细胞膜损伤 | 第20-21页 |
2.3.5 MTT法检测细胞线粒体琥珀酸脱氢酶活性 | 第21页 |
2.3.6 JC-1检测细胞线粒体膜电位 | 第21-22页 |
2.3.7 相互作用类型的识别 | 第22页 |
2.4 实验结果与讨论 | 第22-28页 |
2.4.1 Cd和PCB77对HEL细胞活性的影响 | 第22-24页 |
2.4.2 Cd和PCB77对HEL细胞形态的影响 | 第24-25页 |
2.4.3 Cd和PCB77对HEL细胞膜通透性的影响 | 第25页 |
2.4.4 Cd和PCB77对HEL细胞线粒体琥珀酸脱氢酶的影响 | 第25-26页 |
2.4.5 Cd和PCB77对HEL细胞线粒体膜电位的影响 | 第26-27页 |
2.4.6 Cd和PCB77对HEL细胞的联合作用类型 | 第27-28页 |
2.5 本章小结 | 第28-30页 |
第3章 Cd和PCB77诱导HEL细胞凋亡并激活elF2α-Atf4信号通路 | 第30-40页 |
3.1 实验材料 | 第30页 |
3.2 实验仪器 | 第30页 |
3.3 实验方法 | 第30-33页 |
3.3.1 流式细胞凋亡检测 | 第30页 |
3.3.2 细胞ROS水平检测 | 第30-31页 |
3.3.3 elF2α-Atf4信号通路mRNA表达定量检测 | 第31-33页 |
3.4 实验结果与讨论 | 第33-39页 |
3.4.1 Cd和PCB77共同暴露诱导HEL细胞凋亡 | 第33-34页 |
3.4.2 Cd和PCB77共同暴露促进HEL细胞ROS升高 | 第34-35页 |
3.4.3 Cd和PCB77共同暴露激活HEL细胞内elF2α-Atf4信号通路 | 第35-39页 |
3.5 本章小结 | 第39-40页 |
第4章 Cd和PCB77对HEL细胞铁代谢的影响 | 第40-46页 |
4.1 实验材料 | 第40页 |
4.2 实验仪器 | 第40页 |
4.3 实验方法 | 第40-42页 |
4.3.1 细胞内自由铁LIP水平检测 | 第40-41页 |
4.3.2 Westernblot免疫印迹检测铁代谢相关蛋白表达 | 第41-42页 |
4.4 实验结果与讨论 | 第42-45页 |
4.4.1 Cd和PCB77共同暴露对细胞LIP的影响 | 第42-43页 |
4.4.2 Cd和PCB77共同暴露对细胞铁代谢蛋白表达的影响 | 第43-45页 |
4.5 本章小结 | 第45-46页 |
第5章 Cd和PCB77对肝细胞毒性效应与作用类型 | 第46-52页 |
5.1 实验材料 | 第46页 |
5.2 实验仪器 | 第46页 |
5.3 实验方法 | 第46-47页 |
5.3.1 人肝癌细胞(SMMC-7721)的培养方法 | 第46-47页 |
5.3.2 AlamarBlue(AB)法检测细胞活性 | 第47页 |
5.3.3 LDH法检测细胞膜损伤 | 第47页 |
5.3.4 MTT法检测细胞线粒体损伤 | 第47页 |
5.3.5 JC-1检测细胞线粒体膜电位 | 第47页 |
5.3.6 相互作用类型的识别 | 第47页 |
5.4 实验结果与讨论 | 第47-51页 |
5.4.1 Cd和PCB77对肝细胞活性的影响 | 第47-48页 |
5.4.2 Cd和PCB77对肝细胞膜通透性的影响 | 第48-49页 |
5.4.3 Cd和PCB77对肝细胞线粒体的损伤 | 第49-50页 |
5.4.4 Cd和PCB77对肝细胞的联合作用类型 | 第50-51页 |
5.5 本章小结 | 第51-52页 |
第6章 Cd和PCB77对肝细胞能量代谢的影响 | 第52-62页 |
6.1 实验材料 | 第52页 |
6.2 实验仪器 | 第52页 |
6.3 实验方法 | 第52-56页 |
6.3.1 细胞暴露 | 第52页 |
6.3.2 细胞内ATP含量检测 | 第52-53页 |
6.3.3 细胞内总ATP酶含量检测 | 第53-54页 |
6.3.4 细胞内乳酸(LD)含量检测 | 第54-55页 |
6.3.5 细胞内丙酮酸含量检测 | 第55页 |
6.3.6 细胞内甘油三酯(TG)含量检测 | 第55页 |
6.3.7 细胞内胆固醇含量检测 | 第55-56页 |
6.3.8 细胞内果糖-1,6-二磷酸酶(FBP)含量检测 | 第56页 |
6.4 实验结果与讨论 | 第56-61页 |
6.4.1 Cd和PCB77对肝细胞能量代谢的影响 | 第56-58页 |
6.4.2 Cd和PCB77对肝细胞内糖代谢的影响 | 第58-59页 |
6.4.3 Cd和PCB77对肝细胞内脂质代谢的影响 | 第59-61页 |
6.5 本章小结 | 第61-62页 |
结论 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-72页 |
攻读硕士学位期间所发表的论文 | 第72-74页 |
致谢 | 第74页 |