摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-8页 |
缩略词表 | 第12-14页 |
绪论 | 第14-23页 |
第一部分:苷松新酮对骨吸收的影响 | 第23-48页 |
1.1 前言 | 第23-24页 |
1.2 材料与试剂 | 第24-27页 |
1.2.1 主要器材 | 第24-25页 |
1.2.2 主要试剂 | 第25-26页 |
1.2.3 主要试剂溶液的配制 | 第26-27页 |
1.2.4 细胞及动物来源 | 第27页 |
1.3 实验方法 | 第27-38页 |
1.3.1 RAW264.7 细胞系复苏冻存与传代 | 第27页 |
1.3.2 RAW264.7 细胞系 | 第27-28页 |
1.3.3 BMMs的分离培养 | 第28-29页 |
1.3.4 细胞增殖活性检测 | 第29页 |
1.3.5 TRAP 染色检测成熟破骨样细胞实验 | 第29-31页 |
1.3.6 DAPI 染色实验 | 第31页 |
1.3.7 蛋白质免疫印迹实验 | 第31-34页 |
1.3.8 破骨细胞骨吸收实验 | 第34-35页 |
1.3.9 免疫荧光激光共聚焦显微观察 F-actin 实验 | 第35页 |
1.3.10 LPS诱导小鼠牙槽骨骨吸收 | 第35-36页 |
1.3.11 microCT分析和组织学染色 | 第36-37页 |
1.3.12 数据统计分析 | 第37-38页 |
1.4 实验结果 | 第38-46页 |
1.4.1 原代BMMs的分离培养 | 第38页 |
1.4.2 苷松新酮细胞毒性分析 | 第38-39页 |
1.4.3 苷松新酮抑制破骨样细胞形成 | 第39-41页 |
1.4.4 苷松新酮抑制破骨细胞骨吸收功能 | 第41-44页 |
1.4.5 苷松新酮有效抑制LPS介导的小鼠牙槽骨吸收 | 第44-46页 |
1.5 讨论 | 第46-47页 |
1.6 小结 | 第47-48页 |
第二部分:苷松新酮对骨吸收的作用机制研究初探 | 第48-62页 |
2.1 前言 | 第48-49页 |
2.2 材料与试剂 | 第49-50页 |
2.2.1 主要器材 | 第49页 |
2.2.2 主要试剂 | 第49-50页 |
2.2.3 主要试剂溶液的配制 | 第50页 |
2.3 实验方法 | 第50-55页 |
2.3.1 活性氧检测实验 | 第50-51页 |
2.3.2 实时荧光定量 PCR 实验 | 第51-54页 |
2.3.3 蛋白质免疫印迹实验 | 第54-55页 |
2.3.4 数据统计分析 | 第55页 |
2.4 实验结果 | 第55-59页 |
2.4.1 苷松新酮减少ROS生成 | 第55页 |
2.4.2 苷松新酮显著下调RANKL诱导的ERK、JNK、PLCγ2 磷酸化及下游的NFATc1信号通路 | 第55-56页 |
2.4.3 苷松新酮抑制破骨细胞特异性基因表达 | 第56-59页 |
2.5 讨论 | 第59-61页 |
2.6 小结 | 第61-62页 |
第三部分:苷松新酮对骨生成的影响 | 第62-75页 |
3.1 前言 | 第62-63页 |
3.2 材料与试剂 | 第63-65页 |
3.2.1 主要器材 | 第63-64页 |
3.2.2 主要试剂 | 第64页 |
3.2.3 主要试剂溶液的配制 | 第64-65页 |
3.3 实验方法 | 第65-70页 |
3.3.1 人牙周膜干细胞的分离培养及流式分析 | 第65页 |
3.3.2 细胞增殖活性检测 | 第65-66页 |
3.3.3 碱性磷酸酶染色实验 | 第66页 |
3.3.4 茜素红染色实验 | 第66页 |
3.3.5 蛋白质免疫印迹实验 | 第66-70页 |
3.3.6 数据统计分析 | 第70页 |
3.4 实验结果 | 第70-73页 |
3.4.1 hDPSCs的分离与培养 | 第70页 |
3.4.2 苷松新酮细胞毒性分析 | 第70-72页 |
3.4.3 苷松新酮对hDPSCs成骨分化影响 | 第72-73页 |
3.5 讨论 | 第73-74页 |
3.6 小结 | 第74-75页 |
全文总结 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-84页 |
致谢 | 第84-86页 |
攻读硕士期间发表论文 | 第86页 |