| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 前言 | 第10-28页 |
| 1.1 简介 | 第10页 |
| 1.2 不同亚型P2X受体的生物学功能及其药理学特性 | 第10-16页 |
| 1.2.1 P2X1受体 | 第11页 |
| 1.2.2 P2X2受体 | 第11-12页 |
| 1.2.3 P2X3受体及P2X2/3异聚体 | 第12-13页 |
| 1.2.4 P2X4受体 | 第13-14页 |
| 1.2.5 P2X5受体 | 第14页 |
| 1.2.6 P2X6受体 | 第14页 |
| 1.2.7 P2X7受体 | 第14-16页 |
| 1.3 P2X受体的门控机制的研究进展 | 第16-21页 |
| 1.3.1 P2X受体的结构特征 | 第16-18页 |
| 1.3.2 P2X受体开放过程中的构象变化 | 第18-19页 |
| 1.3.3 P2X受体的离子通透路径 | 第19-20页 |
| 1.3.4 胞内N端和C端对P2X受体功能的调节 | 第20-21页 |
| 1.4 P2X受体激活所需的ATP分子数 | 第21-22页 |
| 1.5 P2X受体的变构调节位点 | 第22-27页 |
| 1.5.1 Zn~(2+)和Cu~(2+)对于通道功能的调节及其作用位点 | 第22-24页 |
| 1.5.2 Ca~(2+)和Mg~(2+)对于通道功能的调节及其作用位点 | 第24页 |
| 1.5.3 质子对于通道功能的调节及其作用位点 | 第24-25页 |
| 1.5.4 脂质对于通道功能的调节 | 第25-26页 |
| 1.5.5 其他类型的变构调节剂 | 第26-27页 |
| 1.6 结论 | 第27-28页 |
| 第二章 材料和方法 | 第28-42页 |
| 2.1 HEK293细胞的培养以及转染 | 第28-29页 |
| 2.2 质粒载体的构建以及点突变 | 第29-33页 |
| 2.3 细胞膜蛋白的提取及Western blotting | 第33-38页 |
| 2.4 电生理 | 第38-40页 |
| 2.5 同源建模、分子动力学模拟(Molecular Dynamic Simulations)与多元动力学(Metadynamics) | 第40-41页 |
| 2.6 数据分析 | 第41-42页 |
| 第三章 高度保守盐桥R309-D85在P2X受体中门控过程的作用. | 第42-60页 |
| 3.1 引言 | 第42-43页 |
| 3.2 实验结果 | 第43-51页 |
| 3.2.1 R312-D88(zfP2X4)形成的盐桥在P2X家族中高度保守 | 第43-44页 |
| 3.2.2 盐桥R309-D85(rP2X4)维持通道的功能 | 第44-46页 |
| 3.2.3 盐桥R309-D85维持通道的稳定性和通道门控,不参与ATP识别和通道组装 | 第46-47页 |
| 3.2.4 盐桥R309-D85稳定β2,3的弯折构象和多区域之间的相互作用 | 第47-48页 |
| 3.2.5 β2,3弯折构象的改变影响蛋白稳定性和通道门控 | 第48-50页 |
| 3.2.6 采取多种方式改变β2,3的弯折构象引起通道功能丧失及蛋白表达下降 | 第50页 |
| 3.2.7 盐桥在其他P2X亚型功能中发挥重要作用及其与离子通道病的关系 | 第50-51页 |
| 3.3 讨论 | 第51-53页 |
| 3.4 实验结果图及说明 | 第53-60页 |
| 第四章 P2X受体中门控过程的中间状态 | 第60-72页 |
| 4.1 引言 | 第60-61页 |
| 4.2 结果 | 第61-65页 |
| 4.2.1 P2X4受体激活过程中,A87-D88-Y89的位移在通道激活过程中发挥重要作用 | 第61-62页 |
| 4.2.2 头部区域和β2,3的协调运动引起了中间状态的发生 | 第62页 |
| 4.2.3 β2,3的向右运动对通道激活十分重要 | 第62-63页 |
| 4.2.4 β2,3向右运动之前必须有一个向左的运动才能保证P2X4通道的激活 | 第63-64页 |
| 4.2.5 β2,3和头部的运动协调Beak区域的运动引起通道开放 | 第64-65页 |
| 4.3 讨论 | 第65-66页 |
| 4.4 实验图和说明 | 第66-72页 |
| 参考文献 | 第72-93页 |
| 附录 | 第93-94页 |
| 在学期间的研究成果 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |
