| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第1章 绪论 | 第12-24页 |
| 1.1 生物制氢的研究背景 | 第12-15页 |
| 1.1.1 衣藻制氢的光合途径 | 第12-13页 |
| 1.1.2 莱茵衣藻光合产氢的机理途径 | 第13-14页 |
| 1.1.3 莱茵衣藻的光合产氢量产量提高方法 | 第14-15页 |
| 1.1.3.1.1 缺硫培养 | 第14页 |
| 1.1.3.1.2 抑制PSII光合放氧 | 第14-15页 |
| 1.2 衣藻中非编码RNA(ncRNA)的研究进展 | 第15-19页 |
| 1.2.1 莱茵衣藻中microRNA(miRNA)的近期研究进展 | 第15-16页 |
| 1.2.2 物种中长链非编码RNA的研究进展 | 第16-19页 |
| 1.3 莱茵衣藻在光合产氢通路上的ncRNA调控机理研究 | 第19-24页 |
| 1.3.1 衣藻中长链非编码RNA调控光合产氢的全新领域研究思路 | 第19-22页 |
| 1.3.2 实验创新点及先进性 | 第22-24页 |
| 第2章 lncRNA筛选与验证 | 第24-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-25页 |
| 2.1.1 实验藻株 | 第24页 |
| 2.1.2 实验试剂及仪器 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-29页 |
| 2.2.1 莱茵衣藻的培养 | 第25-26页 |
| 2.2.2 缺硫前后莱茵衣藻总RNA提取及转录水平检测 | 第26-29页 |
| 2.3 结果 | 第29-30页 |
| 2.3.1 缺硫前后莱茵衣藻总RNA提取结果 | 第29-30页 |
| 2.4 讨论 | 第30页 |
| 2.5 本章小结 | 第30-31页 |
| 第3章 过表达lncRNA衣藻转化株的构建及分子检测 | 第31-59页 |
| 3.1 材料 | 第31-33页 |
| 3.1.1 藻株与菌株 | 第31页 |
| 3.1.2 载体 | 第31页 |
| 3.1.3 试剂及仪器 | 第31-33页 |
| 3.2 方法 | 第33-43页 |
| 3.2.1 莱茵衣藻的培养 | 第33页 |
| 3.2.2 大肠杆菌的培养 | 第33页 |
| 3.2.3 lncRNA基因克隆与过表达lncRNA载体构建 | 第33-39页 |
| 3.2.4 衣藻单克隆转化株的筛选 | 第39-40页 |
| 3.2.5 衣藻转化株lncRNA转录水平检测 | 第40-41页 |
| 3.2.6 衣藻转化株靶基因转录水平检测 | 第41页 |
| 3.2.7 转化株生理生化指标检测 | 第41-43页 |
| 3.3 结果 | 第43-56页 |
| 3.3.1 lncRNA基因克隆 | 第43-46页 |
| 3.3.2 pH-lncRNA过表达载体构建 | 第46页 |
| 3.3.3 过表达lncRNA衣藻转化株筛选 | 第46-47页 |
| 3.3.4 衣藻转化株转录水平检测 | 第47-49页 |
| 3.3.6 衣藻细胞生理生化指标检测 | 第49-51页 |
| 3.3.7 产氢量与耗氧量的检测 | 第51-56页 |
| 3.4 讨论 | 第56-58页 |
| 3.5 本章小结 | 第58-59页 |
| 第4章 沉默lncRNA衣藻转化株的构建及分子检测 | 第59-77页 |
| 4.1 材料 | 第59-61页 |
| 4.1.1 藻株与菌株 | 第59页 |
| 4.1.2 载体 | 第59页 |
| 4.1.3 试剂及仪器 | 第59-61页 |
| 4.2 方法 | 第61-67页 |
| 4.2.1 莱茵衣藻的培养 | 第61页 |
| 4.2.2 大肠杆菌的培养 | 第61页 |
| 4.2.3 靶向lncRNA基因的amiRNA的设计 | 第61-62页 |
| 4.2.4 莱茵衣藻amiRNA表达前体框架构建 | 第62页 |
| 4.2.5 莱茵衣藻amiR-lncRNA表达载体的构建 | 第62-64页 |
| 4.2.6 大肠杆菌质粒的提取 | 第64页 |
| 4.2.7 莱茵衣藻中遗传转化amiR-lncRNA基因 | 第64页 |
| 4.2.8 衣藻单克隆转化株的筛选 | 第64页 |
| 4.2.9 转化株amiR-lncRNA转录水平检测 | 第64-67页 |
| 4.2.10 衣藻转化株lncRNA转录水平检测 | 第67页 |
| 4.2.11 衣藻转化株靶基因转录水平检测 | 第67页 |
| 4.2.12 转化株生理生化指标检测 | 第67页 |
| 4.3 结果 | 第67-75页 |
| 4.3.1 靶向lncRNA基因的amiRNA的设计 | 第67-68页 |
| 4.3.2 莱茵衣藻amiR-lncRNA表达载体的构建 | 第68-70页 |
| 4.3.3 沉默lncRNA衣藻转化株筛选 | 第70页 |
| 4.3.4 沉默lncRNA衣藻转化株转录水平验证 | 第70-73页 |
| 4.3.5 沉默lncRNA衣藻转化株生理生化检测 | 第73-74页 |
| 4.3.6 沉默lncRNA衣藻转化株产氢量与耗氧量的检测 | 第74-75页 |
| 4.4 讨论 | 第75-76页 |
| 4.5 本章小结 | 第76-77页 |
| 第5章 结论与展望 | 第77-80页 |
| 5.1 结论 | 第77-78页 |
| 5.2 展望 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-86页 |
| 附录 | 第86-89页 |
| 1.T-lncRNA测序结果 | 第86页 |
| 2.pH-lncRNA衣藻转化株测序结果 | 第86-87页 |
| 3.T-amiR-lncRNA质粒测序结果 | 第87页 |
| 4.pH-amiR-lncRNA衣藻转化株测序结果 | 第87-88页 |
| 5.amiR-lncRNA与lncRNA结合位点信息 | 第88页 |
| 6.amiR-lncRNA骨架示意图 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 | 第90页 |
