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分节丝状菌Segmented filamentous bacteria(SFB)与肉鸡肠道黏膜免疫系统的关系及其体外培养

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-7页
目录第7-10页
前言第10-11页
第一章 文献综述第11-24页
 1 肠道微生态理论第11-15页
   ·肠道微生态的提出第11页
   ·肠道微生态的研究现状第11-14页
   ·肠道微生物菌群的功能第14-15页
 2 肠道黏膜免疫系统第15-19页
   ·肠道黏膜免疫系统的组成第15-16页
   ·肠道黏膜免疫应答中的分泌型免疫球蛋白A(SIgA)第16-17页
   ·肠道黏膜免疫系统与肠道微生物的关系第17-19页
 3 正常宿主肠道内分节丝状菌(SFB)的生物学特性第19-24页
   ·分节丝状菌(SFB)的生存特性及生活史第19-20页
   ·分节丝状菌(SFB)系统分类学上的地位第20-21页
   ·分节丝状菌(SFB)与宿主肠道黏膜免疫系统的关系第21-22页
   ·分节丝状菌(SFB)在肠道微生态稳态中的作用第22页
   ·分节丝状菌(SFB)的研究方法及待解决的问题第22-24页
第二章 试验研究第24-76页
 第一节 分节丝状菌(SFB)的鉴定及其在鸡肠道中的动态变化第24-54页
  1 材料与方法第24-40页
   ·材料第24-27页
     ·耗材第24-25页
     ·试剂第25-26页
     ·试验动物第26页
     ·主要仪器和设备第26-27页
   ·试验方法第27-40页
     ·SFB菌群的形态观察第27-28页
     ·SFB菌群的分子鉴定第28-32页
     ·SFB菌群的多样性分析第32-35页
     ·SFB菌群的荧光标记第35-37页
     ·SFB菌群的定量检测第37-40页
     ·统计学分析第40页
  2 结果与分析第40-52页
   ·SFB菌群的形态第40-41页
   ·SFB菌群的分子检测第41-44页
     ·肉鸡肠道菌群基因组DNA第41-42页
     ·SFB引物的特异性第42-43页
     ·SFB在不同日龄鸡肠道内的检测第43-44页
   ·SFB菌群多样性分析第44-45页
     ·带GC夹子SFB特异引物的PCR第44页
     ·SFB的变性梯度凝胶电泳(DGGE)第44-45页
   ·SFB菌群的荧光标记第45-47页
     ·SFB探针的特异性第45-46页
     ·SFB的荧光原位杂交第46页
     ·SFB在正常鸡肠道内的分布第46-47页
   ·SFB菌群的定量检测第47-52页
     ·荧光定量PCR引物的选择第47-49页
     ·含特异DNA片段克隆载体的构建第49页
     ·荧光定量PCR标准曲线建立及灵敏度的确定第49-50页
     ·荧光定量PCR(qPCR)与荧光原位杂交(FISH)在菌落计数中的比较第50-51页
     ·SFB在不同日龄的正常鸡肠道内的动态变化第51-52页
  3 讨论第52-54页
   ·荧光原位杂交(FISH)与荧光定量PCR(qPCR)在检测SFB中的运用第52页
   ·SFB在正常鸡肠道内的动态变化第52-54页
     ·SFB在鸡肠道内的分布第52-53页
     ·SFB在正常鸡肠道内的动态变化第53-54页
 第二节 分节丝状菌(SFB)与鸡肠道黏膜免疫系统成熟的关系第54-68页
  1 材料与方法第54-59页
   ·材料第54-55页
     ·耗材第54页
     ·试剂第54-55页
     ·试验动物第55页
     ·主要仪器和设备第55页
   ·试验方法第55-59页
     ·鸡肠道黏膜免疫系统的干涉试验第55-56页
     ·鸡肠道内SIgA含量的检测第56-58页
     ·不同干涉组鸡肠道黏膜表面SFB含量的检测第58页
     ·鸡肠道菌群差异的PCR-DGGE检测第58-59页
  2 结果与分析第59-64页
   ·鸡肠道黏膜免疫系统的干涉试验第59-60页
     ·各组间体重的差异第59-60页
     ·各组间白细胞的差异第60页
   ·不同组间鸡肠道内SIgA含量的检测第60-62页
     ·SIgA标准曲线的绘制第60-61页
     ·不同干涉组鸡肠道内SIgA含量的变化第61-62页
   ·不同组之间鸡肠道内SFB的检测第62-63页
   ·不同干涉组之间的菌群差异第63-64页
     ·PCR-DGGE检测结果第63-64页
  3 讨论第64-68页
   ·乳酸菌与宿主黏膜免疫系统关系第64-65页
   ·环磷酰胺对动物免疫系统成熟的影响第65-66页
   ·分节丝状菌(SFB)对肉鸡肠道黏膜免疫系统成熟的影响第66-68页
 第三节 分节丝状菌(SFB)的体外培养第68-76页
  1 材料与方法第68-72页
   ·材料第68-69页
     ·耗材第68页
     ·试验动物及试培养菌群第68-69页
     ·培养基第69页
     ·药品及试剂第69页
     ·主要仪器和设备第69页
   ·方法第69-72页
     ·取样第69页
     ·培养基的配置第69-70页
     ·体外厌氧静置培养第70-71页
     ·体外厌氧连续发酵培养第71-72页
  2 结果与分析第72-74页
   ·体外厌氧静置培养第72-73页
     ·液体培养第72-73页
     ·固体培养第73页
   ·体外厌氧连续发酵培养第73-74页
  3 讨论第74-76页
第三章 文章总结第76-80页
 1 分节丝状菌(SFB)在正常鸡肠道内的动态变化第76页
 2 分节丝状菌(SFB)与鸡肠道黏膜免疫系统成熟的关系第76-77页
 3 分节丝状菌(SFB)的体外试培养第77-78页
 4 前景展望第78-80页
参考文献第80-88页
附录一:DGGE相关试剂的配制第88-91页
附录二:细菌、SFB、德氏乳酸杆菌的FISH图第91-94页
附录三:各种发酵系统模型第94-96页
致谢第96-97页
攻读硕士学位期间发表的论文目录第97-98页

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