摘要 | 第5-8页 |
abstract | 第8-11页 |
第1章 绪论 | 第17-35页 |
1.1 飞龙掌血的研究资料概述 | 第17-23页 |
1.1.1 飞龙掌血的化学成分研究 | 第17-20页 |
1.1.1.1 香豆素类化合物 | 第17-19页 |
1.1.1.2 生物碱类化合物 | 第19-20页 |
1.1.1.3 萜类化合物 | 第20页 |
1.1.1.4 挥发油类 | 第20页 |
1.1.1.5 其它类化合物 | 第20页 |
1.1.2 飞龙掌血的药理作用研究 | 第20-23页 |
1.1.2.1 抑制人癌细胞增殖作用 | 第20-21页 |
1.1.2.2 抑菌作用 | 第21-22页 |
1.1.2.3 抗氧化活性 | 第22页 |
1.1.2.4 抗疟疾活性 | 第22-23页 |
1.1.2.5 抗炎镇痛作用 | 第23页 |
1.1.2.6 其他作用 | 第23页 |
1.2 天然产物用于结肠癌治疗研究概况 | 第23-32页 |
1.2.1 结肠癌:病理学、危险因素和遗传学 | 第24-25页 |
1.2.2 结肠癌化学预防:生物终点及相关机制 | 第25-26页 |
1.2.3 结肠癌化学预防:影响细胞增殖与凋亡 | 第26-27页 |
1.2.4 结肠癌化学预防:影响血管再生 | 第27-28页 |
1.2.5 结肠癌化学预防:影响环氧合酶途径 | 第28-29页 |
1.2.6 结肠癌化学预防:对Wnt/β-连环蛋白通路的影响 | 第29页 |
1.2.7 结肠癌化学预防:对其它信号通路的影响 | 第29-30页 |
1.2.8 结肠癌化学预防:体外研究 | 第30-31页 |
1.2.9 结肠癌化学预防:体内研究 | 第31-32页 |
1.2.10 结肠癌化学预防:临床试验 | 第32页 |
1.3 本课题的目的和意义 | 第32-35页 |
第2章 飞龙掌血不同提取物体外抗肿瘤筛选 | 第35-45页 |
2.1 引言 | 第35页 |
2.2 材料与方法 | 第35-39页 |
2.2.1 药材 | 第35-36页 |
2.2.2 细胞株 | 第36页 |
2.2.3 主要试剂 | 第36页 |
2.2.4 主要仪器与耗材 | 第36页 |
2.2.5 飞龙掌血根各提取物的制备 | 第36-37页 |
2.2.6 体外细胞培养方法 | 第37-38页 |
2.2.6.1 细胞复苏 | 第37页 |
2.2.6.2 细胞培养 | 第37-38页 |
2.2.6.3 细胞冻存 | 第38页 |
2.2.7 SRB法检测不同提取物对癌细胞增殖的影响 | 第38-39页 |
2.2.7.1 原理 | 第38页 |
2.2.7.2 步骤 | 第38-39页 |
2.3 结果 | 第39-41页 |
2.3.1 飞龙掌血根各提物抑制不同组织来源癌细胞增殖的初步筛选评估 | 第39-40页 |
2.3.2 飞龙掌血根各提取物体抑制人结肠癌HT-29细胞增殖的评估 | 第40-41页 |
2.4 讨论 | 第41-43页 |
2.5 小结 | 第43-45页 |
第3章 飞龙掌血根二氯甲烷萃取物对HT-29细胞周期进程的影响 | 第45-57页 |
3.1 引言 | 第45页 |
3.2 材料与方法 | 第45-48页 |
3.2.1 药物 | 第45页 |
3.2.2 细胞株 | 第45页 |
3.2.3 主要试剂 | 第45页 |
3.2.4 主要仪器与耗材 | 第45-46页 |
3.2.5 细胞培养 | 第46页 |
3.2.6 细胞增殖检测 | 第46-47页 |
3.2.7 流式细胞术检测细胞周期 | 第47-48页 |
3.2.7.1 原理 | 第47页 |
3.2.7.2 步骤 | 第47-48页 |
3.3 统计学处理 | 第48页 |
3.4 结果 | 第48-53页 |
3.4.1 SRB法检测飞龙掌血根二氯甲烷萃取物作用不同剂量和时间与药效之间的关系 | 第48-49页 |
3.4.2 飞龙掌血根二氯甲烷萃取物对HT-29细胞周期的影响 | 第49-51页 |
3.4.3 飞龙掌血根二氯甲烷萃取物对其它结肠癌细胞细胞增殖和细胞周期的影响 | 第51-53页 |
3.5 讨论 | 第53-55页 |
3.6 小结 | 第55-57页 |
第4章 飞龙掌血根二氯甲烷萃取物诱导HT-29细胞凋亡及分子机制研究 | 第57-71页 |
4.1 引言 | 第57页 |
4.2 材料与方法 | 第57-62页 |
4.2.1 药物 | 第57页 |
4.2.2 细胞株 | 第57页 |
4.2.3 主要试剂 | 第57-58页 |
4.2.4 主要仪器与耗材 | 第58-59页 |
4.2.5 常用试剂配置 | 第59页 |
4.2.6 细胞培养 | 第59页 |
4.2.7 流式检测细胞凋亡 | 第59-60页 |
4.2.7.1 原理 | 第59-60页 |
4.2.7.2 步骤 | 第60页 |
4.2.8 Western Blotting 检测蛋白表达 | 第60-62页 |
4.2.8.1 原理 | 第60页 |
4.2.8.2 细胞总蛋白的提取 | 第60页 |
4.2.8.3 蛋白浓度测定 | 第60-61页 |
4.2.8.4 SDS-聚丙烯酞胺凝胶电泳 | 第61-62页 |
4.3 统计学处理 | 第62-63页 |
4.4 结果 | 第63-67页 |
4.4.1 飞龙掌血根二氯甲烷萃取物对HT-29细胞膜中磷脂酰丝氨酸位置的影响 | 第63-64页 |
4.4.2 飞龙掌血根二氯甲烷萃取物对其它结肠癌细胞细胞膜中磷脂酰丝氨酸位置的影响 | 第64-67页 |
4.4.3 飞龙掌血根二氯甲烷萃取物诱导 caspase 依赖性细胞凋亡 | 第67页 |
4.5 讨论 | 第67-70页 |
4.6 小结 | 第70-71页 |
第5章 活性氧在飞龙掌血根二氯甲烷萃取物诱导HT-29细胞凋亡和细胞周期阻滞过程中的作用 | 第71-83页 |
5.1 引言 | 第71页 |
5.2 材料与方法 | 第71-74页 |
5.2.1 药物 | 第71页 |
5.2.2 细胞株 | 第71页 |
5.2.3 主要试剂 | 第71-72页 |
5.2.4 主要仪器与耗材 | 第72页 |
5.2.5 细胞培养 | 第72页 |
5.2.6 流式细胞术检测细胞内的活性氧 | 第72-73页 |
5.2.6.1 原理 | 第72-73页 |
5.2.6.2 步骤 | 第73页 |
5.2.7 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第73页 |
5.2.8 流式细胞术检测细胞周期 | 第73-74页 |
5.3 统计学处理 | 第74页 |
5.4 结果 | 第74-79页 |
5.4.1 飞龙掌血根二氯甲烷萃取物诱导HT-29细胞内总的ROS含量升高 | 第74-75页 |
5.4.2 NAC降低飞龙掌血根二氯甲烷萃取物诱导HT-29细胞周期阻滞 | 第75-76页 |
5.4.3 NAC不能阻止飞龙掌血根二氯甲烷萃取物诱导HT-29细胞凋亡 | 第76-77页 |
5.4.4 过氧化氢是飞龙掌血根二氯甲烷萃取物诱导的主要发挥作用的活性氧 | 第77-79页 |
5.5 讨论 | 第79-81页 |
5.6 小结 | 第81-83页 |
第6章 结论与展望 | 第83-87页 |
6.1 主要结论 | 第83-84页 |
6.2 研究意义和创新点 | 第84页 |
6.3 展望 | 第84-87页 |
参考文献 | 第87-109页 |
致谢 | 第109-111页 |
作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第111页 |