| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-12页 |
| 图表目录 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述和研究背景 | 第13-24页 |
| 1 ABC转运蛋白的基本结构 | 第13-14页 |
| 2 病原真菌ABC转运蛋白在抗药性中的作用 | 第14-20页 |
| ·白假丝酵母(Candida albicans)中的ABC转运蛋白 | 第15-17页 |
| ·CDR1、CDR2基因功能 | 第15-16页 |
| ·CDR1、CDR2转录调控 | 第16-17页 |
| ·CDR1、CDR2转录调控因子 | 第17页 |
| ·灰霉菌(Botrytis cinerea)中ABC转运蛋白 | 第17-19页 |
| ·构巢曲霉菌(Aspergillus nidulans)中ABC转运蛋白 | 第19页 |
| ·叶枯菌(Mycosphaerella graminicola)中ABC转运蛋白 | 第19-20页 |
| ·稻瘟菌(Magnaporthe grisea)中ABC转运蛋白 | 第20页 |
| 3 病原真菌ABC转运蛋白致病性研究 | 第20-22页 |
| ·灰霉菌(Botrytis cinerea)ABC转运蛋白与致病性的关系 | 第20页 |
| ·叶枯菌(Mycosphaerella graminicola)ABC转运蛋白与致病性的关系 | 第20-21页 |
| ·稻瘟菌(Magnaporthe grisea)ABC转运蛋白与致病性的关系 | 第21页 |
| ·黄色镰孢菌(Fusarium culmorum)ABC转运蛋白与致病性的关系 | 第21-22页 |
| 4 讨论 | 第22-23页 |
| 5 本研究的主要内容 | 第23-24页 |
| 第二章 赤霉病菌ABC转运蛋白功能研究 | 第24-64页 |
| 1 材料与方法 | 第24-46页 |
| ·供试菌株与质粒 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·引物设计与合成 | 第24页 |
| ·培养基配置 | 第24-25页 |
| ·缓冲液 | 第25-27页 |
| ·杂交液 | 第27-30页 |
| ·目的基因生物信息学分析 | 第30页 |
| ·基因敲除赤霉转化子的获得 | 第30-38页 |
| ·赤霉基因组总DNA提 | 第31-32页 |
| ·PCR及其产物纯化 | 第32-34页 |
| ·PCR产物与克隆载体的连接 | 第34页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第34-35页 |
| ·连接产物的转化 | 第35页 |
| ·质粒提 | 第35-36页 |
| ·酶切验证同源臂 | 第36页 |
| ·将待敲除基因上下游片段分别连接到PBlueScript-hph质粒多克隆位点潮霉素基因左右端 | 第36-37页 |
| ·将连有上下游及潮霉素基因的大片段转pCAMBIA 1300质粒 | 第37页 |
| ·将质粒电击转入农杆菌C_(58)C_1中 | 第37-38页 |
| ·农杆菌介导的真菌转化 | 第38页 |
| ·地高辛法Southern杂交 | 第38-42页 |
| ·赤霉病菌总RNA的提取 | 第42-43页 |
| ·Realtime PCR具体体系,操作过程 | 第43页 |
| ·禾谷镰孢菌原生质体转化 | 第43-45页 |
| ·赤霉生长速度 | 第45页 |
| ·药剂敏感性检测 | 第45页 |
| ·对金属离子抗性情况 | 第45-46页 |
| ·氧化压力检测 | 第46页 |
| ·渗透压力检测 | 第46页 |
| ·致病性检测 | 第46页 |
| 2 研究结果 | 第46-64页 |
| ·目的基因的生物学特征 | 第46-53页 |
| ·戊唑醇、扑海因对全转运子的ABC基因表达的影响 | 第53-54页 |
| ·目的基因敲除转化子的构建及验证 | 第54-55页 |
| ·ABC基因对生长速率的影响 | 第55-56页 |
| ·ABC基因突变体对药物敏感性分析 | 第56-59页 |
| ·ABC基因突变体对金属离子影响情况分析 | 第59页 |
| ·ABC基因突变体对抗氧化压力分析 | 第59-61页 |
| ·ABC基因突变体渗透压力分析 | 第61页 |
| ·ABC基因突变体对致病性影响 | 第61-63页 |
| ·077基因对菌株产孢量的影响 | 第63-64页 |
| 第三章 讨论 | 第64-65页 |
| 第四章 全文总结 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-79页 |
| 附录 | 第79-80页 |
| 个人简历 | 第80页 |
| 发表论文 | 第80页 |
