| 中文摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-23页 |
| 1.1 Necroptosis | 第15-20页 |
| 1.1.1 Necroptosis的机制 | 第15-16页 |
| 1.1.2 Necroptosis关键分子 | 第16-18页 |
| 1.1.3 RIPK3的甲基化现象 | 第18-19页 |
| 1.1.4 Necroptosis与ROS | 第19-20页 |
| 1.2 结直肠癌发病率与谷物消费量 | 第20-21页 |
| 1.3 过氧化物酶 | 第21页 |
| 1.4 研究的目的与意义 | 第21-23页 |
| 第二章 PmPOD的提取纯化及性能鉴定 | 第23-31页 |
| 2.1 引言 | 第23页 |
| 2.2 试剂及仪器 | 第23页 |
| 2.3 方法 | 第23-25页 |
| 2.3.1 PmPOD的提取与纯化 | 第23-24页 |
| 2.3.2 SDS-PAGE分析 | 第24页 |
| 2.3.3 质谱鉴定 | 第24页 |
| 2.3.4 紫外扫描及热稳定性检测 | 第24-25页 |
| 2.3.5 蛋白浓度测定 | 第25页 |
| 2.4 结果 | 第25-29页 |
| 2.4.1 PmPOD分离纯化及分子量鉴定 | 第25-27页 |
| 2.4.2 PmPOD热稳定性 | 第27-28页 |
| 2.4.3 PmPOD性质鉴定 | 第28页 |
| 2.4.4 PmPOD质谱鉴定 | 第28-29页 |
| 2.5 讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 PmPOD诱导细胞死亡方式及关键分子检测 | 第31-49页 |
| 3.1 引言 | 第31页 |
| 3.2 试剂及仪器 | 第31-32页 |
| 3.3 方法 | 第32-37页 |
| 3.3.1 细胞活力检测 | 第32-33页 |
| 3.3.2 Hoechst33342和PI染色 | 第33页 |
| 3.3.3 pCMV-RIPK3-GFP和pCMV-MLKL-DsRed2质粒转染 | 第33-34页 |
| 3.3.4 WesternBlot检测 | 第34-35页 |
| 3.3.5 qRT-PCR检测 | 第35-36页 |
| 3.3.6 TNF-α的含量测定 | 第36页 |
| 3.3.7 甲基化特异性的PCR检测 | 第36页 |
| 3.3.8 siRIPK1和siRIPK3干扰 | 第36-37页 |
| 3.4 结果 | 第37-46页 |
| 3.4.1 PmPOD敏感株的筛选 | 第37-38页 |
| 3.4.2 PmPOD诱导结直肠癌细胞死亡方式的确定 | 第38-39页 |
| 3.4.3 Hoechst33342和PI双染验证 | 第39-40页 |
| 3.4.4 PmPOD对RIPK3和MLKL的影响 | 第40-41页 |
| 3.4.5 siRIPK1和siRIPK3对细胞活力的影响 | 第41-42页 |
| 3.4.6 Necroptosis发生时标志蛋白的变化 | 第42-43页 |
| 3.4.7 PmPOD诱导TNF-α的自分泌 | 第43-44页 |
| 3.4.8 RIPK3在HCT116细胞中表达 | 第44-45页 |
| 3.4.9 去甲基化试剂5-AD对RIPK3表达的影响 | 第45-46页 |
| 3.4.10 过表达的RIPK3对细胞死亡的影响 | 第46页 |
| 3.5 讨论 | 第46-49页 |
| 第四章 PmPOD诱导细胞ROS升高 | 第49-61页 |
| 4.1 引言 | 第49页 |
| 4.2 试剂及仪器 | 第49页 |
| 4.3 方法 | 第49-51页 |
| 4.3.1 活性氧检测 | 第49-50页 |
| 4.3.2 丙二醛含量的检测 | 第50页 |
| 4.3.3 超氧化物歧化酶的检测 | 第50-51页 |
| 4.3.4 GSH和GSSG的检测 | 第51页 |
| 4.4 结果 | 第51-58页 |
| 4.4.1 PmPOD诱导HCT116和HT29活性氧升高 | 第51-52页 |
| 4.4.2 抗氧化剂对PmPOD诱导细胞死亡的影响 | 第52-53页 |
| 4.4.3 PmPOD诱导HCT116与HT29细胞氧化损伤 | 第53-55页 |
| 4.4.4 RIPK1和RIPK3调控PmPOD诱导的氧化水平 | 第55-57页 |
| 4.4.5 siRIPK1和siRIPK3对ROS的影响 | 第57-58页 |
| 4.5 讨论 | 第58-61页 |
| 小结与展望 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 个人简况及联系方式 | 第71-74页 |
