| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 目录 | 第10-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-24页 |
| ·Parvovirus、BmDNV、HBoV的介绍 | 第12-15页 |
| ·细小病毒(Parvovirus)简介 | 第12-13页 |
| ·家蚕浓核病毒(BmDNV)简介 | 第13-14页 |
| ·HBoV病毒简介 | 第14-15页 |
| ·纳米生物技术及病毒样颗粒 | 第15-18页 |
| ·纳米生物技术 | 第15-16页 |
| ·病毒样颗粒 | 第16-18页 |
| ·原核表达系统pET、pMAL | 第18-20页 |
| ·pET原核表达系统简介 | 第18-19页 |
| ·pMAL原核表达系统简介 | 第19-20页 |
| ·重组杆状病毒真核表达系统 | 第20-21页 |
| ·分子伴侣简介 | 第21-22页 |
| ·本文研究的目的和意义 | 第22-24页 |
| 第二章 材料与方法 | 第24-34页 |
| ·实验设备及仪器 | 第24页 |
| ·实验材料 | 第24-27页 |
| ·质粒、菌株及细胞 | 第24页 |
| ·试剂与药品 | 第24-25页 |
| ·细菌培养基的配制 | 第25页 |
| ·细胞培养基的配制 | 第25页 |
| ·缓冲液的配制 | 第25-26页 |
| ·纯化相关缓冲液 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-34页 |
| ·碱裂解法提取质粒 | 第27页 |
| ·PCR扩增egfp、vp4(BmDNV-1)、vp2(HBoV)基因 | 第27-29页 |
| ·PCR扩增产物及载体酶切回收与连接 | 第29页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第29-30页 |
| ·连接产物转化感受态细胞 | 第30页 |
| ·阳性克隆的筛选鉴定 | 第30页 |
| ·原核、真核表达系统的构建 | 第30-31页 |
| ·重组蛋白及荧光病毒样颗粒表达与检测 | 第31-32页 |
| ·原核表达重组蛋白及荧光病毒样颗粒的纯化 | 第32-33页 |
| ·纯化重组蛋白及荧光病毒样颗粒的Western Blot检测 | 第33-34页 |
| 第三章 实验结果及其分析 | 第34-48页 |
| ·EGFP-VP4荧光病毒样颗粒的构建及纯化 | 第34-40页 |
| ·egfp和vp4基因的扩增 | 第34页 |
| ·重组质粒pFastBac1-EGFP-VP4的构建及鉴定 | 第34-35页 |
| ·含egfp和vp4基因重组Bacmid的构建 | 第35-36页 |
| ·重组Bacmid转染Sf9细胞 | 第36页 |
| ·重组杆状病毒最佳感染比例的确定 | 第36-38页 |
| ·重组杆状病毒的电镜观察 | 第38-39页 |
| ·重组杆状病毒感染hi5细胞 | 第39页 |
| ·荧光病毒样颗粒的纯化及检测 | 第39-40页 |
| ·VP2蛋白的原核表达及纯化 | 第40-46页 |
| ·vp2基因PCR扩增 | 第40-41页 |
| ·原核表达载体pET-28a(+)-vp2和pMAL-c2x-vp2的构建 | 第41-42页 |
| ·融合蛋白6×His-VP2和MBP-VP2诱导条件的确定 | 第42-43页 |
| ·分子伴侣辅助下融合蛋白6×His-VP2的表达 | 第43-44页 |
| ·目的蛋白的纯化及结果分析 | 第44-46页 |
| ·实验结果分析 | 第46-48页 |
| ·荧光病毒样颗粒EGFP-VP4的构建 | 第46页 |
| ·HBoV VP2蛋白的原核表达 | 第46-48页 |
| 第四章 总结和展望 | 第48-50页 |
| ·总结 | 第48页 |
| ·展望 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 附录 | 第54-56页 |
| 硕士期间发表的文章 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
