| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 1 文献综述 | 第10-18页 |
| 1.1 核盘菌及其致病机理 | 第10-12页 |
| 1.1.1 核盘菌简介 | 第10页 |
| 1.1.2 作物菌核病的防治 | 第10-12页 |
| 1.2 病原菌与寄主植物的互作 | 第12-13页 |
| 1.3 激发子的分类及信号传导 | 第13-17页 |
| 1.3.1 激发子的分类 | 第13-14页 |
| 1.3.2 激发子的信号传导 | 第14-17页 |
| 1.4 蛋白激发子的研究进展 | 第17-18页 |
| 2 引言 | 第18-19页 |
| 3 材料与方法 | 第19-28页 |
| 3.1 供试材料 | 第19-20页 |
| 3.1.1 供试菌株 | 第19页 |
| 3.1.2 供试植物 | 第19页 |
| 3.1.3 酶、抗生素和化学试剂 | 第19页 |
| 3.1.4 供试载体 | 第19页 |
| 3.1.5 主要仪器设备 | 第19-20页 |
| 3.1.6 常用缓冲溶液和培养基 | 第20页 |
| 3.2 供试方法 | 第20-28页 |
| 3.2.1 核盘菌总DNA、RNA的提取及cDNA合成 | 第20-22页 |
| 3.2.2 感受态细胞制备、转化 | 第22页 |
| 3.2.3 SsSm1基因的克隆和测序 | 第22-23页 |
| 3.2.4 原核表达载体的构建 | 第23页 |
| 3.2.5 重組子SsSm1的原核表达及蛋白纯化 | 第23-25页 |
| 3.2.6 SsSm1诱导本氏烟叶片产生HR反应 | 第25页 |
| 3.2.7 SsSm1在烟草植株上的瞬时表达 | 第25页 |
| 3.2.8 SsSm1沉默载体构建和核盘菌原生质体转化 | 第25-26页 |
| 3.2.9 荧光定量PCR | 第26页 |
| 3.2.10 SsSm1沉默转化子表型鉴定 | 第26-27页 |
| 3.2.11 环境压力敏感性测定 | 第27页 |
| 3.2.12 SsSm1沉默转化子草酸含量测定 | 第27页 |
| 3.2.13 离体叶片致病力测定 | 第27-28页 |
| 4 结果与分析 | 第28-41页 |
| 4.1 SsSm1的生物信息学分析 | 第28-29页 |
| 4.2 SsSm1在核盘菌发育过程的表达模式分析 | 第29-30页 |
| 4.3 SsSm1的原核表达载体和瞬时表达载体构建 | 第30-31页 |
| 4.4 SsSm1原核表达及蛋白纯化 | 第31-33页 |
| 4.5 SsSm1诱导本氏烟的过敏性坏死反应 | 第33页 |
| 4.6 SsSm1沉默载体构建和转化子分析 | 第33-41页 |
| 4.6.1 载体构建和验证 | 第33-34页 |
| 4.6.2 SsSm1沉默转化子获得和筛选 | 第34-35页 |
| 4.6.3 SsSm1沉默后影响核盘菌菌丝生长 | 第35-36页 |
| 4.6.4 SsSm1影响侵染垫形成和菌核发育 | 第36-37页 |
| 4.6.5 SsSm1沉默转化子对化学胁迫因子敏感性观察 | 第37-39页 |
| 4.6.6 SsSm1沉默转化子致病力检测 | 第39-40页 |
| 4.6.7 SsSm1沉默转化菌株草酸产生量检测 | 第40-41页 |
| 5 讨论与结论 | 第41-44页 |
| 5.1 讨论 | 第41-43页 |
| 5.2 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-52页 |
| 附录A 酶、抗生素和化学试剂 | 第52-53页 |
| 附录B 仪器设备 | 第53-54页 |
| 附录C 常用缓冲溶液和培养基 | 第54-55页 |
| 作者简介 | 第55页 |
