| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 1 绪论 | 第11-19页 |
| 1.1 植物RNA提取技术与方法研究进展 | 第11-13页 |
| 1.1.1 异硫氰酸胍法 | 第11-12页 |
| 1.1.2 SDS结合Trizol法 | 第12页 |
| 1.1.3 CTAB法 | 第12页 |
| 1.1.4 RNA提取试剂盒法 | 第12-13页 |
| 1.1.5 固相基因提取技术 | 第13页 |
| 1.2 花色苷合成相关基因研究进展 | 第13-17页 |
| 1.2.1 类黄酮3-O-葡萄糖基转移酶(flavonoid 3-O-glucosyltransferase, 3GT)基因 | 第16页 |
| 1.2.2 花色苷合成酶(anthocyanin-synthases,ANS)基因 | 第16页 |
| 1.2.3 二氢黄酮醇还原酶(dihydroflavonol 4-reductase DFR)基因 | 第16-17页 |
| 1.3 溪荪鸢尾研究进展 | 第17-18页 |
| 1.3.1 溪荪种子生物学及形态学方面的研究进展 | 第17页 |
| 1.3.2 溪荪在抗逆性方面的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.3.3 溪荪开花生物学及花色遗传变异机理等方面的研究进展 | 第18页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第18-19页 |
| 2 固相基因提取技术优化 | 第19-30页 |
| 2.1 SPGE技术提取溪荪RNA | 第19-22页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第19页 |
| 2.1.2 固相基因提取技术流程 | 第19-20页 |
| 2.1.3 溪荪RNA提取 | 第20-21页 |
| 2.1.4 反转录cDNA第一条链的合成 | 第21页 |
| 2.1.5 PCR扩增检测 | 第21-22页 |
| 2.2 固相基因提取条件优化 | 第22-24页 |
| 2.2.1 不同规格探针对RNA提取质量的影响 | 第22-23页 |
| 2.2.2 探针预处理过程中不同孵化培养时间对RNA提取质量的影响 | 第23页 |
| 2.2.3 探针包埋过程中不同包埋时间对RNA提取质量的影响 | 第23页 |
| 2.2.4 探针包埋过程中不同浓度oligo dt25对RNA提取质量的影响 | 第23页 |
| 2.2.5 贮存条件及时间优化 | 第23页 |
| 2.2.6 小设备研发 | 第23-24页 |
| 2.3 结果与分析 | 第24-28页 |
| 2.3.1 RNA提取质量检测 | 第24页 |
| 2.3.2 不同规格探针对RNA提取质量的影响 | 第24-25页 |
| 2.3.3 探针预处理过程中不同孵化培养时间对RNA提取质量的影响 | 第25-26页 |
| 2.3.4 探针包埋过程中不同包埋时间对RNA提取质量的影响 | 第26页 |
| 2.3.5 探针包埋过程中不同浓度oligo dt25对RNA提取质量的影响 | 第26-27页 |
| 2.3.6 贮存条件及时间优化 | 第27页 |
| 2.3.7 小设备研发 | 第27-28页 |
| 2.4 本章小结 | 第28-30页 |
| 3 NSPGE技术在溪荪ANS、DFR与3GT时空定量分析中的应用 | 第30-62页 |
| 3.1 试验材料 | 第30页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第30页 |
| 3.1.2 菌株和质粒 | 第30页 |
| 3.2 试验方法 | 第30-36页 |
| 3.2.1 溪荪花瓣及叶片RNA提取 | 第30-31页 |
| 3.2.2 RNA质量检测 | 第31页 |
| 3.2.3 反转录cDNA第一条链的合成 | 第31页 |
| 3.2.4 目的基因扩增 | 第31-34页 |
| 3.2.5 基因序列的生物信息学分析 | 第34页 |
| 3.2.6 基因表达量的测定 | 第34-36页 |
| 3.3 结果与分析 | 第36-61页 |
| 3.3.1 IsANS1、IsDFR1、Is3GT1基因克隆 | 第36-39页 |
| 3.3.2 IsANS1、IsDFR1及Is3GT1基因序列分析 | 第39-54页 |
| 3.3.3 基因的组织表达特性分析 | 第54-61页 |
| 3.4 本章小结 | 第61-62页 |
| 4 讨论 | 第62-66页 |
| 4.1 传统RNA提取方法与SPGE技术比较分析及发展趋势 | 第62-63页 |
| 4.2 IsDFR1基因序列及表达特性分析 | 第63-64页 |
| 4.3 IsANS1基因序列及表达特性分析 | 第64页 |
| 4.4 Is3GT1基因序列及表达特性分析 | 第64-66页 |
| 5 结论与建议 | 第66-69页 |
| 5.1 结论 | 第66-67页 |
| 5.2 建议 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 附录 | 第74-78页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
