| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第1章 前言 | 第10-17页 |
| 1.1 重金属污染 | 第10页 |
| 1.2 生物吸附法 | 第10-11页 |
| 1.2.1 植物原位修复 | 第10-11页 |
| 1.2.2 微生物修复 | 第11页 |
| 1.3 微生物对重金属吸附的机制 | 第11-13页 |
| 1.4 基因工程菌吸附重金属研究 | 第13-15页 |
| 1.4.1 基因工程菌对重金属的吸附 | 第13-14页 |
| 1.4.2 半胱氨酸合成途径和磷酸戊糖途径响应重金属吸附研究 | 第14-15页 |
| 1.5 技术路线 | 第15-16页 |
| 1.6 论文的目的和意义 | 第16-17页 |
| 第2章 沼泽红假单胞菌CYS基因和G6PD基因克隆 | 第17-33页 |
| 2.1 试剂与仪器 | 第17-19页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第17-18页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第18页 |
| 2.1.3 培养基配方 | 第18-19页 |
| 2.2 方法 | 第19-23页 |
| 2.2.1 沼泽红假单胞菌总DNA提取 | 第19-20页 |
| 2.2.2 沼泽红假单胞菌cys基因和g6pd基因的克隆 | 第20-23页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第23-33页 |
| 2.3.1 沼泽红假单胞菌活化培养与总DNA提取 | 第23-24页 |
| 2.3.2 cys基因和g6pd基因的克隆 | 第24页 |
| 2.3.3 含cys基因和g6pd基因的大肠杆菌的筛选 | 第24-25页 |
| 2.3.4 cys基因和g6pd基因测序结果和分析 | 第25-31页 |
| 2.3.5 小结与讨论 | 第31-33页 |
| 第3章 含CYS基因和G6PD基因的重组大肠杆菌构建和筛选 | 第33-45页 |
| 3.1 试剂与仪器 | 第33-35页 |
| 3.1.1 试剂与菌种 | 第33-34页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第34-35页 |
| 3.1.3 培养基及其他试剂配制 | 第35页 |
| 3.2 实验方法 | 第35-41页 |
| 3.2.1 耐受增强质粒pETD-GC的构建 | 第35-40页 |
| 3.2.2 重组耐受大肠杆菌的筛选 | 第40-41页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第41-44页 |
| 3.3.1 含酶切位点的cys基因和g6pd基因的克隆 | 第41-42页 |
| 3.3.2 cys基因和g6pd基因的双酶切反应 | 第42页 |
| 3.3.3 pETD-GC载体构建 | 第42-44页 |
| 3.3.4 pETD-GC测序结果 | 第44页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第44-45页 |
| 第4章 含CYS和G6PD基因的重组大肠杆菌表达及其钴吸附研究 | 第45-57页 |
| 4.1 试剂与仪器 | 第45-46页 |
| 4.1.1 试剂与菌种 | 第45-46页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第46页 |
| 4.2 溶液配制 | 第46-47页 |
| 4.2.1 培养基 | 第46页 |
| 4.2.2 SDS-PAGE相关试剂 | 第46-47页 |
| 4.2.3 PBS缓冲液配方 | 第47页 |
| 4.3 实验方法 | 第47-49页 |
| 4.3.1 G6PD和CYS蛋白的表达 | 第47-48页 |
| 4.3.2 钴耐受重组大肠杆菌吸附钴的条件优化 | 第48-49页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第49-57页 |
| 4.4.1 G6PD和CYS蛋白的表达 | 第49-50页 |
| 4.4.2 钴耐受重组大肠杆菌吸附钴的条件优化 | 第50-55页 |
| 4.4.3 小结与讨论 | 第55-57页 |
| 结论 | 第57-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 在读期间发表的学术论文与研究成果 | 第66-67页 |
| 附录 | 第67-70页 |
