| 摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 缩略语中英文对照 | 第14-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-39页 |
| 1 细胞凋亡研究进展 | 第17-26页 |
| 1.1 细胞凋亡概述 | 第17页 |
| 1.2 细胞凋亡信号转导途径 | 第17-20页 |
| 1.2.1 细胞表面死亡受体途径 | 第17-18页 |
| 1.2.2 线粒体途径 | 第18-19页 |
| 1.2.3 内质网途径 | 第19-20页 |
| 1.3 Caspase结构与分类 | 第20-21页 |
| 1.4 线粒体途径研究进展 | 第21-25页 |
| 1.4.1 细胞色素c研究进展 | 第21-22页 |
| 1.4.2 Apaf-1研究进展 | 第22页 |
| 1.4.3 Caspase研究进展 | 第22-24页 |
| 1.4.4 凋亡体的形成及调控 | 第24-25页 |
| 1.5 温度对细胞凋亡的影响 | 第25-26页 |
| 2 热休克蛋白(Hsp)研究进展 | 第26-31页 |
| 2.1 Hsp的分类 | 第26页 |
| 2.2 Hsps的生物学特征 | 第26-28页 |
| 2.3 Hsps表达调控 | 第28-29页 |
| 2.4 昆虫Hsps研究进展 | 第29-31页 |
| 3 Hsps与细胞凋亡的关系 | 第31-33页 |
| 3.1 Hsps与依赖于Caspase的细胞凋亡 | 第31-32页 |
| 3.2 Hsps与不依赖于Caspase的细胞凋亡 | 第32-33页 |
| 3.3 细胞凋亡对Hsps合成的影响 | 第33页 |
| 4 昆虫抗药性研究进展 | 第33-38页 |
| 4.1 昆虫乙酰胆碱酯酶的研究 | 第34-36页 |
| 4.1.1 昆虫AChE基因的结构与类型 | 第34-35页 |
| 4.1.2 AChE基因突变与昆虫抗药性 | 第35-36页 |
| 4.2 乙酰胆碱酯酶基因突变检测技术 | 第36-37页 |
| 4.3 温度对昆虫抗药性的影响 | 第37-38页 |
| 5 研究的目的意义 | 第38-39页 |
| 第二章 小菜蛾线粒体凋亡路径基因克隆及热激表达研究 | 第39-93页 |
| 1 材料与方法 | 第39-55页 |
| 1.1 仪器与试剂 | 第39-41页 |
| 1.1.1 主要仪器设备 | 第39-40页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第40页 |
| 1.1.3 药品配置 | 第40-41页 |
| 1.2 小菜蛾cytochrome c,Apaf-1和caspase-9基因克隆 | 第41-51页 |
| 1.2.1 供试昆虫 | 第41-42页 |
| 1.2.2 cytochrome c,Apaf-1和caspase-9中间片段克隆 | 第42-48页 |
| 1.2.2.1 引物设计 | 第42-44页 |
| 1.2.2.2 小菜蛾总RNA的提取 | 第44页 |
| 1.2.2.3 合成cDNA第一链 | 第44-45页 |
| 1.2.2.4 PCR体系及程序 | 第45-46页 |
| 1.2.2.5 PCR产物纯化 | 第46页 |
| 1.2.2.6 大肠杆菌感受态制备 | 第46-47页 |
| 1.2.2.7 克隆片段的连接 | 第47页 |
| 1.2.2.8 转化、筛选及测序 | 第47页 |
| 1.2.2.9 序列分析 | 第47-48页 |
| 1.2.3 cytochrome c,Apaf-1和caspase-9 3'和5'RACE | 第48-50页 |
| 1.2.3.1 设计RACE引物 | 第48页 |
| 1.2.3.2 3'和5'RACE-Ready cDNA第一链合成 | 第48-49页 |
| 1.2.3.3 巢式PCR体系及程序 | 第49-50页 |
| 1.2.4 cytochrome c,Apaf-1和caspase-9 ORF扩增 | 第50-51页 |
| 1.2.5 cytochrome c,Apaf-1相caspase-9序列分析 | 第51页 |
| 1.3 线粒体凋亡路径基因热激表达研究 | 第51-54页 |
| 1.3.1 供试昆虫 | 第51-52页 |
| 1.3.2 温度处理 | 第52页 |
| 1.3.3 荧光定量引物设计 | 第52-53页 |
| 1.3.4 小菜蛾总RNA的提取 | 第53页 |
| 1.3.5 合成cDNA第一链 | 第53页 |
| 1.3.6 制作标准曲线 | 第53-54页 |
| 1.3.7 目的基因mRNA表达量测定 | 第54页 |
| 1.3.8 数据分析 | 第54页 |
| 1.4 细胞凋亡的检测 | 第54-55页 |
| 1.4.1 供试昆虫 | 第54页 |
| 1.4.2 温度处理 | 第54页 |
| 1.4.3 基因组DNA提取 | 第54-55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-87页 |
| 2.1 小菜蛾cytochrome c,Apaf-1和caspase-9基因克隆以及序列分析 | 第55-76页 |
| 2.1.1 cytochrome c,Apaf-1和caspase-9中间片段克隆 | 第55-57页 |
| 2.1.2 cytochrome c,Apaf-1和caspase-9 3'和5'RACE | 第57-60页 |
| 2.1.2.1 cytochrome c和Apaf-13'RACE | 第57-58页 |
| 2.1.2.2 cytochrome c,Apaf1和pase-95'RACE | 第58-60页 |
| 2.1.3 cytochrome c,Apaf1和caspase-9 ORF克隆 | 第60-61页 |
| 2.1.4 cytochrome c,Apaf1和caspase-9基因序列分析 | 第61-76页 |
| 2.2 线粒体凋亡路径基因热激后mRNA表达 | 第76-86页 |
| 2.2.1 制作标准曲线 | 第76-77页 |
| 2.2.2 高温对抗性、敏感小菜蛾线粒体凋亡路径基因mRNA表达的影响 | 第77-86页 |
| 2.2.2.1 抗性、敏感小菜蛾幼虫线粒体凋亡路径基因mRNA表达量差异测定 | 第79-80页 |
| 2.2.2.2 抗性、敏感小菜蛾蛹线粒体凋亡路径基因mRNA表达量差异测定 | 第80-81页 |
| 2.2.2.3 抗性、敏感小菜蛾成虫线粒体凋亡路径基因mRNA表达量差异测定 | 第81-86页 |
| 2.3 细胞凋亡检测 | 第86-87页 |
| 3 讨论 | 第87-91页 |
| 3.1 线粒体凋亡路径基因克隆 | 第87-89页 |
| 3.2 高温对线粒体凋亡路径基因mRNA表达以及细胞凋亡的影响 | 第89-91页 |
| 4 小结 | 第91-93页 |
| 第三章 小菜蛾hsp 70s基因克隆及热激表达研究 | 第93-130页 |
| 实验室前人工作 | 第93页 |
| 本章将要进行的工作 | 第93-94页 |
| 1 材料与方法 | 第94-99页 |
| 1.1 仪器与试剂 | 第94页 |
| 1.2 小菜蛾hsp 70s基因克隆 | 第94-97页 |
| 1.2.1 供试昆虫 | 第94页 |
| 1.2.2 温度处理 | 第94页 |
| 1.2.3 小菜蛾hsp 70s基因3'RACE | 第94-96页 |
| 1.2.3.1 设计3'RACE引物 | 第94-95页 |
| 1.2.3.2 小菜蛾总RNA的提取 | 第95页 |
| 1.2.3.3 3'RACE-Ready cDNA第一链合成 | 第95页 |
| 1.2.3.4 巢式PCR体系及程序 | 第95-96页 |
| 1.2.4 小菜蛾hsp 70s基因ORF扩增 | 第96-97页 |
| 1.2.5 小菜蛾hsp 70s基因序列分析 | 第97页 |
| 1.3 Hsp家族基因热激表达研究 | 第97-99页 |
| 1.3.1 荧光定量材料 | 第97页 |
| 1.3.2 荧光定量引物设计 | 第97-98页 |
| 1.3.3 Hsp家族基因mRNA表达量测定 | 第98页 |
| 1.3.4 数据分析 | 第98-99页 |
| 2 结果与分析 | 第99-126页 |
| 2.1 小菜蛾hsp 70s基因克隆以及序列分析 | 第99-110页 |
| 2.1.1 小菜蛾hsp70基因3'RACE | 第99页 |
| 2.1.2 小菜蛾hsp 70s基因ORF克隆 | 第99-101页 |
| 2.1.3 小菜蛾hsp 70s基因序列分析 | 第101-110页 |
| 2.2 Hsp家族基因热激后mRNA表达 | 第110-126页 |
| 2.2.1 制作标准曲线 | 第110-112页 |
| 2.2.2 高温对抗性、敏感小菜蛾Hsp家族基因mRNA表达的影响 | 第112-126页 |
| 2.2.2.1 抗性、敏感小菜蛾幼虫Hsp家族基因mRNA表达量差异测定 | 第112-113页 |
| 2.2.2.2 抗性、敏感小菜蛾蛹Hsp家族基因mRNA表达量差异测定 | 第113-117页 |
| 2.2.2.3 抗性、敏感小菜蛾成虫Hsp家族基因mRNA表达量差异测定 | 第117-126页 |
| 3 讨论 | 第126-129页 |
| 3.1 小菜蛾hsp 70s基因克隆 | 第127-128页 |
| 3.2 高温对Hsp家族基因mRNA表达的影响 | 第128-129页 |
| 4 小结 | 第129-130页 |
| 第四章 温度对抗性和敏感小菜蛾ac1基因型频率及胁迫基因表达的影响 | 第130-143页 |
| 1 材料与方法 | 第130-134页 |
| 1.1 仪器与试剂 | 第130-131页 |
| 1.1.1 主要仪器设备 | 第130页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第130-131页 |
| 1.1.3 药品配置 | 第131页 |
| 1.2 小菜蛾ace1 Gly227Ala突变位点基因型频率检测 | 第131-133页 |
| 1.2.1 供试昆虫 | 第131页 |
| 1.2.2 温度处理 | 第131-132页 |
| 1.2.3 引物设计 | 第132页 |
| 1.2.4 小菜蛾DNA提取 | 第132-133页 |
| 1.2.5 PCR反应体系与程序 | 第133页 |
| 1.3 小菜蛾胁迫基因热激表达研究 | 第133-134页 |
| 1.3.1 供试昆虫 | 第133页 |
| 1.3.2 温度处理 | 第133-134页 |
| 1.3.3 小菜蛾总RNA的提取 | 第134页 |
| 1.3.4 合成cDNA第一链 | 第134页 |
| 1.3.5 胁迫基因mRNA表达量测定 | 第134页 |
| 1.3.6 数据分析 | 第134页 |
| 2 结果与分析 | 第134-141页 |
| 2.1 温度对抗性、敏感小菜蛾ace1 Gly227Ala突变位点基因型频率的影响 | 第134-139页 |
| 2.1.1 高温对抗性小菜蛾ace1 Gly227Ala突变位点基因型频率的影响 | 第135-137页 |
| 2.1.2 高温对敏感小菜蛾ace1 Gly227Ala突变位点基因型频率的影响 | 第137-138页 |
| 2.1.3 田间抗性小菜蛾ace1 Gly227Ala突变位点基因型频率的季节性变化 | 第138-139页 |
| 2.2 高温对抗性、敏感小菜蛾胁迫基因mRNA表达的影响 | 第139-141页 |
| 3 讨论 | 第141-142页 |
| 4 小结 | 第142-143页 |
| 第五章 总结与展望 | 第143-145页 |
| REFERENCES | 第145-163页 |
| 硕博期间发表的文章 | 第163-164页 |
| 致谢 | 第164页 |
