中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
英文缩略词表 | 第9-11页 |
研究流程图 | 第11-12页 |
引言 | 第12-15页 |
第一部分:bufadienolides作用于宫颈癌细胞有效性研究 | 第15-43页 |
材料和方法 | 第15-26页 |
1.材料 | 第15-18页 |
1.1 实验细胞株 | 第15页 |
1.2 实验药品 | 第15页 |
1.3 实验材料 | 第15-16页 |
1.4 实验试剂 | 第16-17页 |
1.5 抗体 | 第17页 |
1.6 实验仪器 | 第17-18页 |
2.方法 | 第18-26页 |
2.1 细胞培养 | 第18-20页 |
2.2 显微镜观察细胞形态 | 第20页 |
2.3 细胞死亡率的测定—CCK-8检测宫颈癌细胞的增殖 | 第20-21页 |
2.4 流式细胞仪检测细胞周期(Flowcy tometric cell cycle) | 第21页 |
2.5 流式细胞仪检测细胞凋亡(Flowcy tometric apoptosis analysis) | 第21-22页 |
2.6 免疫蛋白印迹技术(Western Blot,WB) | 第22-26页 |
2.7 统计学方法 | 第26页 |
实验结果 | 第26-36页 |
1.CCK-8实验检测蟾酥内酯使HeLa和SiHa细胞生长抑制率增加 | 第26-28页 |
2.流式细胞术检测不同浓度蟾酥内酯诱导的宫颈癌细胞周期阻滞 | 第28-29页 |
3.流式细胞术检测不同浓度蟾酥内酯诱导的宫颈癌细胞凋亡 | 第29-31页 |
4.Western Blot检测蟾酥内酯诱导HeLa和SiHa细胞内凋亡信号通路活化以及细胞周期信号情况 | 第31-34页 |
5.Western Blot检测蟾酥内酯诱导HeLa和SiHa细胞内自噬信号通路 | 第34-36页 |
小结 | 第36-37页 |
讨论 | 第37-43页 |
第二部分:蟾酥内酯通过抑制AKT信号通路阻滞细胞周期,诱导凋亡和增加自噬 | 第43-60页 |
材料和方法 | 第43-52页 |
1.实验材料 | 第43-47页 |
1.1 实验细胞株 | 第43页 |
1.2 实验药品 | 第43-44页 |
1.3 实验材料 | 第44页 |
1.4 实验试剂 | 第44-45页 |
1.5 抗体 | 第45-46页 |
1.6 实验仪器 | 第46-47页 |
2.实验方法 | 第47-52页 |
2.1 细胞培养 | 第47-48页 |
2.2 显微镜观察细胞形态 | 第48-49页 |
2.3 免疫蛋白印迹技术(WesternBlot,WB) | 第49-52页 |
2.4 统计学方法 | 第52页 |
实验结果 | 第52-55页 |
1.蟾酥内酯对宫颈癌细胞的杀伤作用与AKT信号通路抑制相关 | 第52-55页 |
1.1 通过Westernblot检测蟾酥内酯作用后宫颈癌细胞中p-AKT,AKT,mTOR,p-GSK-3β,p-P70S6K和P70S6K表达情况 | 第52-55页 |
小结 | 第55页 |
讨论 | 第55-60页 |
结论 | 第60-62页 |
致谢 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-70页 |
附件1 文献综述 | 第70-76页 |
参考文献 | 第74-76页 |
附件2 硕士研究生在读期间论文发表情况 | 第76-77页 |