| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 主要缩略词中英文索引 | 第8-12页 |
| 引言 | 第12-16页 |
| 第一章: 实验材料 | 第16-19页 |
| 1.1 实验细胞 | 第16页 |
| 1.2 实验药品和主要试剂 | 第16-17页 |
| 1.3 实验主要仪器设备 | 第17-19页 |
| 第二章: 实验方法 | 第19-29页 |
| 2.1 实验分组 | 第19页 |
| 2.2 实验药物配制 | 第19页 |
| 2.3 细胞培养 | 第19-21页 |
| 2.3.1 细胞复苏 | 第19-20页 |
| 2.3.2 细胞换液 | 第20页 |
| 2.3.3 细胞传代 | 第20页 |
| 2.3.4 细胞冻存 | 第20-21页 |
| 2.4 CCK-8法检测 | 第21页 |
| 2.4.1 细胞种板 | 第21页 |
| 2.4.2 药物的加入和检测 | 第21页 |
| 2.5 剪切应力加载实验 | 第21-23页 |
| 2.5.1 载玻片预处理 | 第21-22页 |
| 2.5.2 细胞接种 | 第22页 |
| 2.5.3 CN预处理 | 第22页 |
| 2.5.4 剪切应力加载 | 第22-23页 |
| 2.6 Hoechst33258荧光染色 | 第23页 |
| 2.7 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第23页 |
| 2.8 Western blot蛋白质印迹法 | 第23-25页 |
| 2.8.1 贴壁细胞蛋白质提取 | 第23-24页 |
| 2.8.2 SDS-PAGE凝胶配制 | 第24页 |
| 2.8.3 制胶 | 第24页 |
| 2.8.4 电泳 | 第24-25页 |
| 2.8.5 转膜 | 第25页 |
| 2.8.6 封闭 | 第25页 |
| 2.8.7 抗体孵育 | 第25页 |
| 2.8.8 ECL化学发光检测 | 第25页 |
| 2.9 实时荧光定量PCR法 | 第25-27页 |
| 2.9.1 RNA提取 | 第25-26页 |
| 2.9.2 RNA质量检测 | 第26页 |
| 2.9.3 miRNA逆转录 | 第26页 |
| 2.9.4 实时荧光定量PCR | 第26-27页 |
| 2.9.5 结果分析 | 第27页 |
| 2.10 miR-224-5p mimic转染 | 第27页 |
| 2.11 PCSK9siRNA转染 | 第27-28页 |
| 2.12 统计学方法 | 第28-29页 |
| 第三章: 实验结果 | 第29-37页 |
| 3.1 CN处理HUVECs24h对HUVECs细胞活性的影响 | 第29-30页 |
| 3.2 CN对LSS诱导HUVECs凋亡的抑制作用 | 第30-32页 |
| 3.2.1 Hoechst33258染色观察不同浓度CN对LSS诱导HUVECs凋亡的影响 | 第30页 |
| 3.2.2 流式细胞术检测CN对LSS诱导HUVECs凋亡的影响 | 第30-32页 |
| 3.3 不同浓度CN对LSS诱导的HUVECs中miR-224表达的影响 | 第32页 |
| 3.4 不同浓度CN对LSS诱导的HUVECs中PCSK9蛋白表达的影响 | 第32-33页 |
| 3.5 miR-224-5p对LSS诱导的HUVECs中PCSK9蛋白表达的影响 | 第33-34页 |
| 3.6 PCSK9siRNA对LSS诱导的HUVECs中Bcl-2、Bax、Caspase3蛋白表达的影响 | 第34-37页 |
| 3.6.1 PCSK9siRNA转染浓度的确立 | 第34-35页 |
| 3.6.2 PCSK9siRNA对LSS诱导的HUVECs中Bcl-2、Bax、Caspase3蛋白表达的影响 | 第35-37页 |
| 第四章: 讨论 | 第37-42页 |
| 第五章: 结论 | 第42-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-51页 |
| 附录A | 第51-53页 |
| A1.不同物种间miR-224序列保守性分析 | 第51页 |
| A2.miR-224与PCSK9 mRNA 3'UTR靶向结合的预测分析 | 第51页 |
| A3.miR-224与PCSK9 mRNA 3'UTR结合自由能的分析 | 第51-53页 |
| 附录B: 文献综述 | 第53-61页 |
| 参考文献 | 第58-61页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第61页 |
| 参与的课题项目 | 第61页 |
