| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 1. 文献综述 | 第11-20页 |
| 1.1 土壤磷素状况 | 第11-12页 |
| 1.2 植物磷营养 | 第12-13页 |
| 1.3 植物耐低磷适应机制 | 第13-18页 |
| 1.3.1 形态学上的适应机制 | 第13-15页 |
| 1.3.2 生理生化上的适应机制 | 第15页 |
| 1.3.3 分子适应机制 | 第15-18页 |
| 1.4 植物低磷胁迫下重要转录因子 | 第18-20页 |
| 1.4.1 植物低磷胁迫下MYB家族转录因子 | 第18-19页 |
| 1.4.2 PHR1(PHOSPHATE STARVATION RESPONSE 1) | 第19-20页 |
| 2. 材料与方法 | 第20-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.2 菌株及载体 | 第20页 |
| 2.1.3 主要药品 | 第20-21页 |
| 2.1.4 常用溶液及培养基 | 第21-22页 |
| 2.2 玉米PHR基因的克隆 | 第22-24页 |
| 2.2.1 玉米候选PHR基因的生物信息学预测 | 第22-23页 |
| 2.2.2 实验材料培养及RNA提取 | 第23页 |
| 2.2.3 ZmPHR1和ZmPHR2 cDNA全长的扩增 | 第23-24页 |
| 2.2.4 目的片段与克隆载体的连接 | 第24页 |
| 2.2.5 阳性克隆检测并测序 | 第24页 |
| 2.3 玉米PHR基因的生物信息学分析 | 第24-25页 |
| 2.3.1 ZmPHR1和ZmPHR2结构预测 | 第24-25页 |
| 2.3.2 ZmPHR1和ZmPHR2进化关系分析 | 第25页 |
| 2.3.3 ZmPHR1和ZmPHR2启动子结构分析 | 第25页 |
| 2.4 玉米PHR基因的原核表达分析 | 第25-27页 |
| 2.4.1 ZmPHR1和ZmPHR2原核表达载体构建 | 第25-26页 |
| 2.4.2 ZmPHR1和ZmPHR2诱导表达蛋白质 | 第26-27页 |
| 2.5 玉米PHR基因的酵母激活验证分析 | 第27-30页 |
| 2.5.1 ZmPHR1和ZmPHR2酵母激活表达载体构建 | 第27-29页 |
| 2.5.2 ZmPHR1和ZmPHR2酵母激活功能验证 | 第29-30页 |
| 2.6 玉米PHR基因时空特异性表达分析 | 第30-32页 |
| 2.6.1 实验材料处理 | 第30-31页 |
| 2.6.2 总RNA提取及反转录成cDNA | 第31页 |
| 2.6.3 设计定量PCR用引物 | 第31-32页 |
| 2.6.4 ZmPHR1和ZmPHR2时空特异性表达 | 第32页 |
| 2.7 玉米PHR基因的遗传转化分析 | 第32-35页 |
| 2.7.1 ZmPHR1和ZmPHR2植物过表达载体构建 | 第32-34页 |
| 2.7.2 ZmPHR1和ZmPHR2植物过表达载体遗传转化拟南芥 | 第34页 |
| 2.7.3 拟南芥ZmPHR1和ZmPHR2过量表达转基因阳性材料检测 | 第34-35页 |
| 3. 结果与分析 | 第35-57页 |
| 3.1 玉米ZmPHR1和ZmPHR2的克隆 | 第35-36页 |
| 3.2 玉米PHR基因的生物信息学分析 | 第36-39页 |
| 3.2.1 ZmPHR1和ZmPHR2保守结构域预测 | 第36-37页 |
| 3.2.2 ZmPHR1和ZmPHR2系统进化分析 | 第37-38页 |
| 3.2.3 ZmPHR1和ZmPhR2启动子顺式作用元件分析 | 第38-39页 |
| 3.3 玉米PHR基因的原核表达分析 | 第39-41页 |
| 3.3.1 ZmPHR1和ZmPHR2原核表达载体构建 | 第39-40页 |
| 3.3.2 ZmPHR1和ZmPHR2融合蛋白诱导表达 | 第40-41页 |
| 3.4 玉米PHR基因转录激活功能验证 | 第41-45页 |
| 3.4.1 玉米PHR基因酵母激活表达载体构建 | 第42-43页 |
| 3.4.2 玉米PHR基因转录激活功能验证 | 第43-45页 |
| 3.5 玉米ZmPHR1和ZmPHR2时空特异性表达 | 第45-51页 |
| 3.5.1 低磷胁迫玉米材料总RNA提取和检测 | 第45-46页 |
| 3.5.2 内参基因、ZmPHR1和ZmPHR2的溶解曲线和标准曲线 | 第46-48页 |
| 3.5.3 ZmPHR1和ZmPHR2的时空特异性表达分析 | 第48-51页 |
| 3.6 ZmPHR1和ZmPHR2遗传转化拟南芥 | 第51-57页 |
| 3.6.1 中间表达载体pCAMBIA3301-35S构建 | 第51-52页 |
| 3.6.2 ZmPHR1和ZmPHR2植物过表达载体构建 | 第52-54页 |
| 3.6.3 ZmPHR1和ZmPHR2植物过表达载体遗传转化拟南芥 | 第54-55页 |
| 3.6.4 ZmPHR1和ZmPHR2阳性转基因拟南芥材料检测 | 第55-57页 |
| 4. 讨论 | 第57-60页 |
| 4.1 ZmPHR1和ZmPHR2分子结构特征 | 第57-58页 |
| 4.2 ZmPHR1和ZmPHR2转录激活功能的确定 | 第58-59页 |
| 4.3 ZmPHR1和ZmPHR2在玉米苗期应答低磷胁迫的时空表达特性 | 第59-60页 |
| 4.4 ZmPHR1和ZmPHR2遗传转化拟南芥 | 第60页 |
| 结论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
