中文摘要 | 第4-8页 |
abstract | 第8-11页 |
英文缩写表 | 第15-16页 |
第1章 文献综述 | 第16-29页 |
1.1 自噬的概述 | 第16-18页 |
1.1.1 细胞自噬 | 第16-17页 |
1.1.2 乳腺癌与细胞自噬 | 第17-18页 |
1.1.3 电离辐射诱导的细胞自噬 | 第18页 |
1.2 BNIP3的简介 | 第18-23页 |
1.2.1 Bcl-2家族蛋白 | 第18-20页 |
1.2.2 BNIP3与BNIP3L | 第20-21页 |
1.2.3 TM结构域的作用 | 第21-23页 |
1.3 BNIP3与细胞自噬的关系 | 第23-27页 |
1.3.1 BNIP3诱导的细胞死亡 | 第23-25页 |
1.3.2 BNIP3诱导的细胞自噬 | 第25-26页 |
1.3.3 肿瘤中BNIP3的表达 | 第26-27页 |
1.4 立题依据 | 第27-29页 |
第2章 材料与方法 | 第29-38页 |
2.1 主要试剂与仪器 | 第29-30页 |
2.1.1 主要试剂 | 第29-30页 |
2.1.2 主要仪器 | 第30页 |
2.2 主要实验方法 | 第30-37页 |
2.2.1 细胞培养与照射条件 | 第30页 |
2.2.2 构建细胞沉默模型 | 第30-31页 |
2.2.3 CCK8(CellCountingKit-8) | 第31-32页 |
2.2.4 蛋白质免疫印迹法(WesternBlot) | 第32-33页 |
2.2.5 MDC染色流式细胞术 | 第33-34页 |
2.2.6 ROS染色流式细胞术 | 第34页 |
2.2.7 RT-PCR实验 | 第34-36页 |
2.2.8 细胞克隆形成实验 | 第36页 |
2.2.9 免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation) | 第36-37页 |
2.3 统计学方法 | 第37-38页 |
第3章 实验结果 | 第38-51页 |
3.1 BNIP3参与电离辐射诱导的MCF-7细胞自噬 | 第38-41页 |
3.1.1 电离辐射降低MCF-7细胞存活率 | 第38页 |
3.1.2 电离辐射诱导MCF-7细胞发生自噬 | 第38-40页 |
3.1.3 电离辐射增加细胞中ROS的产生 | 第40页 |
3.1.4 电离辐射增加BNIP3的表达水平 | 第40-41页 |
3.2 BNIP3如何调控电离辐射诱导的MCF-7细胞自噬 | 第41-48页 |
3.2.1 BNIP3沉默模型的构建 | 第41-42页 |
3.2.2 沉默BNIP3对电离辐射诱导的细胞死亡的影响 | 第42-43页 |
3.2.3 沉默BNIP3对电离辐射后的细胞敏感性的影响 | 第43页 |
3.2.4 沉默BNIP3对电离辐射诱导的细胞自噬的影响 | 第43-45页 |
3.2.5 沉默BNIP3对电离辐射诱导的ROS的影响 | 第45-46页 |
3.2.6 沉默BNIP3对电离辐射诱导的细胞铁代谢的影响 | 第46-47页 |
3.2.7 电离辐射诱导BNIP3沉默模型发生线粒体自噬 | 第47-48页 |
3.3 MAPLC3与BNIP3介导的线粒体自噬之间的关系 | 第48-51页 |
3.3.1 加入NH_4Cl对于电离辐射诱导的BNIP3沉默模型细胞死亡的影响 | 第48页 |
3.3.2 加入NH_4Cl对于电离辐射诱导的BNIP3沉默模型中自噬的影响 | 第48-50页 |
3.3.3 co-IP证实电离辐射后BNIP3与MAPLC3相互作用增强. | 第50-51页 |
第4章 讨论 | 第51-58页 |
4.1 BNIP3参与电离辐射诱导的MCF-7细胞自噬 | 第52-53页 |
4.2 BNIP3如何调控电离辐射诱导MCF-7细胞自噬 | 第53-55页 |
4.3 MAPLC3与BNIP3介导的线粒体自噬之间的关系 | 第55-58页 |
第5章 结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-68页 |
作者简介 | 第68-69页 |
致谢 | 第69页 |