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辐射诱导DNA损伤修复中EZH2与ATM调控作用的研究

中文摘要第4-7页
ABSTRACT第7-10页
英文缩略词第14-15页
第1章 文献综述第15-25页
    1.1 电离辐射第15页
    1.2 DNA损伤第15-16页
    1.3 DNA损伤修复第16-19页
        1.3.1 DNA损伤修复机制第16-17页
        1.3.2 细胞周期阻滞第17-18页
        1.3.3 DNA损伤修复的相关分子通路第18-19页
    1.4 ATM第19-21页
        1.4.1 ATM结构第19-20页
        1.4.2 ATM在DNA损伤修复中的作用第20-21页
    1.5 组蛋白甲基化与DNA损伤第21-22页
        1.5.1 组蛋白甲基化第21页
        1.5.2 组蛋白甲基化与DNA损伤第21-22页
    1.6 H3K27me3生物学作用功能第22-23页
    1.7 组蛋白甲基化的催化酶系统第23-25页
第2章 材料和方法第25-42页
    2.1 实验材料第25-30页
        2.1.1 实验试剂第25-27页
        2.1.2 主要实验耗材第27-28页
        2.1.3 主要实验仪器第28-29页
        2.1.4 试剂配制第29-30页
    2.2 实验方法第30-42页
        2.2.1 细胞培养第30页
        2.2.2 X线照射第30-31页
        2.2.3 细胞周期检测方法第31页
        2.2.4 CCK8法检测抑制剂GSK126对HepG2细胞的毒性作用第31-32页
        2.2.5 免疫荧光第32页
        2.2.6 EZH2干扰RNA细胞模型建立第32-33页
        2.2.7 EZH2过表达细胞模型建立第33-35页
        2.2.8 转录水平检测第35-37页
        2.2.9 Western Blot第37-39页
        2.2.10 染色质免疫共沉淀技术(ChIP)第39-41页
        2.2.11 统计学方法第41-42页
第3章 实验结果第42-69页
    3.1 不同剂量电离辐射对HepG2细胞表型的影响第42-43页
        3.1.1 对细胞周期进程的影响第42页
        3.1.2 对细胞DNA损伤的影响第42-43页
    3.2 电离辐射对EZH2、BMI-1 及ATM/Chk2/ p53通路相关基因表达水平的影响第43-47页
        3.2.1 对EZH2 mRNA表达水平的影响第43-44页
        3.2.2 对BMI-1 mRNA表达水平的影响第44-45页
        3.2.3 对ATM mRNA表达水平的影响第45页
        3.2.4 对Chk2 mRNA表达水平的影响第45-46页
        3.2.5 对p53 mRNA表达水平的影响第46-47页
    3.3 电离辐射HepG2细胞后加入GSK126对Pc Gs家族中EZH2、BMI-1、H3K27me3和ATM/Chk2/p53表达水平的影响第47-52页
        3.3.1 HepG2细胞中EZH2甲基化转移酶抑制剂GSK126的IC50测定第47页
        3.3.2 HepG2肝癌细胞中加入GSK126后细胞周期变化第47-48页
        3.3.3 DNA损伤变化第48-50页
        3.3.4 HepG2细胞加入GSK126后对EZH2以及ATM/ Chk2/ p53通路基因mRNA的影响第50-52页
    3.4 辐射诱导的HepG2肝癌细胞中加 GSK126后对EZH2、H3K27me3以及ATM/p53通路基因蛋白表达水平的影响第52-55页
        3.4.1 辐照HepG2细胞不同处理组H3K27me3蛋白表达水平变化第52-53页
        3.4.2 辐照HepG2细胞不同处理组EZH2蛋白表达水平变化第53-54页
        3.4.3 辐照HepG2细胞不同处理组ATM蛋白表达水平变化第54页
        3.4.4 辐照HepG2细胞不同处理组p53蛋白表达水平变化第54-55页
    3.5 干扰EZH2后HepG2细胞在不同辐照剂量下EZH2、H3K27me3及ATM / Chk2/p53表达水平的变化第55-63页
        3.5.1 干扰EZH2的HepG2细胞模型的建立及鉴定第55-56页
        3.5.2 干扰EZH2后不同剂量电离辐射对HepG2细胞 γH2AX、H3K27me3的影响第56-58页
        3.5.3 干扰EZH2后不同剂量电离辐射对HepG2细胞ATM/ Chk2/ p53通路基因mRNA水平表达的影响第58-60页
        3.5.4 干扰EZH2后不同剂量电离辐射对HepG2细胞H3K27me3及ATM/ p53通路基因蛋白表达水平的影响第60-63页
    3.6 EZH2过表达的 293T细胞不同剂量照射后对ATM/Chk2/p53通路基因mRNA及蛋白水平表达的影响第63-67页
        3.6.1 EZH2过表达的 293T细胞模型的建立及鉴定第63-64页
        3.6.2 EZH2转录及蛋白表达水平变化第64-65页
        3.6.3 ATM转录及蛋白表达水平变化第65-66页
        3.6.4 Chk2 mRNA表达水平变化第66页
        3.6.5 p53转录及蛋白表达水平变化第66-67页
        3.6.6 H3K27me3蛋白表达水平变化第67页
    3.7 ChIP实验结果第67-69页
第4章 讨论第69-74页
第5章 结论第74-75页
参考文献第75-83页
作者简介在学期间所取得的科研成果第83-84页
致谢第84页

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