| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 第一章 前言 | 第12-16页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第16-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-19页 |
| 2.1.1 分子生物学试剂 | 第16页 |
| 2.1.2 细胞培养相关试剂及材料 | 第16页 |
| 2.1.3 抗体和细胞因子 | 第16页 |
| 2.1.4 小鼠 | 第16-17页 |
| 2.1.5 主要实验仪器 | 第17页 |
| 2.1.6 相关引物 | 第17-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-38页 |
| 2.2.1.基因组DNA抽提与鉴定：（从小鼠尾巴中抽提全基因组DNA） | 第19-20页 |
| 2.2.2.骨髓单个悬浮细胞的制备 | 第20页 |
| 2.2.3.BMDM的培养 | 第20页 |
| 2.2.4.细胞表面染色：用于流式分析 | 第20-21页 |
| 2.2.5 流式细胞分选 | 第21页 |
| 2.2.6.Western blot | 第21-22页 |
| 2.2.7 免疫磁珠分选 | 第22页 |
| 2.2.8 RNA抽提 | 第22-23页 |
| 2.2.9 cDNA的制备 | 第23-24页 |
| 2.2.10 实时荧光定量PCR | 第24页 |
| 2.2.11 质粒构建 | 第24-25页 |
| 2.2.12 胶回收 | 第25页 |
| 2.2.13 限制性酶切 | 第25-27页 |
| 2.2.14 感受态细菌的制备和质粒的转化 | 第27-28页 |
| 2.2.15 质粒DNA小量抽取 | 第28-29页 |
| 2.2.16 质粒DNA大量抽取 | 第29页 |
| 2.2.17 脂质体转染 | 第29页 |
| 2.2.18 免疫共沉淀 | 第29-30页 |
| 2.2.19 石蜡切片制备 | 第30-31页 |
| 2.2.20 苏木素-伊红(H&E)染色 | 第31-32页 |
| 2.2.21 天狼猩红染色 | 第32-33页 |
| 2.2.22 免疫荧光染色 | 第33页 |
| 2.2.23 刘氏染色法 | 第33-34页 |
| 2.2.24 银染 | 第34-35页 |
| 2.2.25 Brdu染色检测细胞增殖 | 第35-36页 |
| 2.2.26 Annexin V染色检测细胞凋亡 | 第36-38页 |
| 第三章 Cbl /c-Cbl在巨噬细胞中双敲除的小鼠模型的建立与鉴定 | 第38-41页 |
| 3.1 巨噬细胞活化后Cbl-b和c-Cbl的表达量升高 | 第38-39页 |
| 3.2 巨噬细胞中c-Cbl/Cbl-b双敲除小鼠模型的建立与鉴定 | 第39-40页 |
| 3.2.1 c-Cbl/Cbl-b敲除小鼠的PCR鉴定 | 第39页 |
| 3.2.2 c-Cbl/Cbl-b敲除小鼠的Western blot鉴定 | 第39-40页 |
| 3.3 小结 | 第40-41页 |
| 第四章 Cbl-b/c-Cbl在巨噬细胞中双敲除小鼠的表型分析 | 第41-62页 |
| 4.1 Cbl-b/c-Cbl双敲除小鼠生存曲线 | 第41页 |
| 4.2 Cbl-b/c-Cbl双敲除小鼠肺损伤及其鉴定 | 第41-44页 |
| 4.3 双敲除小鼠肺灌洗液中肺泡巨噬细胞的表型分析 | 第44-46页 |
| 4.4 双敲除小鼠肺灌洗液中其他免疫细胞的表型分析 | 第46-47页 |
| 4.5 双敲除小鼠脾脏和胸腺中T细胞的表型分析 | 第47-48页 |
| 4.6 双敲除小鼠脾脏和骨髓中B细胞的表型分析 | 第48-50页 |
| 4.7 双敲除小鼠脾脏和骨髓中DC的表型分析 | 第50-52页 |
| 4.8 双敲除小鼠脾脏和骨髓中粒细胞的表型分析 | 第52-54页 |
| 4.9 双敲除小鼠脾脏和骨髓中巨噬细胞的表型分析 | 第54-55页 |
| 4.10 双敲除小鼠血液中单核细胞和粒细胞的表型分析 | 第55-56页 |
| 4.11 双敲除小鼠肺泡巨噬细胞的活化 | 第56-57页 |
| 4.12 双敲除小鼠肺泡巨噬细胞的增殖和凋亡 | 第57-58页 |
| 4.13 双敲除小鼠肺灌洗液中细胞因子及趋化因子受体的检测 | 第58-59页 |
| 4.14 双敲除小鼠肺泡巨噬细胞会诱导WT小鼠肺损伤 | 第59-60页 |
| 4.15 小结 | 第60-62页 |
| 第五章 Cbl-b/c-Cbl对巨噬细胞炎症调控的机制研究 | 第62-76页 |
| 5.1 双敲除Cbl-b/c-Cbl会影响PU.1 对M-CSFR的转录调控 | 第62-68页 |
| 5.1.1 WT、Cbl-b KO、c-Cbl KO和dKO四种小鼠的BMDM体外扩增 | 第62-64页 |
| 5.1.2 WT、Cbl-b KO、c-Cbl KO和dKO四种小鼠的肺灌洗液中M-CSFR的表达情况 | 第64-65页 |
| 5.1.3 M-CSFR与Cbl-b/c-Cbl的相互作用 | 第65-66页 |
| 5.1.4 体外验证PU.1 与Cbl-b/c-Cbl的相互作用 | 第66-68页 |
| 5.2 双敲除Cbl-b/c-Cbl影响巨噬细胞中Lyn及其下游信号分子的表达 | 第68-76页 |
| 5.2.1 质谱法检测肺泡巨噬细胞中与Cbl-b/c-Cbl相互作用的分子 | 第68-70页 |
| 5.2.2 肺灌洗液以及BMDM中检测Lyn与SHIP1的表达 | 第70-71页 |
| 5.2.3 SHIP1与Cbl-b/c-Cbl相互作用 | 第71页 |
| 5.2.4 Lyn与Cbl-b/c-Cbl相互作用 | 第71-72页 |
| 5.2.5 抑制Lyn的表达会影响dKO小鼠BMDM中炎症因子及趋化因子受体的表达 | 第72-74页 |
| 5.2.6 Lyn下游信号分子的相关表达 | 第74页 |
| 5.2.7 小结 | 第74-76页 |
| 第六章 讨论 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-83页 |
| 综述 巨噬细胞在特发性肺纤维化中的作用机制及研究进展 | 第83-100页 |
| 参考文献 | 第90-100页 |
| 英文缩写 | 第100-102页 |
| 致谢 | 第102-104页 |
