摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
第一章 绪论 | 第12-20页 |
1.1 多药耐药 | 第12-16页 |
1.1.1 细胞多药耐药机制 | 第12-13页 |
1.1.2 阿霉素及其耐药机制 | 第13-14页 |
1.1.3 谷胱甘肽与多药耐药 | 第14-15页 |
1.1.4 活性氧与多药耐药 | 第15-16页 |
1.2 多药耐药的逆转 | 第16-17页 |
1.3 耐药分析方法 | 第17-19页 |
1.3.1 单细胞内药物分析方法 | 第17-18页 |
1.3.2 细胞自体荧光 | 第18-19页 |
1.4 本论文的研究意义与创新点 | 第19-20页 |
第二章 人肝癌多药耐药株HepG2/ADM建立 | 第20-32页 |
2.1 引言 | 第20-21页 |
2.2 实验部分 | 第21-24页 |
2.2.1 仪器与试剂 | 第21页 |
2.2.2 多深度微流控芯片的制作 | 第21-22页 |
2.2.3 溶液配制 | 第22-23页 |
2.2.4 人肝癌多药耐药细胞株的培养 | 第23页 |
2.2.5 微流控芯片检测耐药过程单细胞阿霉素 | 第23-24页 |
2.2.5.1 阿霉素标准曲线 | 第23页 |
2.2.5.2 芯片电泳检测单细胞阿霉素 | 第23-24页 |
2.3 结果 | 第24-29页 |
2.3.1 人肝癌多药耐药细胞HepG2/ADM培养过程的细胞形态学变化 | 第24-26页 |
2.3.2 荧光显微镜检测细胞内阿霉素的聚集 | 第26页 |
2.3.3 芯片电泳检测耐药细胞形成过程中阿霉素的摄取 | 第26-29页 |
2.4 讨论与小结 | 第29-32页 |
2.4.1 阿霉素母液的配制 | 第29-30页 |
2.4.2 芯片结构的选择 | 第30页 |
2.4.3 单细胞阿霉素分析 | 第30-31页 |
2.4.4 小结 | 第31-32页 |
第三章 芯片毛细管电泳-激光诱导荧光检测耐药细胞培养过程中谷胱甘肽和活性氧的含量变化 | 第32-56页 |
3.1 引言 | 第32-33页 |
3.2 实验部分 | 第33-37页 |
3.2.1 试剂与仪器 | 第33-34页 |
3.2.2 溶液配制 | 第34-35页 |
3.2.3 细胞培养与处理 | 第35页 |
3.2.4 GSSG与NDA在线衍生 | 第35-36页 |
3.2.5 微流控芯片同时检测单细胞GSH、GSSG、ROS | 第36-37页 |
3.3 结果与讨论 | 第37-55页 |
3.3.1 GSH、GSSG衍生 | 第37-41页 |
3.3.2 细胞自体荧光和阿霉素的影响 | 第41-43页 |
3.3.3 芯片电泳同时检测单细胞的GSH、GSSG和ROS | 第43-55页 |
3.4 小结 | 第55-56页 |
第四章 川芎嗪逆转人肝癌多药耐药细胞HepG2/ADM耐药性的研究 | 第56-74页 |
4.1 引言 | 第56-57页 |
4.2 实验部分 | 第57-60页 |
4.2.1 仪器与试剂 | 第57页 |
4.2.2 溶液配制 | 第57-58页 |
4.2.3 川芎嗪非细胞毒性浓度的确定 | 第58-59页 |
4.2.4 细胞培养和细胞预处理 | 第59页 |
4.2.5 川芎嗪逆转阿霉素耐药的检测 | 第59-60页 |
4.3 结果与讨论 | 第60-72页 |
4.3.1 川芎嗪对检测的影响 | 第60-61页 |
4.3.2 川芎嗪非细胞毒性浓度 | 第61-62页 |
4.3.3 TMP+DOX组DOX检测 | 第62-64页 |
4.3.5 芯片电泳检测川芎嗪逆转耐药 72h的GSH、GSSG和DOX | 第64-72页 |
4.4 小结 | 第72页 |
4.5 总论与展望 | 第72-74页 |
参考文献 | 第74-84页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第84-85页 |
致谢 | 第85页 |