| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 1 材料、试剂和仪器 | 第14-24页 |
| 1.1 实验动物 | 第14页 |
| 1.2 主要试剂 | 第14-16页 |
| 1.3.主要试剂配制 | 第16-21页 |
| 1.3.1 肝脏灌流液(无Ca~(2+)/Mg~(2+) HBSS液，pH 7.4)的配方 | 第16页 |
| 1.3.2 肝组织消化液的配方 | 第16-17页 |
| 1.3.3 胶原酶溶液的配制 | 第17页 |
| 1.3.4 原代肝细胞培养基的配制 | 第17页 |
| 1.3.5 鼠尾胶原工作液的配制 | 第17页 |
| 1.3.6 鼠尾胶原涂抹板的制作 | 第17页 |
| 1.3.7 MTT工作液的配制 | 第17页 |
| 1.3.8 台盼兰溶液的配制 | 第17-18页 |
| 1.3.9 制备肝细胞脂肪变性诱导液 | 第18页 |
| 1.3.10 1×磷酸缓冲盐溶液（PBS）的配制 | 第18页 |
| 1.3.11 1×Tris-Glycine缓冲溶液的配制 | 第18页 |
| 1.3.12 5×蛋白上样缓冲溶液的配制 | 第18-19页 |
| 1.3.13 SDS-PAGE电泳相关溶液的配制 | 第19-21页 |
| 1.3.14 免疫印迹相关溶液配制 | 第21页 |
| 1.4 主要实验仪器 | 第21-24页 |
| 2 实验方法与步骤 | 第24-30页 |
| 2.1 小鼠原代肝细胞的获取和培养 | 第24页 |
| 2.2 MTT法检测不同浓度油酸对小鼠原代肝细胞细胞活性的影响 | 第24页 |
| 2.3 实验分组 | 第24-25页 |
| 2.4 油红染色 | 第25页 |
| 2.5 细胞内甘油三酯含量的检测 | 第25页 |
| 2.6 细胞甘油释放量的检测 | 第25-26页 |
| 2.7 BCA法测定蛋白浓度 | 第26页 |
| 2.8 蛋白免疫印记法（WESTERN BLOTTING）检测相关蛋白的表达 | 第26-29页 |
| 2.8.1 蛋白的提取 | 第26-27页 |
| 2.8.2 BCA法测定蛋白浓度 | 第27页 |
| 2.8.3 蛋白浓度的调节 | 第27页 |
| 2.8.4 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第27-29页 |
| 2.9 免疫荧光检测细胞内LC3颗粒荧光 | 第29页 |
| 2.10 透射电镜标本的制备 | 第29页 |
| 2.11 统计学分析 | 第29-30页 |
| 3 结果 | 第30-38页 |
| 3.1 小鼠原代肝细胞脂肪变性模型建立的条件 | 第30-31页 |
| 3.1.1 MTT法检测细胞活性选择诱导液中油酸的适宜浓度 | 第30页 |
| 3.1.2 油红O染色观察不同浓度油酸对肝细胞脂滴积累情况 | 第30-31页 |
| 3.2 H_2S对肝细胞脂肪合成的影响 | 第31-32页 |
| 3.2.1 H_2S对肝细胞脂滴的影响 | 第31-32页 |
| 3.2.2 H_2S对肝细胞甘油三酯含量的影响 | 第32页 |
| 3.3 H_2S对肝细胞脂肪分解的影响 | 第32-34页 |
| 3.3.1 H_2S对肝细胞甘油释放量的影响 | 第33页 |
| 3.3.2 H_2S对肝细胞质内激素敏感性脂肪酶蛋白表达量的影响 | 第33-34页 |
| 3.4 H_2S对肝细胞自噬的影响 | 第34-38页 |
| 3.4.1 H_2S对肝细胞脂质蓄积和空泡形成的影响 | 第34-35页 |
| 3.4.2 H_2S对肝细胞自噬标志物LC3荧光颗粒的影响 | 第35页 |
| 3.4.3 H_2S对肝细胞LC3Ⅰ和LC3Ⅱ蛋白表达的影响 | 第35-36页 |
| 3.4.4 H_2S对肝细胞自噬体和自噬溶酶体的影响 | 第36-38页 |
| 4 讨论 | 第38-44页 |
| 5.结 论 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 文献综述 | 第50-62页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 附录 | 第62-64页 |
| 致谢 | 第64-66页 |
| 硕士期间发表的学术论文 | 第66-67页 |
