| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8页 |
| 缩略词对应表 | 第9-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-25页 |
| 1.1 隐性基因簇概述 | 第12-14页 |
| 1.1.1 隐性基因簇 | 第12-14页 |
| 1.2 恰塔霉素的生物合成 | 第14-17页 |
| 1.2.1 恰塔霉素结构及生物学活性 | 第15-16页 |
| 1.2.2 恰塔霉素合成基因簇 | 第16-17页 |
| 1.3 链霉菌次级代谢调控研究进展 | 第17-22页 |
| 1.3.1 全局多效性调控 | 第18-19页 |
| 1.3.2 途径特异性调控 | 第19-22页 |
| 1.4 链霉菌中TETR家族调控因子研究进展 | 第22-24页 |
| 1.4.1 TFRs的结构、功能 | 第22-23页 |
| 1.4.2 TFRs在链霉菌中的分布 | 第23-24页 |
| 1.5 本论文的研究内容 | 第24-25页 |
| 第2章 ChaK调控恰塔霉素生物合成的机制研究 | 第25-48页 |
| 2.1 引言 | 第25页 |
| 2.2 实验材料 | 第25-30页 |
| 2.2.1 菌株或者质粒 | 第25-27页 |
| 2.2.2 主要仪器和设备 | 第27-28页 |
| 2.2.3 培养基及培养条件 | 第28-29页 |
| 2.2.4 培养试剂 | 第29-30页 |
| 2.3 实验方法 | 第30-38页 |
| 2.3.1 分子克隆相关实验方法 | 第30-32页 |
| 2.3.2 大肠杆菌重组蛋白制备及SDS-PAGE电泳鉴定 | 第32-33页 |
| 2.3.3 凝胶阻滞电泳(EMSA) | 第33-34页 |
| 2.3.4 DNaseI Footprinting | 第34-35页 |
| 2.3.5 S chattanoogensis基因组抽提 | 第35-36页 |
| 2.3.6 大肠杆菌-链霉菌结合转导 | 第36页 |
| 2.3.7 S. chattanoogensis发酵、产物处理及HPLC测定 | 第36-37页 |
| 2.3.8 实时定量PCR(qRT—PCR) | 第37-38页 |
| 2.4 实验结果 | 第38-47页 |
| 2.4.1 ChaK蛋白序列分析 | 第38-39页 |
| 2.4.2 ChaK蛋白表达及纯化 | 第39页 |
| 2.4.3 ChaK对恰塔霉素生物合成调控方式分析 | 第39-40页 |
| 2.4.4 ChaK具有自我调控作用 | 第40-42页 |
| 2.4.5 ChaK负调控chaJ转录 | 第42-45页 |
| 2.4.6 ChaK结合内源抗生素的体外分析 | 第45页 |
| 2.4.7 ChaK保守结合序列预测 | 第45-47页 |
| 2.5 本章小结与讨论 | 第47-48页 |
| 第3章 GBL受体同源蛋白调控恰塔霉素生物合成 | 第48-60页 |
| 3.1 引言 | 第48页 |
| 3.2 实验材料 | 第48-51页 |
| 3.2.1 菌株及质粒 | 第48-50页 |
| 3.2.2 主要仪器和设备 | 第50页 |
| 3.2.3 培养基及培养条件 | 第50页 |
| 3.2.4 培养试剂 | 第50-51页 |
| 3.3 实验方法 | 第51-54页 |
| 3.3.1 分子克隆相关实验方法 | 第51页 |
| 3.3.2 S.chattanoogensis基因组抽提 | 第51页 |
| 3.3.3 S.chattanoogensis ZJUQ2(chaK1敲除株)构建 | 第51-53页 |
| 3.3.4 S.chattanoogensis ZJUQ3(chaK1回补)菌株构建 | 第53-54页 |
| 3.4 实验结果 | 第54-58页 |
| 3.4.1 GBL受体对恰塔霉素合成影响 | 第54-55页 |
| 3.4.2 ChaK1蛋白序列分析 | 第55-56页 |
| 3.4.3 chaK1敲除株构建 | 第56-57页 |
| 3.4.4 ChaK1蛋白对恰塔霉素合成起负调控作用 | 第57-58页 |
| 3.5 本章小结 | 第58-60页 |
| 第4章 结论与展望 | 第60-61页 |
| 4.1 本文研究成果 | 第60页 |
| 4.2 展望 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-66页 |
| 攻读硕士学位期间主要的研究成果 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
