| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 引言 | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-28页 |
| 1.1 布鲁氏菌病及布鲁氏菌概述 | 第10-14页 |
| 1.1.1 布鲁氏菌病的发现 | 第10-11页 |
| 1.1.2 布鲁氏菌的结构特征及分类 | 第11页 |
| 1.1.3 布鲁氏菌的致病机理 | 第11-12页 |
| 1.1.4 布鲁氏菌的病原学特性 | 第12页 |
| 1.1.5 布鲁氏菌病的流行与传播 | 第12-13页 |
| 1.1.6 我国布鲁氏菌病疫情及危害 | 第13页 |
| 1.1.7 布鲁氏菌的防治 | 第13-14页 |
| 1.2 布鲁氏菌的研究进展 | 第14-24页 |
| 1.2.1 布鲁氏菌的调节系统 | 第14-15页 |
| 1.2.2 布鲁氏菌的免疫原性 | 第15页 |
| 1.2.3 布鲁氏菌的毒力相关因子 | 第15-18页 |
| 1.2.4 布鲁氏菌的核糖体蛋白基因 | 第18页 |
| 1.2.5 布鲁氏菌的外膜蛋白 | 第18-21页 |
| 1.2.6 布鲁氏菌病的诊断 | 第21-24页 |
| 1.3 布鲁氏菌疫苗的研究进展及意义 | 第24-27页 |
| 1.3.1 常规疫苗 | 第24-26页 |
| 1.3.2 重组蛋白疫苗 | 第26页 |
| 1.3.3 DNA 疫苗 | 第26-27页 |
| 1.3.4 联合疫苗 | 第27页 |
| 1.4 本文的研究内容及意义 | 第27-28页 |
| 2 实验内容 | 第28-42页 |
| 2.1 实验材料和器材 | 第28-32页 |
| 2.1.1 主要实验器材 | 第28页 |
| 2.1.2 主要器材 | 第28页 |
| 2.1.3 常用试剂及试剂盒 | 第28-29页 |
| 2.1.4 试验中用到的菌株和载体 | 第29-30页 |
| 2.1.5 实验试剂配方 | 第30-32页 |
| 2.2 试验方法 | 第32-42页 |
| 2.2.1 目的基因的克隆 | 第32-34页 |
| 2.2.2 目的基因的双酶切 | 第34页 |
| 2.2.3 质粒载体的提取纯化与双酶切 | 第34-36页 |
| 2.2.4 目的表达片段与克隆载体的连接 | 第36页 |
| 2.2.5 大肠杆菌克隆菌株 DH5α和表达菌株 TL129 或（BL21）感受态细胞的制备 | 第36-37页 |
| 2.2.6 将重组质粒载体转化大肠杆菌 DH5α克隆菌株 | 第37页 |
| 2.2.7 大肠杆菌 DH5α阳性克隆子的筛选与测序鉴定 | 第37-38页 |
| 2.2.8 阳性重组质粒的提取 | 第38页 |
| 2.2.9 阳性重组质粒导入表达菌株及阳性克隆子的筛选 | 第38页 |
| 2.2.10 目的蛋白的诱导表达与纯化 | 第38-39页 |
| 2.2.11 多克隆抗体的制备 | 第39-40页 |
| 2.2.12 免疫血清的 Western blot 检测 | 第40-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-53页 |
| 3.1 omp10 基因的试验结果 | 第42-43页 |
| 3.1.1 omp10 基因的 PCR 扩增结果 | 第42页 |
| 3.1.2 重组质粒阳性克隆子的菌落 PCR 筛选 | 第42-43页 |
| 3.1.3 Omp10 蛋白的诱导表达与纯化结果 | 第43页 |
| 3.2 omp19 基因的试验结果 | 第43-45页 |
| 3.2.1 omp19 基因的 PCR 扩增结果 | 第43-44页 |
| 3.2.2 重组质粒阳性克隆子的菌落 PCR 筛选 | 第44页 |
| 3.2.3 Omp19 蛋白的诱导表达与鉴定结果 | 第44-45页 |
| 3.3 omp22 基因的试验结果 | 第45-47页 |
| 3.3.1 omp22 基因的 PCR 扩增结果 | 第45页 |
| 3.3.2 重组质粒阳性克隆子的菌落 PCR 筛选 | 第45-46页 |
| 3.3.3 Omp22 蛋白的诱导表达与纯化结果 | 第46-47页 |
| 3.3.4 免疫血清 Western blot 检测结果 | 第47页 |
| 3.4 omp25 基因的试验结果 | 第47-49页 |
| 3.4.1 omp25 基因的 PCR 扩增结果 | 第47-48页 |
| 3.4.2 重组质粒阳性克隆子的菌落 PCR 筛选 | 第48页 |
| 3.4.3 Omp25 蛋白的诱导表达与纯化结果 | 第48-49页 |
| 3.5 omp28 基因的试验结果 | 第49-50页 |
| 3.5.1 omp28 基因的 PCR 扩增结果 | 第49页 |
| 3.5.2 重组质粒阳性克隆子的菌落 PCR 筛选 | 第49-50页 |
| 3.5.3 Omp28 蛋白的诱导表达与纯化结果 | 第50页 |
| 3.6 P39 基因的试验结果 | 第50-53页 |
| 3.6.1 P39 基因的 PCR 扩增结果 | 第50-51页 |
| 3.6.2 重组质粒阳性克隆子的菌落 PCR 筛选 | 第51页 |
| 3.6.3 P39 蛋白的诱导表达与纯化结果 | 第51-52页 |
| 3.6.4 免疫血清 Western blot 检测结果 | 第52-53页 |
| 结论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 在校研究成果 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
