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井冈霉素诱导ILP2调控褐飞虱雌虫生殖和种群变化的机制

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
第一章 文献综述第9-14页
    1 药剂诱导褐飞虱再猖獗研究概况第9-10页
        1.1 害虫再猖獗定义第9页
        1.2 农药诱导褐飞虱再猖獗机制第9-10页
    2 胰岛素信号传导通路在昆虫中的研究第10-12页
        2.1 胰岛素第10-11页
        2.2 昆虫类胰岛素多肽(ILPs)的功能第11-12页
        2.3 昆虫胰岛素(Insulin)信号通路第12页
    3 高通量转录组学(RNA-seq)第12-13页
        3.1 转录组学研究技术与方法第12-13页
        3.2 在昆虫中的应用领域第13页
    4 研究目的及意义第13-14页
第二章 井冈霉素处理的褐飞虱转录组分析及差异基因ILP2的鉴定第14-30页
    1 前言第14页
    2 材料和方法第14-19页
        2.1 供试水稻第14-15页
        2.2 供试虫源和药剂第15页
        2.3 药剂处理第15页
        2.4 转录组学分析第15-17页
            2.4.1 转录组与表达谱分析对比组第15页
            2.4.2 褐飞虱数字基因表达谱RNA-seq测序第15-17页
            2.4.3 褐飞虱转录组denovo测序第17页
        2.5 荧光定量第17-19页
            2.5.1 RNA提取第17-18页
            2.5.2 设计简并引物第18页
            2.5.3 合成cDNA第18-19页
            2.5.4 定量第19页
    3 结果与分析第19-27页
        3.1 褐飞虱转录组分析第19-27页
            3.1.1 褐飞虱转录组的拼接和注释第19-20页
            3.1.2 褐飞虱unigenes COG和KEGG注释的功能分类第20-22页
            3.1.3 差异基因和Pathway显著性富集分析第22-27页
        3.2 井冈霉素处理对ILPs的影响第27页
    4 讨论第27-30页
第三章 沉默ILP2基因对褐飞虱生殖和种群增长的影响第30-52页
    1 试验材料第30-31页
        1.1 供试水稻第30-31页
        1.2 供试虫源第31页
        1.3 供试农药第31页
    2 方法第31-38页
        2.1 药剂处理第31页
        2.2 dsRNA的合成第31-35页
            2.2.1 提取RNA第31页
            2.2.2 合成cDNA第31页
            2.2.3 设计引物第31-33页
            2.2.4 大肠杆菌感受态细胞转化第33页
            2.2.5 试剂盒合成dsRNA第33-35页
        2.3 dsILP2处理第35-36页
        2.4 实时荧光定量检测第36页
        2.5 褐飞虱雌虫产卵量、产卵前期、产卵历期和寿命测定第36页
        2.6 褐飞虱雌虫生理生化测定第36-37页
            2.6.1 胰岛素含量的测定第36页
            3.6.2 保幼激素蜕皮激素滴度的测定第36页
            2.6.3 体重的测定和体型的比较第36-37页
            2.6.4 脂肪体内共生菌含量的测定第37页
            2.6.5 褐飞虱雌虫脂肪体和卵巢蛋白质含量的测定第37页
        2.7 褐飞虱成虫内生殖器的解剖第37页
        2.8 免疫印迹分析(Western blot检测)第37-38页
        2.9 免疫荧光标记第38页
        2.10 褐飞虱种群(F1代)的数量、孵化率和雌雄比测定第38页
        2.11 数据统计分析第38页
    3 结果与分析第38-49页
        3.1 ILP2沉默效率分析第38-39页
        3.2 沉默ILP2对褐飞虱胰岛素通路下游基因表达的影响第39-40页
        3.3 沉默ILP2基因对褐飞虱生殖的影响第40-42页
        3.4 沉默ILP2对褐飞虱雌虫体内胰岛素含量的影响第42页
        3.5 沉默ILP2基因对褐飞虱体内蜕皮激素滴度和保幼激素滴度的影响第42-43页
        3.6 沉默ILP2基因对褐飞虱雌虫体重及体型大小的影响第43-45页
        3.7 沉默ILP2基因对褐飞虱雌虫生殖器官的影响第45页
        3.8 沉默ILP2对褐飞虱雌虫脂肪体内类酵母共生菌数量丰富度的影响第45-46页
        3.9 沉默ILP2基因对褐飞虱雌虫脂肪体和卵巢蛋白质含量的影响第46-47页
        3.10 沉默ILP2对Vg在褐飞虱中表达量的影响第47-48页
        3.11 沉默ILP2对Vg在褐飞虱卵巢中定位及表达的影响第48-49页
        3.12 沉默ILP2对褐飞虱种群(F1代)的影响第49页
    4 讨论第49-52页
总结第52-54页
参考文献第54-66页
致谢第66-68页
攻读学位期间发表的学术论文目录第68-69页

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