摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 文献综述 | 第9-14页 |
1 药剂诱导褐飞虱再猖獗研究概况 | 第9-10页 |
1.1 害虫再猖獗定义 | 第9页 |
1.2 农药诱导褐飞虱再猖獗机制 | 第9-10页 |
2 胰岛素信号传导通路在昆虫中的研究 | 第10-12页 |
2.1 胰岛素 | 第10-11页 |
2.2 昆虫类胰岛素多肽(ILPs)的功能 | 第11-12页 |
2.3 昆虫胰岛素(Insulin)信号通路 | 第12页 |
3 高通量转录组学(RNA-seq) | 第12-13页 |
3.1 转录组学研究技术与方法 | 第12-13页 |
3.2 在昆虫中的应用领域 | 第13页 |
4 研究目的及意义 | 第13-14页 |
第二章 井冈霉素处理的褐飞虱转录组分析及差异基因ILP2的鉴定 | 第14-30页 |
1 前言 | 第14页 |
2 材料和方法 | 第14-19页 |
2.1 供试水稻 | 第14-15页 |
2.2 供试虫源和药剂 | 第15页 |
2.3 药剂处理 | 第15页 |
2.4 转录组学分析 | 第15-17页 |
2.4.1 转录组与表达谱分析对比组 | 第15页 |
2.4.2 褐飞虱数字基因表达谱RNA-seq测序 | 第15-17页 |
2.4.3 褐飞虱转录组denovo测序 | 第17页 |
2.5 荧光定量 | 第17-19页 |
2.5.1 RNA提取 | 第17-18页 |
2.5.2 设计简并引物 | 第18页 |
2.5.3 合成cDNA | 第18-19页 |
2.5.4 定量 | 第19页 |
3 结果与分析 | 第19-27页 |
3.1 褐飞虱转录组分析 | 第19-27页 |
3.1.1 褐飞虱转录组的拼接和注释 | 第19-20页 |
3.1.2 褐飞虱unigenes COG和KEGG注释的功能分类 | 第20-22页 |
3.1.3 差异基因和Pathway显著性富集分析 | 第22-27页 |
3.2 井冈霉素处理对ILPs的影响 | 第27页 |
4 讨论 | 第27-30页 |
第三章 沉默ILP2基因对褐飞虱生殖和种群增长的影响 | 第30-52页 |
1 试验材料 | 第30-31页 |
1.1 供试水稻 | 第30-31页 |
1.2 供试虫源 | 第31页 |
1.3 供试农药 | 第31页 |
2 方法 | 第31-38页 |
2.1 药剂处理 | 第31页 |
2.2 dsRNA的合成 | 第31-35页 |
2.2.1 提取RNA | 第31页 |
2.2.2 合成cDNA | 第31页 |
2.2.3 设计引物 | 第31-33页 |
2.2.4 大肠杆菌感受态细胞转化 | 第33页 |
2.2.5 试剂盒合成dsRNA | 第33-35页 |
2.3 dsILP2处理 | 第35-36页 |
2.4 实时荧光定量检测 | 第36页 |
2.5 褐飞虱雌虫产卵量、产卵前期、产卵历期和寿命测定 | 第36页 |
2.6 褐飞虱雌虫生理生化测定 | 第36-37页 |
2.6.1 胰岛素含量的测定 | 第36页 |
3.6.2 保幼激素蜕皮激素滴度的测定 | 第36页 |
2.6.3 体重的测定和体型的比较 | 第36-37页 |
2.6.4 脂肪体内共生菌含量的测定 | 第37页 |
2.6.5 褐飞虱雌虫脂肪体和卵巢蛋白质含量的测定 | 第37页 |
2.7 褐飞虱成虫内生殖器的解剖 | 第37页 |
2.8 免疫印迹分析(Western blot检测) | 第37-38页 |
2.9 免疫荧光标记 | 第38页 |
2.10 褐飞虱种群(F1代)的数量、孵化率和雌雄比测定 | 第38页 |
2.11 数据统计分析 | 第38页 |
3 结果与分析 | 第38-49页 |
3.1 ILP2沉默效率分析 | 第38-39页 |
3.2 沉默ILP2对褐飞虱胰岛素通路下游基因表达的影响 | 第39-40页 |
3.3 沉默ILP2基因对褐飞虱生殖的影响 | 第40-42页 |
3.4 沉默ILP2对褐飞虱雌虫体内胰岛素含量的影响 | 第42页 |
3.5 沉默ILP2基因对褐飞虱体内蜕皮激素滴度和保幼激素滴度的影响 | 第42-43页 |
3.6 沉默ILP2基因对褐飞虱雌虫体重及体型大小的影响 | 第43-45页 |
3.7 沉默ILP2基因对褐飞虱雌虫生殖器官的影响 | 第45页 |
3.8 沉默ILP2对褐飞虱雌虫脂肪体内类酵母共生菌数量丰富度的影响 | 第45-46页 |
3.9 沉默ILP2基因对褐飞虱雌虫脂肪体和卵巢蛋白质含量的影响 | 第46-47页 |
3.10 沉默ILP2对Vg在褐飞虱中表达量的影响 | 第47-48页 |
3.11 沉默ILP2对Vg在褐飞虱卵巢中定位及表达的影响 | 第48-49页 |
3.12 沉默ILP2对褐飞虱种群(F1代)的影响 | 第49页 |
4 讨论 | 第49-52页 |
总结 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-66页 |
致谢 | 第66-68页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第68-69页 |