| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-19页 |
| 1.1 性控冻精的生产研究及应用 | 第13页 |
| 1.2 性控冻精的制备方法 | 第13页 |
| 1.3 性控冻精存在的问题 | 第13-14页 |
| 1.4 性控冻精氧化损伤研究进展 | 第14-16页 |
| 1.4.1 性控冻精ROS的种类及产生方式 | 第14-15页 |
| 1.4.2 性控冻精生产、冷冻及解冻过程中受到的氧化损伤 | 第15页 |
| 1.4.3 ROS对精子氧化损伤作用机制 | 第15-16页 |
| 1.5 抗氧化剂的应用 | 第16-17页 |
| 1.5.1 白藜芦醇在精液中的作用机制 | 第16-17页 |
| 1.5.2 褪黑素在精液中的作用机制 | 第17页 |
| 1.6 研究展望 | 第17页 |
| 1.7 本研究的立题依据及研究内容 | 第17-19页 |
| 1.7.1 立题依据 | 第17-18页 |
| 1.7.2 研究内容 | 第18-19页 |
| 第二章 不同浓度白藜芦醇处理对奶牛性控冻精质量及体外受精能力的影响 | 第19-35页 |
| 2.1 前言 | 第19-20页 |
| 2.2 材料 | 第20-22页 |
| 2.2.1 试验材料 | 第20页 |
| 2.2.2 主要实验设备 | 第20页 |
| 2.2.3 试验验试剂及染料 | 第20-21页 |
| 2.2.4 试验相关溶液的配制 | 第21-22页 |
| 2.3 试验方法 | 第22-24页 |
| 2.3.1 卵母细胞采集和体外成熟 | 第22页 |
| 2.3.2 性控冻精的准备 | 第22页 |
| 2.3.3 性控冻精中ROS含量测定 | 第22页 |
| 2.3.4 性控冻精中PS外翻测定 | 第22-23页 |
| 2.3.5 性控冻精中Δψm水平检测 | 第23页 |
| 2.3.6 性控冻精中ATP含量检测 | 第23页 |
| 2.3.7 性控冻精中MDA含量检测 | 第23页 |
| 2.3.8 性控冻精中顶体完整性检测 | 第23页 |
| 2.3.9 性控冻精受精能力检测 | 第23-24页 |
| 2.3.10 性控胚胎BAX和BCL2L1mRNAs表达量分析 | 第24页 |
| 2.3.11 数据统计与分析 | 第24页 |
| 2.4 实验结果 | 第24-32页 |
| 2.4.1 不同浓度Res处理对奶牛性控冻精ROS水平的影响 | 第24-25页 |
| 2.4.2 不同浓度Res处理对奶牛性控冻精PS外翻的影响 | 第25-26页 |
| 2.4.3 不同浓度Res处理对奶牛性控冻精Δψm的影响 | 第26-27页 |
| 2.4.4 不同浓度Res处理对奶牛性控冻精ATP含量的影响 | 第27-28页 |
| 2.4.5 不同浓度Res处理对奶牛性控冻精MDA含量的影响 | 第28-29页 |
| 2.4.6 不同浓度Res处理对奶牛性控冻精顶体完整性的影响 | 第29-30页 |
| 2.4.7 不同浓度Res处理对奶牛性控冻精IVF能力的影响 | 第30-31页 |
| 2.4.8 不同浓度Res处理对奶牛性控囊胚中BAX和BCL2L1mRNAs表达量的影响 | 第31-32页 |
| 2.5 讨论 | 第32-35页 |
| 2.5.1 不同浓度Res处理对奶牛性控冻精ROS水平的影响 | 第32页 |
| 2.5.2 不同浓度Res处理对奶牛性控冻精PS外翻的影响 | 第32页 |
| 2.5.3 不同浓度Res处理对奶牛性控冻精Δψm的影响 | 第32-33页 |
| 2.5.4 不同浓度Res对奶牛性控冻精ATP含量的影响 | 第33页 |
| 2.5.5 不同浓度Res对奶牛性控冻精MDA含量的影响 | 第33页 |
| 2.5.6 不同浓度Res对奶牛性控冻精顶体完整性的影响 | 第33页 |
| 2.5.7 不同浓度Res对奶牛性控冻精IVF能力的影响 | 第33-34页 |
| 2.5.8 不同浓度Res处理对奶牛性控囊胚中BAX和BCL2L1mRNAs表达量的影响 | 第34-35页 |
| 第三章 不同浓度褪黑素处理对奶牛性控冻精质量和受精能力的影响 | 第35-55页 |
| 3.1 前言 | 第35页 |
| 3.2 材料 | 第35-37页 |
| 3.2.1 试验材料 | 第35页 |
| 3.2.2 主要试验仪器 | 第35-36页 |
| 3.2.3 试验试剂及染料 | 第36页 |
| 3.2.4 试验相关溶液的配制 | 第36-37页 |
| 3.3 试验方法 | 第37-41页 |
| 3.3.1 牛卵母细胞采集和体外成熟 | 第37-38页 |
| 3.3.2 性控冻精的处理 | 第38页 |
| 3.3.3 性控冻精中ROS水平的测定 | 第38页 |
| 3.3.4 性控冻精中内源性抗氧化酶活力水平的测定 | 第38-39页 |
| 3.3.5 性控冻精中PS外翻的测定 | 第39页 |
| 3.3.6 性控冻精中Δψm水平的测定 | 第39页 |
| 3.3.7 性控冻精中MDA水平的测定 | 第39页 |
| 3.3.8 性控冻精顶体完整性的测定 | 第39页 |
| 3.3.9 性控冻精中精子获能状态的测定 | 第39-40页 |
| 3.3.10 性控冻精[Ca~(2+)]i水平的测定 | 第40页 |
| 3.3.11 性控冻精中cAMP含量的测定 | 第40页 |
| 3.3.12 性控冻精体外受精能力的测定 | 第40页 |
| 3.3.13 数据统计与分析 | 第40-41页 |
| 3.4 实验结果与分析 | 第41-52页 |
| 3.4.1 不同浓度MT处理对奶牛性控冻精ROS水平的影响 | 第41页 |
| 3.4.2 不同浓度MT处理对奶牛性控冻精内源性抗氧化酶活力水平的影响 | 第41-42页 |
| 3.4.3 不同浓度MT处理对奶牛性控冻精PS外翻的影响 | 第42-44页 |
| 3.4.4 不同浓度MT处理对奶牛性控冻精线粒体Δψm的影响 | 第44-45页 |
| 3.4.5 不同浓度MT处理对奶牛性控冻精MDA含量的影响 | 第45-46页 |
| 3.4.6 不同浓度MT处理对奶牛性控冻精顶体完整性的影响 | 第46-47页 |
| 3.4.7 不同浓度MT处理对奶牛性控冻精精子获能状态的影响 | 第47-49页 |
| 3.4.8 不同浓度MT处理对奶牛性控冻精胞内cAMP含量的影响 | 第49页 |
| 3.4.9 不同浓度MT处理对奶牛性控冻精[Ca~(2+)]i含量的影响 | 第49-51页 |
| 3.4.10 不同浓度MT处理对奶牛性控冻精IVF效率的影响 | 第51-52页 |
| 3.5 讨论 | 第52-55页 |
| 3.5.1 不同浓度MT对奶牛性控冻精ROS含量的影响 | 第52页 |
| 3.5.2 不同浓度MT对奶牛性控冻精内源性抗氧化酶活力水平的影响 | 第52页 |
| 3.5.3 不同浓度MT对奶牛性控冻精凋亡事件PS外翻和Δψm的影响。 | 第52-53页 |
| 3.5.4 不同浓度MT对奶牛性控冻精氧化代谢产物MDA的影响。 | 第53页 |
| 3.5.5 不同浓度MT对奶牛性控冻精顶体完整性的影响 | 第53页 |
| 3.5.6 不同浓度MT对奶牛性控冻精获能相关事件的影响 | 第53-54页 |
| 3.5.7 不同浓度MT对奶牛性控冻精IVF的影响研究 | 第54-55页 |
| 第四章 褪黑素受体抑制剂对奶牛性控冻精获能的影响 | 第55-62页 |
| 4.1 前言 | 第55页 |
| 4.2 材料 | 第55-56页 |
| 4.2.1 试验材料 | 第55页 |
| 4.2.2 主要试验仪器 | 第55-56页 |
| 4.2.3 试验试剂及染料 | 第56页 |
| 4.2.4 试验相关溶液的配制 | 第56页 |
| 4.3 试验方法 | 第56-57页 |
| 4.3.1 利用Westernblot检测奶牛性控精子中MT1和MT2受体 | 第56页 |
| 4.3.2 通过添加MT1和MT2受体抑制剂检测MT受体的功能 | 第56页 |
| 4.3.3 数据统计与分析 | 第56-57页 |
| 4.4 实验结果 | 第57-60页 |
| 4.4.1 奶牛性控冻精精子MT1和MT2受体检测 | 第57页 |
| 4.4.2 MT受体抑制剂处理对奶牛性控冻精获能状态的影响 | 第57-59页 |
| 4.4.3 MT受体抑制剂处理对奶牛性控冻精[Ca~(2+)]i水平的影响 | 第59页 |
| 4.4.4 MT受体抑制剂处理对奶牛性控冻精胞内cAMP水平的影响 | 第59-60页 |
| 4.6 讨论 | 第60-62页 |
| 第五章 全文结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 作者简介 | 第73页 |
