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基于树突状细胞模型探讨大粒车前子多糖免疫调节活性的构效关系及其作用机制

摘要第3-5页
Abstract第5-7页
缩略语第14-17页
第1章 绪论第17-43页
    1.1 概述第17-19页
    1.2 机体免疫与免疫细胞第19-25页
        1.2.1 自然杀伤细胞第19-20页
        1.2.2 单核/巨噬细胞第20-21页
        1.2.3 T淋巴细胞第21-22页
        1.2.4 B淋巴细胞第22-23页
        1.2.5 树突状细胞第23-25页
    1.3 多糖的生物学活性第25-29页
    1.4 免疫细胞模式识别受体及其信号转导通路第29-34页
    1.5 大粒车前子多糖的研究现状第34-41页
    1.6 本研究的主要内容与创新性第41-43页
第2章 基团修饰大粒车前子多糖的免疫调节活性第43-79页
    2.1 引言第43页
    2.2 主要仪器与试剂第43-45页
        2.2.1 实验材料第43-44页
        2.2.2 实验仪器第44页
        2.2.3 实验试剂第44-45页
        2.2.4 相关溶液的制备第45页
    2.3 实验方法第45-53页
        2.3.1 体外树突状细胞模型的建立第45-46页
        2.3.2 大粒车前子精制多糖的制备第46页
        2.3.3 大粒车前子多糖羧甲基化修饰反应第46-48页
        2.3.4 大粒车前子多糖乙酰化修饰反应第48-49页
        2.3.5 大粒车前子多糖硫酸化修饰反应第49页
        2.3.6 基团修饰大粒车前子多糖的免疫调节活性第49-53页
    2.4 实验结果第53-77页
        2.4.1 大粒车前子多糖羧甲基化修饰反应条件的研究第53-56页
        2.4.2 大粒车前子多糖乙酰化修饰反应条件的研究第56-60页
        2.4.3 羧甲基化大粒车前子多糖的免疫调节活性第60-65页
        2.4.4 乙酰化化大粒车前子多糖的免疫调节活性第65-71页
        2.4.5 硫酸化大粒车前子多糖的免疫调节活性第71-77页
    2.5 讨论与小结第77-79页
第3章 化学降解获得的大粒车前子多糖片段的免疫调节活性第79-89页
    3.1 引言第79页
    3.2 实验材料与仪器第79-80页
        3.2.1 主要仪器第79-80页
        3.2.2 主要试剂第80页
    3.3 实验方法第80-81页
        3.3.1 部分酸水解法制备大粒车前子多糖片段第80页
        3.3.2 高碘酸氧化法制备大粒车前子多糖片段第80页
        3.3.3 实验分组第80页
        3.3.4 大粒车前子多糖片段对树突状细胞表达表面分子的影响第80-81页
        3.3.5 大粒车前子多糖片段对树突状细胞吞噬功能的影响第81页
        3.3.6 大粒车前子多糖片段对树突状细胞分泌细胞因子IL-12p70的影响第81页
        3.3.7 大粒车前子多糖片段对树突状细胞合成趋化因子受体mRNA的影响第81页
        3.3.8 大粒车前子多糖片段对树突状细胞刺激T淋巴细胞增殖能力的影响第81页
    3.4 实验结果第81-88页
        3.4.1 大粒车前子多糖片段对树突状细胞表达MHCII表面分子的影响第81-82页
        3.4.2 大粒车前子多糖片段对树突状细胞表达CD86表面分子的影响第82-83页
        3.4.3 大粒车前子多糖片段对树突状细胞表达CD80表面分子的影响第83-85页
        3.4.4 大粒车前子多糖片段对树突状细胞吞噬能力的影响第85页
        3.4.5 大粒车前子多糖片段对树突状细胞分泌IL-12p70细胞因子的影响第85-86页
        3.4.6 大粒车前子多糖片段对树突状细胞合成趋化因子受体mRNA的影响第86-87页
        3.4.7 大粒车前子多糖片段对树突状细胞刺激T淋巴细胞增殖能力的影响第87-88页
    3.5 讨论与小结第88-89页
第4章 酶解大粒车前子多糖的免疫调节活性第89-105页
    4.1 引言第89页
    4.2 实验材料与仪器第89-90页
        4.2.1 主要仪器第89页
        4.2.2 主要试剂第89-90页
    4.3 实验方法第90-92页
        4.3.1 葡萄糖淀粉酶酶解大粒车前子多糖的制备第90页
        4.3.2 果胶酶酶解大粒车前子多糖的制备第90页
        4.3.3 实验分组第90-91页
        4.3.4 酶解大粒车前子多糖对树突状细胞表达表面分子的影响第91页
        4.3.5 酶解大粒车前子多糖对树突状细胞吞噬功能的影响第91页
        4.3.6 酶解大粒车前子多糖对树突状细胞分泌细胞因子IL-12p70的影响第91页
        4.3.7 酶解大粒车前子多糖对树突状细胞合成趋化因子受体mRNA的影响第91页
        4.3.8 酶解大粒车前子多糖对树突状细胞刺激T淋巴细胞增殖能力的影响第91-92页
    4.4 实验结果第92-103页
        4.4.1 葡萄糖淀粉酶酶解大粒车前子多糖的免疫调节活性第92-97页
        4.4.2 果胶酶酶解大粒车前子多糖的免疫调节活性第97-103页
    4.5 讨论与小结第103-105页
第5章 大粒车前子多糖糖醛酸还原产物的免疫调节活性第105-114页
    5.1 引言第105页
    5.2 实验材料与仪器第105页
        5.2.1 主要仪器第105页
        5.2.2 主要试剂第105页
    5.3 实验方法第105-107页
        5.3.1 大粒车前子多糖糖醛酸还原产物的制备第105-106页
        5.3.2 实验分组第106页
        5.3.3 大粒车前子多糖糖醛酸还原产物对树突状细胞表达表面分子的影响第106页
        5.3.4 大粒车前子多糖糖醛酸还原产物对树突状细胞吞噬功能的影响第106页
        5.3.5 大粒车前子多糖糖醛酸还原产物对树突状细胞分泌细胞因子IL-12p70的影响第106-107页
        5.3.6 大粒车前子多糖糖醛酸还原产物对树突状细胞合成趋化因子受体m RNA 的影响第107页
        5.3.7 大粒车前子多糖糖醛酸还原产物对树突状细胞刺激T淋巴细胞增殖能力的影响第107页
    5.4 实验结果第107-113页
        5.4.1 大粒车前子多糖糖醛酸还原产物对树突状细胞表达MHCII表面分子的影响第107页
        5.4.2 大粒车前子多糖糖醛酸还原产物对树突状细胞表达CD86表面分子的影响第107-109页
        5.4.3 大粒车前子多糖糖醛酸还原产物对树突状细胞表达CD80表面分子的影响第109-110页
        5.4.4 大粒车前子多糖糖醛酸还原产物对树突状细胞吞噬能力的影响第110页
        5.4.5 大粒车前子多糖糖醛酸还原产物对树突状细胞分泌IL-12p70细胞因子的影响第110-112页
        5.4.6 大粒车前子多糖糖醛酸还原产物对树突状细胞合成趋化因子受体m RNA 的影响第112-113页
        5.4.7 大粒车前子多糖糖醛酸还原产物对树突状细胞刺激T淋巴细胞增殖能力的影响第113页
    5.5 讨论与小结第113-114页
第6章 多种修饰法对大粒车前子多糖免疫调节活性改善功效的比较研究第114-120页
    6.1 引言第114页
    6.2 实验方法第114-115页
        6.2.1 实验分组第114页
        6.2.2 大粒车前子多糖结构修饰物对树突状细胞表达表面分子的影响第114页
        6.2.3 大粒车前子多糖结构修饰物对树突状细胞分泌细胞因子IL-12p70的影响第114-115页
        6.2.4 大粒车前子多糖结构修饰物对树突状细胞刺激T淋巴细胞增殖能力的影响第115页
    6.3 实验结果第115-119页
        6.3.1 大粒车前子多糖结构修饰物对树突状细胞表达MHCII表面分子的影响第115-117页
        6.3.2 大粒车前子多糖结构修饰物对树突状细胞表达CD86表面分子的影响第117页
        6.3.3 大粒车前子多糖结构修饰物对树突状细胞分泌IL-12p70细胞因子的影响第117-118页
        6.3.4 大粒车前子多糖结构修饰物对树突状细胞刺激 T 淋巴细胞增殖能力的影响第118-119页
    6.4 讨论与小结第119-120页
第7章 大粒车前子多糖诱导树突状细胞成熟的信号转导机制研究第120-133页
    7.1 引言第120-121页
    7.2 实验材料与仪器第121-122页
        7.2.1 实验仪器第121页
        7.2.2 实验试剂第121页
        7.2.3 相关溶液的制备第121-122页
    7.3 实验方法第122-124页
        7.3.1 大粒车前子多糖的纯化第122页
        7.3.2 实验分组第122-123页
        7.3.3 TLR4受体、MAPK及NF-κB信号通路阻断树突状细胞模型的建立第123页
        7.3.4 WesternBlot法检测树突状细胞MAPK、NF-κB通路磷酸化水平第123页
        7.3.5 流式细胞术检测树突状细胞表面分子表达水平第123-124页
        7.3.6 流式细胞术检测树突状细胞吞噬能力第124页
        7.3.7 ELISA法检测树突状细胞细胞因子分泌水平第124页
        7.3.8 MTT法检测树突状细胞刺激T淋巴细胞增殖能力第124页
    7.4 实验结果第124-130页
        7.4.1 大粒车前子多糖对树突状细胞MAPK及NF-κB通路激活的影响第124-126页
        7.4.2 TLR-4、MAPK、NF-κB通路阻断对树突状细胞表达MHCII表面分子的影响第126-127页
        7.4.3 TLR-4、MAPK、NF-κB通路阻断对树突状细胞表达CD86表面分子的影响第127-128页
        7.4.4 TLR-4、MAPK与NF-κB通路阻断对树突状细胞吞噬功能的影响第128-129页
        7.4.5 TLR-4、MAPK、NF-κB通路阻断对树突状细胞分泌细胞因子的影响第129-130页
        7.4.6 TLR-4、MAPK、NF-κB通路阻断对树突状细胞刺激T淋巴细胞功能的影响第130页
    7.5 讨论与小结第130-133页
第8章 结论与展望第133-136页
    8.1 本研究主要结论第133-134页
    8.2 进一步的研究方向第134页
    8.3 研究展望第134-136页
致谢第136-137页
参考文献第137-155页
攻读学位期间的主要研究成果第155页

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