摘要 | 第6-8页 |
abstract | 第8-9页 |
英文缩略表 | 第13-14页 |
第一章 引言 | 第14-19页 |
1.1 禽流感病毒概述 | 第14页 |
1.2 重组的流感病毒在自然界的流行与影响 | 第14-17页 |
1.2.1 在野鸟内发生的重组现象 | 第15-16页 |
1.2.2 在家禽中发生重组现象 | 第16-17页 |
1.3 重组对禽流感病毒传播的影响 | 第17-18页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
第二章 含有WSN病毒基因的重组H9N2亚型流感病毒复制能力研究 | 第19-31页 |
2.1 实验材料 | 第19-20页 |
2.1.1 实验动物、菌种、质粒与细胞株 | 第19页 |
2.1.2 主要试剂 | 第19页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第19-20页 |
2.1.4 生物学软件 | 第20页 |
2.1.5 引物序列 | 第20页 |
2.2 实验方法 | 第20-25页 |
2.2.1 质粒的鉴定与纯化 | 第20-21页 |
2.2.2 重组病毒拯救与鉴定 | 第21-23页 |
2.2.3 重组病毒滴度的测定 | 第23-24页 |
2.2.4 病毒在MDCK细胞上生长曲线 | 第24页 |
2.2.5 病毒在小鼠体内复制能力的测定 | 第24页 |
2.2.6 H9N2聚合酶单基因活性的测定 | 第24-25页 |
2.2.7 统计学分析 | 第25页 |
2.3 实验结果 | 第25-28页 |
2.3.1 病毒的拯救与鉴定 | 第25-26页 |
2.3.2 病毒滴度测定 | 第26-27页 |
2.3.3 病毒在MDCK细胞上生长曲线 | 第27页 |
2.3.4 病毒在小鼠体内复制能力的测定 | 第27-28页 |
2.3.5 H9N2聚合酶单基因活性的测定 | 第28页 |
2.4 讨论 | 第28-31页 |
第三章 拯救病毒传代与生物信息学分析 | 第31-46页 |
3.1 实验材料 | 第31-33页 |
3.1.1 病毒株和细胞株 | 第31页 |
3.1.2 主要试剂 | 第31页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第31页 |
3.1.4 生物学软件 | 第31页 |
3.1.5 引物序列 | 第31-33页 |
3.1.6 Barcode序列 | 第33页 |
3.2 实验方法 | 第33-37页 |
3.2.1 病毒在MDCK细胞上传代 | 第33-34页 |
3.2.2 病毒在小鼠体内传代 | 第34页 |
3.2.3 MDCK细胞上传代病毒与小鼠体内传代病毒样品的制备 | 第34-36页 |
3.2.4 IlluminaMiSeq平台测序 | 第36页 |
3.2.5 数据分析 | 第36-37页 |
3.3 实验结果 | 第37-43页 |
3.3.1 病毒在MDCK细胞上传代的结果 | 第37-38页 |
3.3.2 病毒在小鼠体内的复制结果 | 第38-39页 |
3.3.3 HA、M、NS基因分片段PCR电泳结果 | 第39页 |
3.3.4 数据分析结果 | 第39-43页 |
3.4 讨论 | 第43-46页 |
第四章 全文结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
作者简介 | 第56页 |