摘要 | 第2-4页 |
Abstract | 第4-6页 |
符号说明 | 第10-11页 |
1 绪论 | 第11-23页 |
1.1 人体肠道菌群 | 第11-15页 |
1.1.1 人体肠道菌群的结构组成 | 第11-13页 |
1.1.2 人体肠道菌群的主要功能 | 第13-14页 |
1.1.3 人体肠道菌群与年龄关系的研究进展 | 第14-15页 |
1.2 肠道菌群的研究方法 | 第15-17页 |
1.2.1 肠道乳酸菌的纯培养法 | 第15页 |
1.2.2 变性梯度凝胶电泳 | 第15-16页 |
1.2.3 实时荧光定量 | 第16-17页 |
1.2.4 其他研究肠道菌群的分子生物学技术 | 第17页 |
1.3 研究目的、意义及主要内容 | 第17-18页 |
1.3.1 研究目的与意义 | 第17-18页 |
1.3.2 主要研究内容 | 第18页 |
1.4 参考文献 | 第18-23页 |
2 应用纯培养法研究分离自广西巴马不同年龄人群肠道的乳酸菌数量及其耐受性和抑菌能力 | 第23-35页 |
2.1 材料和设备 | 第23页 |
2.1.1 主要仪器和设备 | 第23页 |
2.1.2 试剂与材料 | 第23页 |
2.2 试验方法 | 第23-27页 |
2.2.1 溶液及培养基的配制 | 第23-24页 |
2.2.2 样品采集及保存 | 第24页 |
2.2.3 肠道乳酸菌的分离与计数 | 第24-25页 |
2.2.4 肠道乳酸菌的初步鉴定 | 第25-26页 |
2.2.5 肠道乳酸菌的保藏 | 第26页 |
2.2.6 肠道乳酸菌耐胆盐能力的测定 | 第26页 |
2.2.7 肠道乳酸菌耐受人工胃液能力的测定 | 第26页 |
2.2.8 肠道乳酸菌耐受人工肠液能力的测定 | 第26-27页 |
2.2.9 肠道乳酸菌抑制致病菌能力的测定 | 第27页 |
2.2.10 统计学处理 | 第27页 |
2.3 结果与分析 | 第27-32页 |
2.3.1 样品信息 | 第27-28页 |
2.3.2 肠道乳酸菌的分离及初步鉴定 | 第28-30页 |
2.3.3 分离的不同年龄人群肠道乳酸菌总数的比较 | 第30-31页 |
2.3.4 分离的不同年龄人群的肠道乳酸菌的耐受能力的比较 | 第31页 |
2.3.5 分离的不同年龄人群肠道乳酸菌对致病菌的抑制能力比较 | 第31-32页 |
2.4 小结 | 第32-33页 |
2.5 参考文献 | 第33-35页 |
3 应用PCR-DGGE技术研究广西巴马不同年龄人群肠道菌群 | 第35-54页 |
3.1 材料和设备 | 第35页 |
3.1.1 主要仪器和设备 | 第35页 |
3.1.2 试剂与材料 | 第35页 |
3.2 试验方法 | 第35-41页 |
3.2.1 常用溶液或试剂的配制 | 第35-36页 |
3.2.2 粪便样品的采集 | 第36页 |
3.2.3 粪便样品基因组DNA的提取 | 第36-37页 |
3.2.4 粪便菌群组成的变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析 | 第37-39页 |
3.2.5 DGGE胶优势条带的回收及克隆测序 | 第39-41页 |
3.2.6 PCR-DGGE条带分析 | 第41页 |
3.3 结果与分析 | 第41-51页 |
3.3.1 优势菌群DGGE结果分析 | 第41-43页 |
3.3.2 拟杆菌DGGE结果分析 | 第43-45页 |
3.3.3 柔嫩梭菌属DGGE结果分析 | 第45-47页 |
3.3.4 双歧杆菌DGGE结果分析 | 第47-49页 |
3.3.5 乳杆菌DGGE结果分析 | 第49-51页 |
3.4 小结 | 第51-52页 |
3.5 参考文献 | 第52-54页 |
4 应用RT-PCR技术研究广西巴马不同年龄人群肠道菌群 | 第54-63页 |
4.1 材料和设备 | 第54页 |
4.1.1 主要仪器和设备 | 第54页 |
4.1.2 试剂与材料 | 第54页 |
4.2 试验方法 | 第54-57页 |
4.2.1 粪便样品的采集 | 第54页 |
4.2.2 粪便样品基因组DNA的提取 | 第54页 |
4.2.3 引物的设计及合成 | 第54-55页 |
4.2.4 常规PCR反应 | 第55页 |
4.2.5 RT-PCR反应 | 第55-57页 |
4.2.6 待测样品的定量 | 第57页 |
4.2.7 统计学处理 | 第57页 |
4.3 结果与分析 | 第57-60页 |
4.3.1 人体肠道细菌RT-PCR标准曲线 | 第57-59页 |
4.3.2 不同年龄人群粪便细菌定量结果 | 第59-60页 |
4.4 小结 | 第60-61页 |
4.5 参考文献 | 第61-63页 |
5 结论 | 第63-64页 |
6 致谢 | 第64-65页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第65-66页 |