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转基因油菜毛状根对重金属镉胁迫响应及其转录组学研究

致谢第5-6页
摘要第6-8页
ABSTRACT第8-10页
1 引言第13-20页
    1.1 重金属镉污染植物修复的研究进展第13-16页
        1.1.1 重金属镉对植物细胞的毒害作用及对必需元素代谢的影响第13-14页
        1.1.2 重金属镉在植物体内的吸收、转运、累积第14-16页
    1.2 毛状根组织在镉污染植物修复中的应用第16-17页
    1.3 转录组学及其在重金属镉污染植物修复中的应用第17-18页
        1.3.1 转录组学及RNA测序技术第18页
        1.3.2 转录组学在植物响应重金属胁迫研究中的应用第18页
    1.4 课题的研究目的、意义和技术路线第18-20页
        1.4.1 研究目的和意义第19页
        1.4.2 技术路线第19-20页
2 实验材料和方法第20-40页
    2.1 实验材料第20-24页
        2.1.1 生物材料第20页
        2.1.2 试剂盒和相关试剂第20-21页
        2.1.3 仪器信息第21-22页
        2.1.4 试剂的配制第22-24页
    2.2 实验方法第24-40页
        2.2.1 转基因油菜毛状根稳定体系的建立方法第24-25页
        2.2.2 转基因油菜毛状根镉胁迫实验的设计第25页
        2.2.3 镉胁迫下油菜毛状根生长状况和生物量的检测第25-26页
        2.2.4 荧光探针检测转基因油菜毛状根中的ROS含量第26页
        2.2.5 转基因油菜毛状根抗氧化酶活力的测定第26-29页
        2.2.6 转基因油菜毛状根细胞损伤程度的检测第29-30页
        2.2.7 转基因油菜毛状根中镉及其他必需元素含量的测定第30-31页
        2.2.8 转基因油菜毛状根总RNA提取样品的准备和处理第31页
        2.2.9 转基因油菜毛状根总RNA质量的检测第31-32页
        2.2.10 转录组测序方法及数据分析第32-34页
        2.2.11 Real Time PCR RNA水平验证第34-37页
        2.2.12 Western Blotting蛋白水平的验证第37-39页
        2.2.13 数据处理和统计学分析第39-40页
3 实验结果与讨论第40-65页
    3.1 转基因油菜毛状根系统稳定性的检验第40页
    3.2 镉胁迫下转基因油菜毛状根的生长状况及生物量分析第40-42页
    3.3 镉胁迫下转基因油菜毛状根中ROS的积累分析第42-43页
    3.4 镉胁迫对转基因油菜毛状根抗氧化还原酶活力的影响第43-45页
    3.5 镉胁迫下转基因油菜毛状根细胞损伤程度分析第45-47页
        3.5.1 MDA检测膜脂过氧化损伤程度第45-46页
        3.5.2 PI染色法测定毛状根细胞的凋亡程度第46-47页
    3.6 镉胁迫下转基因油菜毛状根中镉及其他必需元素含量的分析第47-49页
    3.7 油菜毛状根总RNA质量的检测结果第49-50页
    3.8 过滤后的Reads质量统计第50-51页
    3.9 参考基因组比对结果第51页
    3.10 样品相关性及层次聚类分析第51-53页
    3.11 差异表达基因的检测结果第53-55页
    3.12 差异表达基因GO功能分析结果第55-57页
    3.13 差异表达基因Pathway功能分析结果第57-59页
    3.14 Real Time PCR验证转录组测序的准确性第59-61页
    3.15 Western Blotting蛋白水平验证目的蛋白的表达量变化第61-65页
4 结论第65-66页
参考文献第66-71页
附录A第71-74页
作者简历及攻读硕士学位期间取得的研究成果第74-76页
学位论文数据集第76页

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