致谢 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
1 引言 | 第13-20页 |
1.1 重金属镉污染植物修复的研究进展 | 第13-16页 |
1.1.1 重金属镉对植物细胞的毒害作用及对必需元素代谢的影响 | 第13-14页 |
1.1.2 重金属镉在植物体内的吸收、转运、累积 | 第14-16页 |
1.2 毛状根组织在镉污染植物修复中的应用 | 第16-17页 |
1.3 转录组学及其在重金属镉污染植物修复中的应用 | 第17-18页 |
1.3.1 转录组学及RNA测序技术 | 第18页 |
1.3.2 转录组学在植物响应重金属胁迫研究中的应用 | 第18页 |
1.4 课题的研究目的、意义和技术路线 | 第18-20页 |
1.4.1 研究目的和意义 | 第19页 |
1.4.2 技术路线 | 第19-20页 |
2 实验材料和方法 | 第20-40页 |
2.1 实验材料 | 第20-24页 |
2.1.1 生物材料 | 第20页 |
2.1.2 试剂盒和相关试剂 | 第20-21页 |
2.1.3 仪器信息 | 第21-22页 |
2.1.4 试剂的配制 | 第22-24页 |
2.2 实验方法 | 第24-40页 |
2.2.1 转基因油菜毛状根稳定体系的建立方法 | 第24-25页 |
2.2.2 转基因油菜毛状根镉胁迫实验的设计 | 第25页 |
2.2.3 镉胁迫下油菜毛状根生长状况和生物量的检测 | 第25-26页 |
2.2.4 荧光探针检测转基因油菜毛状根中的ROS含量 | 第26页 |
2.2.5 转基因油菜毛状根抗氧化酶活力的测定 | 第26-29页 |
2.2.6 转基因油菜毛状根细胞损伤程度的检测 | 第29-30页 |
2.2.7 转基因油菜毛状根中镉及其他必需元素含量的测定 | 第30-31页 |
2.2.8 转基因油菜毛状根总RNA提取样品的准备和处理 | 第31页 |
2.2.9 转基因油菜毛状根总RNA质量的检测 | 第31-32页 |
2.2.10 转录组测序方法及数据分析 | 第32-34页 |
2.2.11 Real Time PCR RNA水平验证 | 第34-37页 |
2.2.12 Western Blotting蛋白水平的验证 | 第37-39页 |
2.2.13 数据处理和统计学分析 | 第39-40页 |
3 实验结果与讨论 | 第40-65页 |
3.1 转基因油菜毛状根系统稳定性的检验 | 第40页 |
3.2 镉胁迫下转基因油菜毛状根的生长状况及生物量分析 | 第40-42页 |
3.3 镉胁迫下转基因油菜毛状根中ROS的积累分析 | 第42-43页 |
3.4 镉胁迫对转基因油菜毛状根抗氧化还原酶活力的影响 | 第43-45页 |
3.5 镉胁迫下转基因油菜毛状根细胞损伤程度分析 | 第45-47页 |
3.5.1 MDA检测膜脂过氧化损伤程度 | 第45-46页 |
3.5.2 PI染色法测定毛状根细胞的凋亡程度 | 第46-47页 |
3.6 镉胁迫下转基因油菜毛状根中镉及其他必需元素含量的分析 | 第47-49页 |
3.7 油菜毛状根总RNA质量的检测结果 | 第49-50页 |
3.8 过滤后的Reads质量统计 | 第50-51页 |
3.9 参考基因组比对结果 | 第51页 |
3.10 样品相关性及层次聚类分析 | 第51-53页 |
3.11 差异表达基因的检测结果 | 第53-55页 |
3.12 差异表达基因GO功能分析结果 | 第55-57页 |
3.13 差异表达基因Pathway功能分析结果 | 第57-59页 |
3.14 Real Time PCR验证转录组测序的准确性 | 第59-61页 |
3.15 Western Blotting蛋白水平验证目的蛋白的表达量变化 | 第61-65页 |
4 结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-71页 |
附录A | 第71-74页 |
作者简历及攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第74-76页 |
学位论文数据集 | 第76页 |