| 缩略语表 | 第5-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 引言 | 第11-14页 |
| 实验材料 | 第14-20页 |
| 实验方法 | 第20-38页 |
| 1. 细胞培养 | 第20页 |
| 2. 细胞总蛋白/核蛋白的提取 | 第20页 |
| 3. BCA法检测蛋白浓度 | 第20-21页 |
| 4. Real Time PCR | 第21-24页 |
| 5. Western blotting | 第24-26页 |
| 6. 免疫共沉淀(Co-IP) | 第26-27页 |
| 7. Tranwell体外侵袭实验 | 第27-28页 |
| 8. CCK8法检测细胞增殖 | 第28页 |
| 9. 流式检测细胞凋亡 | 第28页 |
| 10. siRNA干扰USP22或STAT3的表达 | 第28-29页 |
| 11. 明胶酶谱法 | 第29-30页 |
| 12. 细胞免疫化学染色 | 第30页 |
| 13. 质粒大量提取 | 第30-31页 |
| 14. 不同质粒共转染细胞 | 第31页 |
| 15. 组织芯片免疫化学染色 | 第31-32页 |
| 16. pRetro-X-Tight-hUSP22-Pro表达载体的构建 | 第32-37页 |
| 17. 统计学方法 | 第37-38页 |
| 实验结果 | 第38-65页 |
| 1. USP22通过去泛素化SIRT1降低乙酰化STAT3的表达 | 第38-42页 |
| 1.1 293T细胞中USP22有去泛素化SIRT1的作用 | 第38-39页 |
| 1.2 293T细胞中USP22与STAT3存在相互作用 | 第39页 |
| 1.3 293T细胞中USP22没有去泛素化STAT3的作用 | 第39-40页 |
| 1.4 293T细胞中USP22通过SIRT1降低STAT3乙酰化水平 | 第40-41页 |
| 1.5 293T细胞中USP22降低STAT3乙酰化水平 | 第41-42页 |
| 2. 人结肠癌细胞中USP22/SIRT1/STAT3的表达及相互作用 | 第42-48页 |
| 2.1 Western Blotting检测USP22在六种结肠癌细胞系的表达情况 | 第42-43页 |
| 2.2 HT29、SW480细胞中敲低USP22后SIRT1表达下降,乙酰化STAT3表达升高 | 第43-45页 |
| 2.3 HT29、SW480细胞中USP22与SIRT1、STAT3形成蛋白复合体 | 第45-46页 |
| 2.4 HT29、SW480细胞中293T细胞中USP22通过SIRT1降低STAT3乙酰化水平 | 第46-48页 |
| 3. 敲低USP22影响STAT3靶基因MMP9、TWIST的表达 | 第48-52页 |
| 3.1 STAT3侵袭转移、血管生成相关信号通路分子筛查 | 第48-49页 |
| 3.2 HT29、SW480细胞中敲低USP22之后MMP9、TWIST表达明显升高 | 第49-50页 |
| 3.3 HT29、SW480细胞中敲低USP22不影响Hifl-α、VEGF的表达 | 第50-51页 |
| 3.4 HCT1 16细胞中敲低USP22不影响MMP9、TWIST的表达 | 第51-52页 |
| 4. USP22抑制STAT3在结肠癌细胞侵袭中的作用 | 第52-58页 |
| 4.1 siRNA可有效下调STAT3在HT29、SW480细胞中的表达 | 第52-53页 |
| 4.2 HT29、SW480细胞中联合敲低USP22/STAT3之后STAT3乙酰化水平较单独敲低STAT3明显升高 | 第53-54页 |
| 4.3 HT29、SW480细胞中联合敲低USP22/STAT3之后MMP9/TWIST mRNA水平较单独敲低STAT3明显升高 | 第54-55页 |
| 4.4 HT29、SW480细胞中联合敲低USP22/STAT3之后细胞侵袭能力较单独敲低STAT3明显增高 | 第55-57页 |
| 4.5 HT29、SW480细胞中联合敲低USP22/STAT3之后细胞增殖能力较单独敲低STAT3明显下降 | 第57页 |
| 4.6 HT29、SW480细胞中联合敲低USP22/STAT3之后细胞凋亡比例较单独敲低STAT3没有明显变化 | 第57-58页 |
| 5. 体内研究USP22可能负向调控MMP9表达、结肠癌的侵袭 | 第58-63页 |
| 5.1 人类结肠癌组织芯片中USP22表达与MMP9表达成低度正相关 | 第58-60页 |
| 5.2 USP22在结肠癌侵袭前沿低表达,MMP9高表达 | 第60-61页 |
| 5.3 人类结肠癌组织芯片中USP22、STAT3、MMP9表达与临床病理特征无关 | 第61-63页 |
| 6. 四环素调控USP22表达的逆转录病毒的包装 | 第63-65页 |
| 6.1 pRetroX-Tight-hUSP22-Pro表达载体的构建 | 第63-64页 |
| 6.2 四环素调控USP22表达的逆转录病毒的包装 | 第64-65页 |
| 讨论 | 第65-70页 |
| 小结 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-79页 |
| 文献综述 | 第79-101页 |
| 参考文献 | 第91-101页 |
| 附录：已发表文章 | 第101-103页 |
| 致谢 | 第103-104页 |
| 个人简历 | 第104-105页 |
