| 中文摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 引言 | 第11-17页 |
| 1.1 C反应蛋白简介 | 第11页 |
| 1.2 单体C反应蛋白简介 | 第11-13页 |
| 1.2.1 mCRP在体来源机制 | 第11-12页 |
| 1.2.1.1 局部表达 | 第12页 |
| 1.2.1.2 局部解离 | 第12页 |
| 1.2.2 mCRP体外来源途径 | 第12-13页 |
| 1.3 配体简介 | 第13-17页 |
| 1.3.1 ApoB | 第13页 |
| 1.3.2 C1q | 第13-14页 |
| 1.3.3 FN | 第14页 |
| 1.3.4 Collagen Ⅵ | 第14-15页 |
| 1.3.5 CollagenⅠ | 第15页 |
| 1.3.6 FIB | 第15页 |
| 1.3.7 Ch | 第15-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-27页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-19页 |
| 2.1.1 蛋白 | 第17-18页 |
| 2.1.1.1 CRP | 第17页 |
| 2.1.1.2 Elisa板中碱性环境下由CRP解离得到的mCRP(简称mmCRP) | 第17页 |
| 2.1.1.3 脲变性mCRP(简称mCRP) | 第17页 |
| 2.1.1.4 经DTT处理的mCRP(简称dmCRP) | 第17-18页 |
| 2.1.1.5 重组mCRP(简称rmCRP) | 第18页 |
| 2.1.1.6 双抗原性单分子mCRPm(简称mCRPm) | 第18页 |
| 2.1.1.7 抗体 | 第18页 |
| 2.1.2 配体 | 第18页 |
| 2.1.3 肽段 | 第18-19页 |
| 2.1.3.1 CRP野生型肽段 | 第18页 |
| 2.1.3.2 CRP肽段35-47序列相近肽段 | 第18页 |
| 2.1.3.3 CRP肽段35-47点突变肽段 | 第18-19页 |
| 2.1.3.4 CRP肽段35-47修饰肽段 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-24页 |
| 2.2.1 酶联免疫吸附实验 | 第19-21页 |
| 2.2.1.1 配体结合曲线 | 第19-20页 |
| 2.2.1.2 配体固相系统竞争Elisa | 第20页 |
| 2.2.1.3 配体ApoB液相系统竞争Elisa | 第20-21页 |
| 2.2.2 聚丙稀铣胺凝胶电泳(PAGE)及染色 | 第21-23页 |
| 2.2.2.1 变性SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳 | 第21-22页 |
| 2.2.2.2 非变性SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳 | 第22页 |
| 2.2.2.3 凝胶染色 | 第22-23页 |
| 2.2.3 蛋白透析 | 第23页 |
| 2.2.3.1 透析袋的处理 | 第23页 |
| 2.2.3.2 透析液配制 | 第23页 |
| 2.2.3.3 变性剂配制 | 第23页 |
| 2.2.3.4 蛋白脲变性 | 第23页 |
| 2.2.4 BCA法测蛋白浓度 | 第23-24页 |
| 2.2.5 圆二色谱 | 第24页 |
| 2.3 数据处理方法 | 第24-27页 |
| 2.3.1 配体ApoB液相系统 | 第24-25页 |
| 2.3.1.1 mCRP-ApoB结合曲线 | 第24页 |
| 2.3.1.2 mCRP-ApoB-肽段竞争实验 | 第24-25页 |
| 2.3.1.3 mCRP-ApoB结合中,肽段35-47竞争曲线 | 第25页 |
| 2.3.2 配体固相系统 | 第25-27页 |
| 2.3.2.1 配体-mCRP结合曲线 | 第25页 |
| 2.3.2.2 配体-mCRP-肽段竞争实验 | 第25-26页 |
| 2.3.2.3 配体-mCRP结合中,肽段35-47竞争曲线 | 第26-27页 |
| 第三章 结果与分析 | 第27-81页 |
| 3.1 CRP野生型肽段研究 | 第27-34页 |
| 3.1.1 肽段对应的CRP上氨基酸序列的功能 | 第27-28页 |
| 3.1.1.1 信号肽 | 第27页 |
| 3.1.1.2 肽段35-47 | 第27页 |
| 3.1.1.3 肽段47-63 | 第27页 |
| 3.1.1.4 肽段63-83 | 第27页 |
| 3.1.1.5 肽段83-90 | 第27页 |
| 3.1.1.6 肽段115-123 | 第27-28页 |
| 3.1.1.7 肽段136-153 | 第28页 |
| 3.1.1.8 肽段166-178 | 第28页 |
| 3.1.1.9 肽段174-185 | 第28页 |
| 3.1.1.10 肽段199-206 | 第28页 |
| 3.1.2 肽段的基础化学性质 | 第28-34页 |
| 3.1.2.1 肽段的氨基酸序列、平均分子量和等电点 | 第28-29页 |
| 3.1.2.2 肽段的带电荷情况和疏水/亲水性 | 第29-30页 |
| 3.1.2.3 肽段的二级结构 | 第30-34页 |
| 3.2 配体ApoB实验结果与分析 | 第34-43页 |
| 3.2.1 配体ApoB液相系统实验结果与分析 | 第34-38页 |
| 3.2.1.1 mCRP-ApoB结合曲线 | 第34-35页 |
| 3.2.1.2 mCRP-ApoB-CRP野生型肽段竞争实验 | 第35页 |
| 3.2.1.3 mCRP-ApoB结合中,肽段35-47竞争曲线 | 第35-36页 |
| 3.2.1.4 mCRP-ApoB结合中,肽段35-47改造肽段竞争实验 | 第36-37页 |
| 3.2.1.4.1 肽段35-47序列相近肽段竞争实验 | 第36-37页 |
| 3.2.1.4.2 肽段35-47点突变肽段竞争实验 | 第37页 |
| 3.2.1.5 不同状态单体CRP-ApoB结合中,肽段35-47竞争 | 第37-38页 |
| 3.2.2 配体ApoB固相系统实验结果与分析圆二色谱 | 第38-43页 |
| 3.2.2.1 ApoB-mCRP结合曲线 | 第38-39页 |
| 3.2.2.2 ApoB-mCRP-CRP野生型肽段竞争实验 | 第39-40页 |
| 3.2.2.3 ApoB-mCRP结合中,肽段35-47竞争曲线 | 第40-41页 |
| 3.2.2.4 ApoB-mCRP结合中,肽段35-47改造肽段竞争实验 | 第41-42页 |
| 3.2.2.4.1 肽段35-47序列相近肽段竞争实验 | 第41页 |
| 3.2.2.4.2 肽段35-47点突变肽段竞争实验 | 第41-42页 |
| 3.2.2.5 ApoB-不同状态单体CRP结合中,肽段35-47竞争 | 第42-43页 |
| 3.3 配体C1q固相系统实验结果与分析 | 第43-49页 |
| 3.3.1 C1q-mCRP结合曲线 | 第43-44页 |
| 3.3.2 C1q-mCRP-CRP野生型肽段竞争实验 | 第44-45页 |
| 3.3.3 C1q-mCRP结合中,肽段35-47竞争曲线 | 第45-46页 |
| 3.3.4 C1q-mCRP结合中,肽段35-47改造肽段竞争实验 | 第46-49页 |
| 3.3.4.1 肽段35-47序列相近肽段竞争实验 | 第46页 |
| 3.3.4.2 肽段35-47点突变肽段竞争实验 | 第46-47页 |
| 3.3.4.3 肽段35-47修饰肽段竞争实验 | 第47-49页 |
| 3.4 配体FN固相系统实验结果与分析 | 第49-55页 |
| 3.4.1 FN-mCRP结合曲线 | 第49-50页 |
| 3.4.2 FN-mCRP-CRP野生型肽段竞争实验 | 第50-51页 |
| 3.4.3 FN-mCRP结合中,肽段35-47竞争曲线 | 第51-52页 |
| 3.4.4 FN-mCRP结合中,肽段35-47序列相近肽段竞争实验 | 第52-55页 |
| 3.4.4.1 肽段35-47序列相近肽段竞争实验 | 第52页 |
| 3.4.4.2 肽段35-47点突变肽段竞争实验 | 第52-53页 |
| 3.4.4.3 肽段35-47修饰肽段竞争实验 | 第53-55页 |
| 3.5 配体Collagen Ⅵ固相系统实验结果与分析 | 第55-61页 |
| 3.5.1 Collagen Ⅵ-mCRP结合曲线 | 第55-56页 |
| 3.5.2 Collagen Ⅵ-mCRP-CRP野生型肽段竞争实验 | 第56-57页 |
| 3.5.3 Collagen Ⅵ-mCRP结合中,肽段35-47竞争曲线 | 第57-58页 |
| 3.5.4 Collagen Ⅵ-mCRP结合中,肽段35-47序列相近肽段竞争 | 第58-61页 |
| 3.5.4.1 肽段35-47序列相近肽段竞争实验 | 第58页 |
| 3.5.4.2 肽段35-47点突变肽段竞争实验 | 第58-59页 |
| 3.5.4.3 肽段35-47修饰肽段竞争实验 | 第59-61页 |
| 3.6 配体CollagenⅠ固相系统实验结果与分析 | 第61-67页 |
| 3.6.1 Collagen Ⅰ-mCRP结合曲线 | 第61-62页 |
| 3.6.2 Collagen Ⅰ-mCRP-CRP野生型肽段竞争实验 | 第62-63页 |
| 3.6.3 Collagen Ⅰ-mCRP结合中,肽段35-47竞争曲线 | 第63-64页 |
| 3.6.4 Collagen Ⅰ-mCRP结合中,肽段35-47序列相近肽段竞争 | 第64-67页 |
| 3.6.4.1 肽段35-47序列相近肽段竞争实验 | 第64页 |
| 3.6.4.2 肽段35-47点突变肽段竞争实验 | 第64-65页 |
| 3.6.4.3 肽段35-47修饰肽段竞争实验 | 第65-67页 |
| 3.7 配体FIB固相系统实验结果与分析 | 第67-73页 |
| 3.7.1 FIB-mCRP结合曲线 | 第67-68页 |
| 3.7.2 FIB-mCRP-CRP野生型肽段竞争实验 | 第68-69页 |
| 3.7.3 FIB-mCRP结合中,肽段35-47竞争曲线 | 第69-70页 |
| 3.7.4 FIB-mCRP结合中,肽段35-47序列相近肽段竞争实验 | 第70-73页 |
| 3.7.4.1 肽段35-47序列相近肽段竞争实验 | 第70页 |
| 3.7.4.2 肽段35-47点突变肽段竞争实验 | 第70-71页 |
| 3.7.4.3 肽段35-47修饰肽段竞争实验 | 第71-73页 |
| 3.8 配体Ch固相系统实验结果与分析 | 第73-79页 |
| 3.8.1 Ch-mCRP结合曲线 | 第73-74页 |
| 3.8.2 Ch-mCRP-CRP野生型肽段竞争实验 | 第74-75页 |
| 3.8.3 Ch-mCRP结合中,肽段35-47竞争曲线 | 第75-76页 |
| 3.8.4 Ch-mCRP结合中,肽段35-47序列相近肽段竞争实验 | 第76-79页 |
| 3.8.4.1 肽段35-47序列相近肽段竞争实验 | 第76页 |
| 3.8.4.2 肽段35-47点突变肽段竞争实验 | 第76-77页 |
| 3.8.4.3 肽段35-47修饰肽段竞争实验 | 第77-79页 |
| 3.9 配体固相系统中BSA-mCRP与BSA-配体结合的结果与分析 | 第79-81页 |
| 第四章 讨论 | 第81-86页 |
| 4.1 讨论 | 第81-85页 |
| 4.1.1 肽段化学性质对最终实验结果可靠性的影响 | 第81-82页 |
| 4.1.2 修饰肽段35-47对其竞争效率的影响 | 第82-83页 |
| 4.1.3 肽段35-47突变肽与改造肽结果对比 | 第83页 |
| 4.1.4 ApoB固相和液相实验系统结果讨论 | 第83-85页 |
| 4.2 研究展望 | 第85-86页 |
| 4.2.1 肽段35-47的优化 | 第85页 |
| 4.2.2 肽段35-47对CRP-血小板相互作用的影响 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-90页 |
| 在学期间的研究成果 | 第90-91页 |
| 致谢 | 第91页 |
