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肽聚糖识别蛋白RfPGRP-S1在红棕象甲肠道菌群稳态维持过程中的作用机理

摘要第7-9页
Abstract第9-10页
1 前言第11-19页
    1.1 昆虫肠道菌群的组成与功能第11-12页
    1.2 肠道物理屏障在昆虫肠道菌群调控中的作用第12页
    1.3 免疫系统维持和调控肠道菌群稳态的作用机理第12-16页
        1.3.1 病原相关分子模式第13页
        1.3.2 肽聚糖识别蛋白的发现第13-14页
        1.3.3 PGRPs结构与特异性第14-15页
        1.3.4 PGRPs的功能第15-16页
    1.4 本研究的目的和意义第16-19页
        1.4.1 红棕象甲的生物学特性第16-17页
        1.4.2 本文的研究内容和拟解决的科学问题第17-19页
2 红棕象甲RfPGRP-S1序列及表达特征分析第19-33页
    2.1 实验材料第19-20页
        2.1.1 红棕象甲的饲养第19-20页
    2.2 实验方法第20-24页
        2.2.1 序列分析第20页
        2.2.2 不同组织总RNA的提取第20-21页
        2.2.3 供试细菌悬浮液的制备第21页
        2.2.4 细菌注射和喂食处理第21-22页
        2.2.5 荧光定量分析第22-24页
    2.3 结果与分析第24-33页
        2.3.1 红棕象甲RfPGRP-S1的序列特征与系统进化分析第24-28页
        2.3.2 红棕象甲RfPGRP-S1在不同组织中的表达量比较分析第28页
        2.3.3 不同细菌注射感染处理对红棕象甲脂肪体和肠道中的RfPGRP-S1基因表达丰度的影响第28-30页
        2.3.4 不同细菌喂食感染处理对红棕象甲脂肪体和肠道中的RfPGRP-S1基因表达丰度的影响第30-31页
        2.3.5 小结与讨论第31-33页
3 RfPGRP-S1的功能分析第33-65页
    3.1 实验材料第33-34页
        3.1.1 红棕象甲的饲养第33页
        3.1.2 重组RfPGRP-S1蛋白主要试剂和耗材第33-34页
        3.1.3 重组RfPGRP-S1蛋白主要实验仪器第34页
    3.2 实验方法第34-51页
        3.2.1 重组RfPGRP-S1蛋白表达第34-38页
        3.2.2 rRfPGRP-S1对革兰氏阴性菌E.coli和革兰氏阳性菌S.aureus的凝集实验第38-39页
        3.2.3 rRfPGRP-S1对革兰氏阴性菌E.coli和革兰氏阳性菌S.aureus的抗菌活性实验第39-40页
        3.2.4 dsRfPGRP-S1的制备第40-47页
        3.2.5 RfPGRP-S1基因沉默效率的检测第47页
        3.2.6 RfPGRP-S1干扰对清除注射感染的大肠杆菌能力的影响第47-48页
        3.2.7 RfPGRP-S1干扰对非肠道细菌在红棕象甲肠道中定殖的影响第48-49页
        3.2.8 RfPGRP-S1干扰对红棕象甲肠道菌群数量的影响第49页
        3.2.9 RfPGRP-S1干扰对红棕象甲肠道菌群结构组成及肠上皮抗菌肽的影响第49-51页
    3.3 结果与分析第51-65页
        3.3.1 重组RfPGRP-S1蛋白鉴定结果分析第51页
        3.3.2 重组RfPGRP-S1蛋白细菌凝集实验第51-52页
        3.3.3 红棕象甲重组RfPGRP-S1蛋白的抗菌活性测试第52-54页
        3.3.4 RNA干扰效率第54-55页
        3.3.5 RfPGRP-S1干扰对清除血淋巴和肠道感染的大肠杆菌能力的影响第55-58页
        3.3.6 RfPGRP-S1干扰对红棕象甲肠道菌群数量的影响第58-59页
        3.3.7 RfPGRP-S1干扰对红棕象甲肠道菌群组成及肠上皮抗菌肽的影响第59-63页
        3.3.8 小结与讨论第63-65页
4 结论与展望第65-66页
    4.1 结论第65页
    4.2 展望第65页
    4.3 本研究的创新性第65-66页
参考文献第66-74页
硕士在读期间的学术论文发表情况第74-75页
致谢第75页

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