| 摘要 | 第11-12页 |
| Abstract | 第12页 |
| 1 引言 | 第13-21页 |
| 1.1 镉污染现状及危害 | 第13-14页 |
| 1.2 镉的肝毒性作用 | 第14-15页 |
| 1.2.1 镉的肝脏器官毒性 | 第14页 |
| 1.2.2 镉的肝细胞毒性 | 第14页 |
| 1.2.3 镉致肝毒性机制 | 第14-15页 |
| 1.3 镉与氧化应激 | 第15-16页 |
| 1.3.1 氧化应激 | 第15页 |
| 1.3.2 镉致氧化应激 | 第15-16页 |
| 1.4 镉与内质网应激 | 第16-18页 |
| 1.4.1 内质网应激 | 第16-17页 |
| 1.4.2 镉致内质网应激 | 第17-18页 |
| 1.5 镉致自噬的作用 | 第18-19页 |
| 1.5.1 细胞自噬 | 第18-19页 |
| 1.5.2 镉致细胞自噬作用 | 第19页 |
| 1.6 研究的目的与意义 | 第19-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-29页 |
| 2.1 实验材料与方法 | 第21-23页 |
| 2.1.1 主要仪器 | 第21页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.3 主要试剂的配制 | 第22-23页 |
| 2.2 鸡肝细胞分离培养、鉴定及处理 | 第23-24页 |
| 2.2.1 鸡肝脏细胞的培养 | 第23页 |
| 2.2.2 鸡肝脏细胞的鉴定 | 第23页 |
| 2.2.3 鸡肝脏细胞的染镉处理 | 第23-24页 |
| 2.3 鸡肝细胞毒性的检测 | 第24页 |
| 2.3.1 镉致鸡肝细胞半数抑制浓度(IC50)的测定 | 第24页 |
| 2.3.2 鸡肝细胞活性的检测 | 第24页 |
| 2.3.3 LDH活性的检测 | 第24页 |
| 2.3.4 肝细胞功能酶活性的检测 | 第24页 |
| 2.4 鸡肝细胞的形态学观察 | 第24-25页 |
| 2.4.1 鸡肝细胞光镜观察 | 第24页 |
| 2.4.2 鸡肝细胞超微结构观察 | 第24-25页 |
| 2.5 鸡肝细胞抗氧化功能的检测 | 第25页 |
| 2.6 鸡肝细胞自由基含量的检测 | 第25页 |
| 2.6.1 鸡肝细胞ROS含量的检测 | 第25页 |
| 2.6.2 鸡肝细胞H_2O_2和·OH含量的检测 | 第25页 |
| 2.7 鸡肝细胞内质网应激的检测 | 第25-27页 |
| 2.7.1 鸡肝细胞XBP-1剪切的检测 | 第25-27页 |
| 2.7.2 鸡肝细胞GRP78、ATF4、ATF6 mRNA表达的检测 | 第27页 |
| 2.8 鸡肝细胞自噬检测的检测 | 第27-28页 |
| 2.8.1 鸡肝细胞自噬体的观察 | 第27-28页 |
| 2.8.2 鸡肝细胞自噬泡的观察 | 第28页 |
| 2.8.3 细胞自噬标志基因表达的检测结果 | 第28页 |
| 2.9 数据统计与分析 | 第28-29页 |
| 3 结果 | 第29-46页 |
| 3.1 原代鸡肝细胞分离培养与鉴定结果 | 第29-30页 |
| 3.2 镉致鸡肝细胞毒性作用 | 第30-32页 |
| 3.2.1 鸡肝细胞毒性检测结果 | 第30页 |
| 3.2.2 LDH活性检测结果 | 第30-31页 |
| 3.2.3 肝细胞功能酶活性检测结果 | 第31-32页 |
| 3.3 鸡肝细胞形态学观察 | 第32-34页 |
| 3.3.1 鸡肝细胞形态学观察结果 | 第32-33页 |
| 3.3.2 鸡肝细胞超微结构观察结果 | 第33-34页 |
| 3.4 鸡肝细胞抗氧化功能的检测结果 | 第34-36页 |
| 3.4.1 鸡肝细胞T-AOC检测结果 | 第34-35页 |
| 3.4.2 鸡肝细胞GST、GSH-PX、GR活性的检测结果 | 第35页 |
| 3.4.3 鸡肝细胞T-SOD、Cu Zn-SOD、CAT活性的检测结果 | 第35-36页 |
| 3.4.4 鸡肝细胞GSH、MDA含量的检测结果 | 第36页 |
| 3.5 鸡肝细胞自由基含量的检测结果 | 第36-37页 |
| 3.5.1 鸡肝细胞ROS含量的检测结果 | 第36-37页 |
| 3.5.2 鸡肝细胞H_2O_2含量的检测结果 | 第37页 |
| 3.5.3 鸡肝细胞·OH含量的检测结果 | 第37页 |
| 3.6 鸡肝细胞内质网应激的检测结果 | 第37-39页 |
| 3.6.1 鸡肝细胞XBP-1剪切的检测结果 | 第37-38页 |
| 3.6.2 鸡肝细胞GRP78、ATF4、ATF6 mRNA表达的检测结果 | 第38-39页 |
| 3.7 鸡肝细胞自噬检测结果 | 第39-42页 |
| 3.7.1 鸡肝细胞自噬体的观察 | 第39页 |
| 3.7.2 鸡肝细胞自噬泡的观察 | 第39-40页 |
| 3.7.3 细胞自噬标志分子基因表达的检测结果 | 第40-42页 |
| 3.8 自噬干扰剂对镉致鸡肝细胞活性毒性的影响 | 第42-46页 |
| 3.8.1 鸡肝细胞自噬干扰剂3-MA与RAP剂量的确定 | 第42-43页 |
| 3.8.2 自噬干扰剂对镉致鸡肝细胞活性变化的影响 | 第43页 |
| 3.8.3 自噬干扰剂对镉致鸡肝细胞自噬泡变化的影响 | 第43-44页 |
| 3.8.4 自噬干扰剂对镉致鸡肝细胞自噬标志基因表达变化的影响 | 第44-45页 |
| 3.8.5 自噬干扰剂对镉致鸡肝细胞内质网应激标志分子基因表达变化的影响 | 第45页 |
| 3.8.6 自噬干扰剂对镉致鸡肝细胞XBP-1剪切变化的影响 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-54页 |
| 4.1 原代鸡肝细胞体外的分离培养和鉴定 | 第46-47页 |
| 4.2 镉致鸡肝细胞的损伤作用 | 第47-48页 |
| 4.2.1 镉对鸡肝细胞活性的影响 | 第47页 |
| 4.2.2 镉对鸡肝细胞功能的影响 | 第47-48页 |
| 4.2.3 镉对鸡肝细胞形态的影响 | 第48页 |
| 4.3 镉致鸡肝细胞氧化应激 | 第48-49页 |
| 4.3.1 镉对鸡肝细胞抗氧化功能的影响 | 第48-49页 |
| 4.3.2 镉对鸡肝细胞自由基含量的影响 | 第49页 |
| 4.4 镉致鸡肝细胞内质网应激 | 第49-50页 |
| 4.4.1 镉对XBP-1剪切调控的影响 | 第49-50页 |
| 4.4.2 镉对鸡肝细胞内质网应激标志分子表达的影响 | 第50页 |
| 4.5 镉致鸡肝细胞自噬 | 第50-51页 |
| 4.5.1 镉诱导鸡肝细胞自噬的形态学观察 | 第50-51页 |
| 4.5.2 镉对鸡肝细胞自噬标志分子表达的影响 | 第51页 |
| 4.6 自噬在鸡肝细胞抵抗低浓度镉损伤中的作用 | 第51-54页 |
| 4.6.1 自噬在镉致鸡肝细胞毒性的作用 | 第52页 |
| 4.6.2 氧化应激在镉致鸡肝细胞自噬中的作用 | 第52页 |
| 4.6.3 内质网应激在镉致鸡肝细胞自噬中的作用 | 第52-54页 |
| 5 结论 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-69页 |
| 附录 | 第69-70页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第70页 |
