| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 插图和附表清单 | 第8-9页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第10-15页 |
| 1.1 针茅属植物的简介 | 第10页 |
| 1.2 水孔蛋白基因的功能简介及研究进展 | 第10-11页 |
| 1.3 实时荧光定量PCR技术 | 第11-12页 |
| 1.3.1 技术原理 | 第11-12页 |
| 1.3.2 优越性及应用 | 第12页 |
| 1.4 实时荧光定量PCR的内参基因 | 第12-13页 |
| 1.4.1 理想内参基因的要求 | 第12-13页 |
| 1.4.2 传统内参基因的缺陷 | 第13页 |
| 1.5 候选内参基因稳定性的分析方法 | 第13-14页 |
| 1.5.1 geNorm程序 | 第14页 |
| 1.5.2 NormFinder程序 | 第14页 |
| 1.6 本研究的目的及意义 | 第14-15页 |
| 2 材料与方法 | 第15-20页 |
| 2.1 实验材料 | 第15页 |
| 2.1.1 大针茅种子采集及幼苗处理 | 第15页 |
| 2.1.2 主要仪器设备及试剂 | 第15页 |
| 2.2 实验方法 | 第15-19页 |
| 2.2.1 大针茅总RNA提取和检测 | 第15-16页 |
| 2.2.2 大针茅cDNA的合成 | 第16-17页 |
| 2.2.3 候选内参基因的引物设计 | 第17-18页 |
| 2.2.4 候选内参基因目的片段的合成 | 第18-19页 |
| 2.2.5 候选内参基因的荧光定量PCR反应体系及程序 | 第19页 |
| 2.3 不同条件下PIP2亚家族基因的表达分析 | 第19-20页 |
| 2.4 荧光定量PCR数据分析 | 第20页 |
| 3 结果与分析 | 第20-31页 |
| 3.1 大针茅RNA的电泳检测 | 第20-21页 |
| 3.2 候选内参基因目的片段的克隆 | 第21页 |
| 3.3 候选内参基因引物特异性及qRT-PCR扩增效率 | 第21-25页 |
| 3.3.1 引物特异性 | 第21-23页 |
| 3.3.2 候选内参基因引物qRT-PCR扩增效率 | 第23-25页 |
| 3.4 内参基因qRT-PCR数据分析 | 第25-28页 |
| 3.4.1 △Ct值分析法 | 第25页 |
| 3.4.2 geNorm软件分析法 | 第25-27页 |
| 3.4.3 NormFinder软件分析法 | 第27页 |
| 3.4.4 干旱胁迫下最佳内参基因的获得 | 第27-28页 |
| 3.5 干旱胁迫下PIP2亚家族基因的表达差异 | 第28-31页 |
| 3.5.1 PIP2;1和PIP2；2基因qRT-PCR引物特异性 | 第28-29页 |
| 3.5.2 PIP2;1和PIP2；2基因标准曲线的制备 | 第29-30页 |
| 3.5.3 PIP2;1和PIP2；2基因的表达分析 | 第30-31页 |
| 4 讨论 | 第31-33页 |
| 4.1 内参基因的选择及稳定性 | 第31-32页 |
| 4.2 干旱胁迫下PIP2;1和PIP2; 2基因与大针茅的水分利用 | 第32-33页 |
| 5 结论 | 第33-34页 |
| 致谢 | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-40页 |
| 附录 | 第40-43页 |
| 作者简介 | 第43页 |
