| 主要英文缩写词 | 第4-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 目录 | 第10-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-21页 |
| 1.1 艾滋病的流行概况 | 第13-14页 |
| 1.2 HIV 的简介 | 第14-15页 |
| 1.2.1 HIV 分子结构特征 | 第14页 |
| 1.2.2 gp160 蛋白 | 第14页 |
| 1.2.3 rev 基因 | 第14-15页 |
| 1.3 DNA 疫苗 | 第15-16页 |
| 1.4 国内外 HIV 疫苗的研究进展 | 第16-18页 |
| 1.4.1 预防性 HIV 疫苗研究进展 | 第16-17页 |
| 1.4.2 治疗性 HIV 疫苗研究进展 | 第17-18页 |
| 1.5 课题背景 | 第18-19页 |
| 1.6 本研究的内容和意义 | 第19-21页 |
| 第2章 HIV-1 B/C 重组型 env 基因序列分析和假病毒构建 | 第21-37页 |
| 2.1 材料 | 第21-24页 |
| 2.1.1 试剂和工具酶 | 第21页 |
| 2.1.2 其他材料 | 第21页 |
| 2.1.3 引物合成 | 第21-22页 |
| 2.1.4 细胞和样品 | 第22页 |
| 2.1.5 血浆和抗体 | 第22页 |
| 2.1.6 菌株和质粒 | 第22页 |
| 2.1.7 试剂配制 | 第22-23页 |
| 2.1.8 仪器与设备 | 第23页 |
| 2.1.9 生物学软件 | 第23-24页 |
| 2.2 方法 | 第24-29页 |
| 2.2.1 HIV-1 基因分型鉴定 | 第24页 |
| 2.2.2 HIV-1 rev-env 基因的扩增 | 第24-25页 |
| 2.2.3 目的片段的回收、纯化及双酶切 | 第25页 |
| 2.2.4 目的片段与 pcDNA3.1（+）载体的连接、转化 | 第25-26页 |
| 2.2.5 阳性克隆的鉴定 | 第26页 |
| 2.2.6 序列的测定 | 第26页 |
| 2.2.7 核苷酸序列分析 | 第26页 |
| 2.2.8 氨基酸序列分析 | 第26页 |
| 2.2.9 HIV-1 假病毒的包装及滴度测定 | 第26-28页 |
| 2.2.10 假病毒对已知中和抗体的中和敏感性检测 | 第28页 |
| 2.2.11 假病毒对不同亚型感染者血浆的中和敏感性检测 | 第28-29页 |
| 2.3 实验结果 | 第29-34页 |
| 2.3.1 基因分型的系统进化树分析 | 第29页 |
| 2.3.2 巢式 PCR 扩增 rev-env 基因片段 | 第29-30页 |
| 2.3.3 PCR 产物与 pcDNA3.1（+）载体的连接及鉴定 | 第30-31页 |
| 2.3.4 基因亚型的鉴定及系统进化树分析 | 第31页 |
| 2.3.5 推导得到的氨基酸序列分析 | 第31-33页 |
| 2.3.6 假病毒的滴度测定 | 第33页 |
| 2.3.7 假病毒对已知中和抗体的中和敏感性检测 | 第33-34页 |
| 2.3.8 假病毒对不同亚型感染者血浆中和敏感性检测 | 第34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-36页 |
| 2.5 本章小结 | 第36-37页 |
| 第3章 表达 A/E 重组型 env 基因 DNA 疫苗免疫效果评价 | 第37-49页 |
| 3.1 材料 | 第37-39页 |
| 3.1.1 菌株及质粒 | 第37页 |
| 3.1.2 细胞和样品 | 第37页 |
| 3.1.3 试剂 | 第37页 |
| 3.1.4 试剂配制 | 第37-38页 |
| 3.1.5 抗体和刺激物 | 第38页 |
| 3.1.6 实验动物 | 第38页 |
| 3.1.7 实验仪器 | 第38-39页 |
| 3.2 方法 | 第39-44页 |
| 3.2.1 pVR-mod.AE env 质粒 DNA 疫苗的来源 | 第39页 |
| 3.2.2 酶切鉴定 pVR-mod.AE env 质粒 | 第39页 |
| 3.2.3 Western Blot 检测 pVR-mod.AE env 质粒 gp160 蛋白的表达 | 第39-40页 |
| 3.2.4 质粒 pVR-mod.AE env 扩增 | 第40页 |
| 3.2.5 动物分组及免疫 | 第40-41页 |
| 3.2.6 血清和脾淋巴细胞的采集 | 第41页 |
| 3.2.7 ELISPOT 筛选肽库及细胞免疫反应的检测 | 第41-43页 |
| 3.2.8 ELISA 检测小鼠血清中 IgG 抗体的滴度 | 第43-44页 |
| 3.3 实验结果 | 第44-46页 |
| 3.3.1 双酶切鉴定 pVR-mod.AE env 质粒 | 第44页 |
| 3.3.2 Western Blot 检测 pVR-mod.AE env 质粒 gp160 蛋白表达情况 | 第44-45页 |
| 3.3.3 gp160 肽库的筛选结果 | 第45页 |
| 3.3.4 ELISPOT 检测小鼠体内的细胞免疫反应 | 第45页 |
| 3.3.5 ELISA 检测血清中 IgG 抗体水平 | 第45-46页 |
| 3.4 讨论 | 第46-47页 |
| 3.5 本章小结 | 第47-49页 |
| 结论 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-59页 |
| 附录 | 第59-61页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第61-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
