樱桃锉叶病毒及樱桃叶斑驳病毒抗血清的制备和应用
| 英文符号说明 | 第4-9页 |
| 中文摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10页 |
| 1 前言 | 第11-23页 |
| 1.1 樱桃锉叶病毒和樱桃叶斑驳病毒 | 第11-16页 |
| 1.1.1 发生危害 | 第11-12页 |
| 1.1.2 分类地位 | 第12页 |
| 1.1.3 生物学特性 | 第12-14页 |
| 1.1.4 分子生物学特性 | 第14-16页 |
| 1.2 樱桃锉叶病毒和樱桃叶斑驳病毒的防治研究 | 第16-17页 |
| 1.2.1 农业防治 | 第16-17页 |
| 1.2.2 其他防治 | 第17页 |
| 1.3 樱桃锉叶病毒和樱桃叶斑驳病毒检测技术 | 第17-21页 |
| 1.3.1 生物学检测技术 | 第17-18页 |
| 1.3.2 电镜技术 | 第18页 |
| 1.3.3 分子生物学检测 | 第18-19页 |
| 1.3.4 血清学检测 | 第19-21页 |
| 1.4 研究的目的和意义 | 第21-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-39页 |
| 2.1 原核表达载体构建 | 第23-26页 |
| 2.1.1 试剂材料 | 第23页 |
| 2.1.2 载体构建 | 第23-26页 |
| 2.2 目的蛋白诱导表达 | 第26-28页 |
| 2.2.1 试剂材料 | 第26页 |
| 2.2.2 蛋白诱导表达 | 第26-28页 |
| 2.3 融合蛋白纯化及浓度测定 | 第28-30页 |
| 2.3.1 GST标签蛋白提取 | 第28-29页 |
| 2.3.2 融合蛋白浓度测定 | 第29-30页 |
| 2.4 抗血清制备与纯化 | 第30-33页 |
| 2.4.1 制备血清 | 第30-31页 |
| 2.4.2 抗血清纯化 | 第31-33页 |
| 2.5 抗血清检测田间样品 | 第33-35页 |
| 2.5.1 样品采集 | 第33页 |
| 2.5.2 ID-ELISA检测样品 | 第33页 |
| 2.5.3 Western blot验证 | 第33-35页 |
| 2.6 抗血清效价测定 | 第35页 |
| 2.7 植物样品外壳蛋白基因克隆 | 第35-39页 |
| 2.7.1 引物设计 | 第35页 |
| 2.7.2 试剂材料 | 第35页 |
| 2.7.3 植物样品外壳蛋白基因克隆 | 第35-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-53页 |
| 3.1 原核表达载体构建 | 第39-40页 |
| 3.2 目的蛋白的诱导表达 | 第40-42页 |
| 3.3 融合蛋白浓度测定 | 第42-43页 |
| 3.4 抗血清制备及植物样品血清学检测 | 第43-45页 |
| 3.4.1 ID-ELISA检测 | 第43页 |
| 3.4.2 Western blot验证 | 第43-45页 |
| 3.5 抗血清效价测定 | 第45-47页 |
| 3.6 植物样品克隆基因分析 | 第47-53页 |
| 3.6.1 目的基因的RT-PCR扩增和克隆 | 第47页 |
| 3.6.2 测序结果与序列分析 | 第47-50页 |
| 3.6.3 系统进化树 | 第50-53页 |
| 4 讨论 | 第53-55页 |
| 4.1 抗血清的制备与应用 | 第53页 |
| 4.2 序列克隆与分析 | 第53-55页 |
| 5 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
| 附录1：主要试剂缓冲液的配制 | 第63-66页 |
| 附录2：核苷酸序列BLAST结果 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 发表论文情况 | 第68页 |
