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樱桃锉叶病毒及樱桃叶斑驳病毒抗血清的制备和应用

英文符号说明第4-9页
中文摘要第9-10页
Abstract第10页
1 前言第11-23页
    1.1 樱桃锉叶病毒和樱桃叶斑驳病毒第11-16页
        1.1.1 发生危害第11-12页
        1.1.2 分类地位第12页
        1.1.3 生物学特性第12-14页
        1.1.4 分子生物学特性第14-16页
    1.2 樱桃锉叶病毒和樱桃叶斑驳病毒的防治研究第16-17页
        1.2.1 农业防治第16-17页
        1.2.2 其他防治第17页
    1.3 樱桃锉叶病毒和樱桃叶斑驳病毒检测技术第17-21页
        1.3.1 生物学检测技术第17-18页
        1.3.2 电镜技术第18页
        1.3.3 分子生物学检测第18-19页
        1.3.4 血清学检测第19-21页
    1.4 研究的目的和意义第21-23页
2 材料与方法第23-39页
    2.1 原核表达载体构建第23-26页
        2.1.1 试剂材料第23页
        2.1.2 载体构建第23-26页
    2.2 目的蛋白诱导表达第26-28页
        2.2.1 试剂材料第26页
        2.2.2 蛋白诱导表达第26-28页
    2.3 融合蛋白纯化及浓度测定第28-30页
        2.3.1 GST标签蛋白提取第28-29页
        2.3.2 融合蛋白浓度测定第29-30页
    2.4 抗血清制备与纯化第30-33页
        2.4.1 制备血清第30-31页
        2.4.2 抗血清纯化第31-33页
    2.5 抗血清检测田间样品第33-35页
        2.5.1 样品采集第33页
        2.5.2 ID-ELISA检测样品第33页
        2.5.3 Western blot验证第33-35页
    2.6 抗血清效价测定第35页
    2.7 植物样品外壳蛋白基因克隆第35-39页
        2.7.1 引物设计第35页
        2.7.2 试剂材料第35页
        2.7.3 植物样品外壳蛋白基因克隆第35-39页
3 结果与分析第39-53页
    3.1 原核表达载体构建第39-40页
    3.2 目的蛋白的诱导表达第40-42页
    3.3 融合蛋白浓度测定第42-43页
    3.4 抗血清制备及植物样品血清学检测第43-45页
        3.4.1 ID-ELISA检测第43页
        3.4.2 Western blot验证第43-45页
    3.5 抗血清效价测定第45-47页
    3.6 植物样品克隆基因分析第47-53页
        3.6.1 目的基因的RT-PCR扩增和克隆第47页
        3.6.2 测序结果与序列分析第47-50页
        3.6.3 系统进化树第50-53页
4 讨论第53-55页
    4.1 抗血清的制备与应用第53页
    4.2 序列克隆与分析第53-55页
5 结论第55-56页
参考文献第56-63页
附录1:主要试剂缓冲液的配制第63-66页
附录2:核苷酸序列BLAST结果第66-67页
致谢第67-68页
发表论文情况第68页

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